Повышение стрессоустойчивости: Что такое стрессоустойчивость и как ее повысить

Содержание

Развитие стрессоустойчивости | Способы повышения стрессоустойчивости

Часто от ускоренного темпа жизни нервная система человека очень быстро устает и истощается. В результате возникает стресс, который негативно влияет на способность правильно и объективно воспринимать окружающий мир. Советов, как повысить стрессоустойчивость, в интернете можно найти очень много. Но не все из них действительно помогут укрепить нервную систему.

Для начала давайте разберемся, для чего вообще нужна устойчивость к перенапряжению и какие его главные признаки. Это поможет лучше понимать принцип выработки нужных качеств организма. А понимая принципы, очень легко обучаться и усваивать полезную информацию.


Для чего нужна стрессоустойчивость


Стрессоустойчивость организма — это полезная защитная функция, позволяющая адаптироваться к внешним раздражителям или игнорировать их. Другими словами, это то, что дает вам возможность оставаться спокойными в любой ситуации. 

Возможность всегда оставаться спокойным и уравновешенным — это главный признак хорошо выработанной защиты от потрясений. Благодаря ей износ нервных узлов значительно замедляется. В результате вы достигнете гораздо большего, если не будете отвлекаться на любую мелкую неприятность.

Признаки стресса

Стресс рано или поздно настигает каждого из нас. Нужно знать, по каким признакам определить то, что уровень плохого влияния достаточно высокий.

  1. Повышенная раздражительность. Вы злитесь и нервничаете больше, чем обычно это бывает. 
  2. Растерянность и невнимательность. Восприимчивость выливается в невозможность собраться с мыслями и быстро среагировать на смену обстановки или обстоятельств.
  3. Усталость. Без видимой на то причины вам хочется закрыться от всего мира и просто лечь спать. 
  4. Агрессия. Вы резко реагируете на любое сказанное вам слово. При этом такая реакция проходит практически незаметно для вас самих, на уровне подсознания.
  5. Впечатлительность. Да, поддавшись влиянию стресса некоторые люди становятся слишком восприимчивы ко всему, что их окружает.

Виды стресса

В целом стресс делят на два вида: положительный и отрицательный. Положительный вызывает приятные потрясения. Здесь преобладают позитивные эмоции. Такое потрясение иногда полезно для организма, поскольку активизирует выработку полезных гормонов. 

Отрицательный стресс или дистресс — это крайне неприятное явление, разрушающее нормальное состояние психики. Его делят на две подгруппы, по-разному проявляющиеся:

  • Острый. Когда внезапный раздражитель угрожает нашему привычному состоянию. Реакции на любой фактор бывают разные. Уклонение, убегание от причины или же защита. В обоих случаях организму потребуется некоторое время, чтобы восстановить внутреннее равновесие.
  • Хронический. Постоянное нахождение в стрессогенной обстановке приводит к тому, что ежедневное влияние негатива подавляет все попытки подсознания от него защититься.


Стадии стресса

Изучение природы стресса показало, что в своем развитии он проходит три фазы. Каждая из них несет определенную угрозу организму. Потому нужно понимать, как протекает каждая из фаз, чтобы определить пути борьбы с ними.

  • Тревожность. На этой стадии начинается усиленная выработка адреналина и норадреналина. Человек понимает, что должен как-либо реагировать на сложившиеся обстоятельства. 
  • Сопротивление. Во второй фазе внутренние силы нервной системы мобилизуются. Это практически не затрагивает физическое здоровье, но человек постоянно на взводе, агрессивный и легковозбудимый.
  • Истощение. Самая опасная фаза наступает после длительного воздействия раздражителя. Организм тратит все ресурсы на борьбу с раздражителями. В результате таких действий развивается депрессия, нервные срывы и апатия.

Влияние стресса на здоровье

Частое или постоянное пребывание в неприятной и напряженной обстановке приводит к последствиям на физиологическом уровне. С чем же придется столкнуться вашему организму из-за постоянного напряжения?

  • Повышение выработки глюкозы для увеличения объема энергии приводит к развитию сахарного диабета.
  • Сокращение вилочковой железы, отвечающей за выработку лейкоцитов, значительно ослабляет общий иммунитет.
  • Постоянное напряжение и сокращение мышц постепенно приводит к их разрушению. Это же относится и к тканям внутренних органов.
  • Излишнее расширение капилляров нередко становится причиной их разрывов. В  результате образовываются гематомы и нарушается кровообращение. 
  • Нарушение обмена веществ становится причиной отравления токсинами, которые в обычном состоянии просто выводятся из организма.


Страдает также и психосоматическое здоровье, получая дозу негативного влияния:

  • Перепады настроения, всплески агрессии,
  • Потеря интереса к окружающему миру, апатия,
  • Нарушение сна, тревожность,
  • Развитие неврозов, частые головные боли,
  • Упадок сил, повышенная сонливость,
  • Формирование депрессии.


Вид стрессоустойчивости

Умение противостоять внешним факторам индивидуально для каждого. Ученые, занимающиеся исследованием природы перенапряжения, условно разделяют людей на четыре основных типа:

  • Стрессонеустойчивые. Такие люди остро реагируют на любые изменения, которые не отвечают из основному плану действий или привычному течению жизни. Критические ситуации вызывают у них всплески эмоций, которые практически не поддаются контролю.
  • Стрессотренируемые. Постепенные перемены воспринимаются такими людьми вполне спокойно. А вот резкие изменения способны вызывать депрессию, неуверенность в себе. Но со временем у них вырабатывается более спокойная реакция на негатив.
  • Стрессотормозные. Внезапные и резкие перемены в негативную сторону вызывают у таких людей повышенную активность. Они легко справляются с неожиданными проблемами. Постепенное же нарастание и течение стрессовых состояний способно сформировать хроническую депрессию.
  • Стрессоустойчивые.
    Это самая спокойная и стабильная личность. Практически любые жизненные обстоятельства воспринимаются спокойно. Способность адекватно мыслить и оценивать ситуацию очень сильно развита.


Как проверить стрессоустойчивость

Проверка на стрессоустойчивость личности становится все более модной на различных собеседованиях. Для определения своего уровня подготовки к изменениям стоит пройти небольшой тест, отвечая на вопросы. Это покажет вашу способность справляться с жизненными обстоятельствами. 

Еще один способ проверить свои внутренние силы — провести ДНК-анализ. Изучение вашего генетического кода покажет, насколько ваш организм подвержен влиянию негатива. Специалисты нашего центра помогут вам провести расшифровку полученной информации и дадут советы как повысить сопротивление стрессу.



Простой тест на проверку себя

Ученые бостонского университета разработали психологический тест, позволяющий выявить приблизительный уровень противодействия влиянию. Нужно честно формулировать ответ и суммировать полученные баллы. Вам необходимо в определенной степени согласиться или не согласиться с утверждением.

Ответы:

«почти всегда» — 1 балл,

«часто» — 2 балла,

«иногда» — 3 балла,

«почти никогда» — 4 балла,

«никогда» — 5 баллов.


Утверждения:

  • Я сплю 8 часов в сутки как минимум 4 раза в неделю.
  • У меня есть один друг, которому я могу полностью довериться.
  • Я могу организовать свое время достаточно эффективно.
  • За день я выпиваю не более 3 чашек кофе.
  • У меня много хороших знакомых.
  • Мой вес в норме.
  • Я занимаюсь общественной деятельностью.
  • Каждый день у меня есть некоторое время для себя
  • Я чувствую любовь и поддержку близких людей.
  • Я могу открыто выражать свои мысли и чувства.


От полученного результата отнимите 20 и посмотрите, что получилось:

— от 0 до 5
У вас прекрасно развитая сопротивляемость негативу.

— от 5 до 15
Вы можете спокойно реагировать на негатив, но иногда бывают неприятные последствия. Нужно чаще отдыхать.

— от 15 до 25
Стресс достаточно сильно влияет на вашу жизнь. Нужно научиться бороться с ним на всех этапах.

— больше 25
Нужно срочно менять условия своей жизни, в противном случае вы не сможете опираться перенапряжению, негатив накроет вас полностью. 


Как развить стрессоустойчивость

Комплексное развитие навыков стрессоустойчивости помогает не только защитить свой организм, но и значительно увеличить собственную эффективность. Есть несколько действенных методов, помогающих успешно укрепить защитные функции.

  1. Правильная оценка ситуации. Она базируется на трех простых вопросах: «Насколько это важно для меня?», «Меняет ли это мою жизнь?» и «Могу ли я что-то поменять?». Важно понимать, что некоторые обстоятельства не зависят от нас самих, потому их не нужно воспринимать слишком близко к сердцу.
  2. Выход эмоций. Нельзя держать в себе всё накопившееся раздражение. Выберите способ, которые поможет вам избавиться от негатива и выпустить пар. 
  3. Внимание к здоровью. Любая болезнь подрывает защитные функции нервной системы. Важно вовремя проводить лечение, правильно питаться и гулять на свежем воздухе каждый день.

Психологические упражнения

Действенные методы развития защиты от негатива помогают оставаться собранным и спокойным в любой ситуации. Для защиты от наплывов излишнего напряжения пользуйтесь несколькими хитростями:

  • Уходите от агрессора, когда чувствуете, что его возбуждение передалось и вам.
  • Наедине с собой выполните несколько глубоких вдохов-выдохов.
  • Постарайтесь рассмешить себя.
  • Медитация поможет стабилизировать внутренний баланс

Хобби против стресса

Найдите занятие, которое дает вам возможность полностью расслабиться и забыть обо всем окружающем мире. Превратите это дело в собственное хобби и несколько раз в неделю выделяйте для него пару часов. Таким образом вы значительно укрепите подсознание и отдохнете полноценно. 


Это может быть что угодно: рисование или лепка, чтение или написание книг, езда на велосипеде, собирание гербария, шитье и вышивание. Важен не сам процесс или упражнение, а результат, который вы получите.

Изучите свое прошлое

Слабая сопротивляемость стрессу уходит корнями далеко в прошлое. Некоторые проблемы из детства и юности, которых вы уже и не помните, служат катализатором для ослабления психосоматического здоровья. В результате вы не можете полноценно отстранятся от негатива и перенапряжение преследует вас повсюду. Займитесь изучением этих проблем, чтобы получить способы и возможность избавиться от них навсегда.

Психолог — это не страшно!

Вопреки распространенному до сих пор мнению, психологи не пытаются вынудить вас раскрывать самые страшные и постыдные тайны. Они помогают найти пути решения проблем, которые плотно засели в подсознании, дают верный совет. Помните: никто не может заставить вас рассказывать то, что вы сами не желаете открывать. Психолог поможет определить, почему уровень вашей стрессоустойчивости не отвечает желаемому. После вы вместе найдете решение этой задачи, не травмируя вашу психику еще больше.

Простые упражнения

Чтобы усилить защитные механизмы своего подсознания, выполняйте ежедневно простые упражнения:

  1. Стоя перед зеркалом улыбнитесь себе. Не нужно при этом изучать собственное отражение. После улыбки произнесите несколько комплиментов для себя.
  2. В течение рабочего дня выделяйте себе несколько раз по 10 минут чтобы расслабиться. Просто посидеть, глядя в окно или стену. При этом постарайтесь не думать вообще ни о чем.
  3. Используйте методы правильного дыхания, которые практикуют в йоге. Каждый вечер дышите перед сном.

Если чувствуете, что стрессовая ситуация неизбежна, представьте себя в броне или в танке. Нужно мысленно увидеть себя в сверкающих латах или спрятанным в надежную, непробиваемую машину.

Как повысить стрессоустойчивость и научиться контролировать себя

FinExecutive Russia FinExecutive.com 2021-10-24

Игнорировать первые признаки стресса и надеяться, что все «само разрешится» недопустимо. Важно научиться реально оценивать ситуацию и стимулировать в себе развитие стрессоустойчивости. Благодаря этим качествам организм способен полноценно преодолевать эмоциональные перегрузки и, несмотря на раздражающие факторы, сохранять внутреннее спокойствие и уравновешенность.

Слово «стрессоустойчивый» встречается в большинстве резюме. Таким способом многие соискатели стараются подчеркнуть свою адекватность и умение достойно справляться с трудностями, которые неизбежно возникают на работе.

В небольших количествах стресс даже полезен, поскольку он мобилизует внутренние силы организма на поиск выхода из сложившейся ситуации. Однако любой продолжительный психологический стресс делает человека нервным и раздражительным, негативно сказывается на его работоспособности. В итоге это может спровоцировать хроническую усталость и, как следствие, серьезные проблемы со здоровьем.

Игнорировать первые признаки стресса и надеяться, что все «само разрешится» недопустимо. Важно научиться реально оценивать ситуацию и стимулировать в себе развитие стрессоустойчивости. Благодаря этим качествам организм способен полноценно преодолевать эмоциональные перегрузки и, несмотря на раздражающие факторы, сохранять внутреннее спокойствие и уравновешенность.

Как поступить, если вы чувствуете приближение стресса?

Первым делом объективно проанализируйте ситуацию. После этого возьмите лист бумаги и запишите все факторы, которые вызывают вашу тревогу, провоцируют ощущение внутреннего дискомфорта и подрывают вашу уверенность в своих силах.

Если стрессовая ситуация связана с постоянными перегрузками на работе, постарайтесь сбалансировать свой рабочий график: откажитесь от выполнения необязательных дел и попробуйте делегировать часть полномочий коллегам. Также попытайтесь внести перемены в рабочий режим с учетом ваших биоритмов и запланируйте решение наиболее сложных задач на то время, когда вы ощущаете себя лучше всего.   

Было бы не лишним разграничить полученные задания по уровню срочности. При этом обязательно пересмотрите дневное расписание и в плотном рабочем графике позвольте себе небольшие перерывы на отдых.

Во время обеденного перерыва обязательно покидайте рабочее место и найдите время для прогулки на свежем воздухе.

6 несложных правил, которые помогут противостоять стрессу

  1. Выпускайте накопившийся пар. Обычно срессоустойчивыми считают тех людей, которые не демонстрируют свои эмоции окружающим. Однако это далеко от истины, поскольку тщательно скрываемый негатив имеет свойство накапливаться и подрывает силы организма изнутри. Обязательно найдите способ выпустить свои переживания наружу: побоксируйте подушку, сходите на концерт рок-группы или посетите спортивное состязание, где эмоционально поддержите любимую команду.
  2. Научитесь говорить «нет». Если напряженная рабочая неделя осталась позади, и вы хотите полноценно отдохнуть в тишине и покое, а вас приглашают на шумную вечеринку или скучающая соседка решила посвятить вас в свои проблемы, то научитесь смело отказываться от того, что считаете не нужным. Вы вправе делать то, что хочется именно вам, чтобы помочь своему организму успешно справляться с психологическими перегрузками.
  3. Научитесь прощать. Ученые единогласны в своем мнении, которое подтверждает эту, казалось бы, очевидную истину. Чувство обиды побуждает к действию ту часть нашего мозга, которая провоцирует реакции, связанные с атакой или бегством. В любом случае это способствует возникновению стресса и держит организм в постоянном напряжении.
  4. Практикуйте йогу, дыхательные упражнения и медитацию. Эти проверенные временем практики способствуют обретению внутреннего равновесия, поддерживают баланс между силой ума и физическими способностями человека. Начните с непродолжительной медитации после пробуждения или перед сном, и она даст вам энергию для более продолжительных и плодотворных практик.
  5. Отдыхайте! Выключите компьютер и позвольте своему сознанию переключиться на занятия, которые приносят положительные эмоции и расслабляют сжатый комок нервов. Послушайте приятную музыку, включите запись с шумом волн или с шелестом дождя в летней листве. Посвятите время любимому хобби, которое раскрывает ваш творческий потенциал и помогает противостоять даже сложной стрессовой ситуации.

В нашей повседневной жизни проблем не избежать. Поэтому важно научиться их решать. Не позволяйте негативным эмоциям управлять вами, постепенно развивайте свою стрессоустойчивость. И тогда из любой жизненной перипетии вы выйдете победителем!

Вас также могут заинтересовать наши подборки:

10 способов повышения стрессоустойчивости

10 способов повышения стрессоустойчивости

При любом продолжительном стрессе мы становимся нервозными, усталыми, напряженными, начинаем набирать вес или стремительно худеть, страдать от бессонницы или постоянного желания спать. Часто стресс провоцирует еще и психосоматические реакции: всевозможные высыпания на коже, мигрени, боли в суставах и мышцах, гастрит, язва, нарушение пищеварения и общее ослабление иммунитета. Попробуйте некоторые из предложенных здесь советов и научите свой организм обходиться без успокоительных, стимуляторов, кофеина и сигарет.

  1. Прислушивайтесь к своему телу. Попробуйте начинать свое утро, концентрируясь на самочувствии и фиксируя ощущения в теле. Спросите себя: «что нужно моему телу сегодня?», «где находятся участки напряжения?», «много ли у меня сил и энергии?», «что мне нужно сделать, чтобы почувствовать бодрость?». Попробуйте вести такой диалог как можно чаще и по возможности делать то, что требует ваше тело. Например, ложиться раньше спать или пить меньше кофе или есть больше фруктов.
  2. Заряжайтесь дозой витамина Д, потому что это самый лучший антиоксидант, защищающий нас от рака, остеопороза, рассеянного склероза и диабета. Самый простой способ обогатить себя витамином Д — это солнечные ванны. А в холодный и пасмурный прекрасной витаминной добавкой служит употребление жирной рыбы, типа палтуса, лосося, сардин, макрели, скумбрии и форели.
  3. Научитесь прощать.Несмотря на простоту этого утверждения, многие ученые сходятся во мнении о пользе прощения. Обижаясь на людей, мы возвращаемся к примитивной части мозга (той, которая есть и у рептилий) и которая провоцирует нас на реакции типа убегать или атаковать. Таким образом, мы держим свое тело и ум в постоянном стрессе, что впоследствии сказывается на нашем самочувствии.
  4. Больше ходите пешком, бегайте, плавайте, прыгайте на трамплине (для этого можно купить маленький трамплин) и прочее. Даже самые простые физические упражнения увеличивают уровень гормона, помогающего нам проще переживать стресс.
  5. Практикуйте йогу, медитацию или дыхательные упражнения. Эти древние практики способствуют обретению баланса между телом и умом, замедляя ритм сердца, дыхания и глубокого расслабления мышц. Начните с малого: медитируйте пять минут в день, перед сном и после пробуждения. Позитивный результат даст вам энергию на более продолжительную практику.
  6. Уменьшите количествопеченья, тортов и прочих углеводов, приготовленных с использованием рафинированного сахара и белой муки. Такая пища увеличивает уровень кортизола или гормона стресса в нашем организме. Продукты, которые способствуют гормональному балансу содержат омегу-3 (лосось, сельдь, скумбрия, палтус, сардины, семена льна) и витамин В5 (капуста брокколи, изделия из цельного зерна, яйца).
  7. Научитесь говорить нет.Если вы хотите отдохнуть от напряженной недели, а ваши друзья тянут вас на вечеринку, или соседке скучно и хочется поболтать, то научитесь отказываться от ненужных вам мероприятий и делать то, что хочется вам. Большое количество дел, слишком много общения незаметно увеличивают стресс и не дают вам возможности побыть с собой наедине.
  8. Чаще выключайте компьютер  и телевизори просто идите гулять, учитесь готовить новые блюда или просто проводите это время со своей семьей.
  9. Слушайте расслабляющую или классическую музыку, шум волн, пение птиц, журчание ручья или стук дождя.
  10. Найдите для себя хобби или вид ручного труда, будь-то вышивание, рисование, фотография или составление композиций из цветов. Подобные занятия раскрывают наш творческий потенциал и помогают избавиться от стресса.

Подготовила психолог Барсукевич Т.Н.

Как повысить стрессоустойчивость

В сегодняшнем безумном мире каждый человек сталкивался со стрессом в той или иной форме. Если раньше это была достаточно специфическая проблема, то теперь бороться с ней приходится самым обычным людям.

Некоторые люди легче переносят негативные переживания, чем другие. Почему так происходит? На это влияет порог стрессоустойчивости. Это понятие обозначает способность человека преодолеть стресс, при этом, не нанося вред организму. Вы можете пройти тест на стрессоустойчивость и проверить, насколько хорошо или плохо Вы справляетесь с трудностями. Существует несколько факторов, влияющих на это качество:

  • Социальная поддержка. Наличие тех, кому можно доверять или на кого можно положиться, поможет Вам преодолеть трудности. Социально изолированные люди хуже переносят стресс и им тяжелее с ним справиться;
  • Самоуверенность. Если человек знает, что он – кузнец своего счастья и сам влияет на свою жизнь, то ему легче пережить тяжелые времена;
  • Образ мышления. Оптимисты менее подвержены стрессу, чем пессимисты;
  • Эмоциональный интеллект. Тот, кто понимает свои эмоции и способен управлять ими, устойчив к стрессу в большей степени;
  • Физическое состояние. Хороший полноценный сон, физическая активность и правильное питание помогут Вам вернуться к стабильному душевному состоянию.

Как же мы можем на самом деле справиться с переживаниями и повысить стрессоустойчивость? Вот несколько советов, которые могут Вам в этом помочь.

  1. Сон. Когда человек спит, его организм вырабатывает гормоны, которые помогают восстановить жизненные силы. Недосыпание негативно влияет на самочувствие в целом и вызывает стресс. Именно поэтому врачи всего мира рекомендуют спать, по крайней мере, 7-8 часов в день. Не только время сна имеет значение, но и его качество. Если Вы часто просыпаетесь, крутитесь и не высыпаетесь, появляется чувство истощения. Поэтому нужно создать комфортную зону для ночного отдыха, постараться расслабиться и отстраниться от негативных переживаний.
  2. Поддержка родных и близких. Когда Вы делитесь своими переживаниями с близкими, то уменьшаете уровень стресса. Этот вариант сработает только, если у Вас хорошие отношения со своей половинкой, семьей или друзьями. Социальная поддержка влияет на гормональный фон, повышая сопротивляемость стрессу. Качество отношений куда важнее, чем количество людей, с которыми Вы можете поговорить. Также не стоит общаться с тем, кто Вам неприятен, ведь это вызовет негативные эмоции и тем самым усугубит ситуацию.
  3. Найдите равновесие между семьей и карьерой. Научиться преодолевать стресс, совмещая работу и отдых непросто. Если Вы не сохраните баланс между ними, одна из этих сфер жизни пострадает, и стресс настигнет Вас. Вы должны осознать, что они обе одинаково важны и в равной степени требуют от Вас времени, эмоциональных и физических ресурсов. Оптимизируйте свой рабочий график, не выполняйте чужие обязанности, тогда Вы сможете найти силы и на семью, и на работу. Также очень важно не жертвовать своими интересами и не полагаться слишком сильно на мнение окружающих.
  4. Измените отношение к ситуации. Составляющими стресса являются сама ситуация и отношение человека к ней. Изначально Вы можете попробовать изменить первый компонент. Например, если Вам что-то не нравится, попробуйте убрать этот фактор из своей жизни. Если Вы не в состоянии воздействовать на ситуацию, то всегда можете поменять к ней отношение. Найдите положительные стороны, поделитесь чувствами с друзьями или оставайтесь равнодушными к переживаниям. Что толку беспокоиться о том, что Вы не в силах изменить? Эта методика поможет воспринимать трудности как что-то временное, как часть опыта, который Вы приобретаете.
  5. Планирование. Мозг человека больше концентрируется на незавершенных задачах, чем на тех, что уже выполнены. Если нам постоянно приходится думать, к каким заданиям приступить сейчас, а какие оставить на потом, — это также увеличивает уровень стресса. В этом поможет тайм-менеджмент. Главное – правильно распределить свое время, расставить для себя приоритеты и избавиться от всевозможных отвлекающих факторов. Составив себе расписание, Вы сможете понимать, что ждет Вас в дальнейшем, и с какими трудностям Вы можете столкнуться. Так Вы почувствуете себя более уверенно и минимизируете возможность появления стресса в Вашей жизни. Также стоит помнить о том, что завышенные ожидания в не меньшей степени негативно влияют на наше психическое состояние. Поэтому необходимо браться за такой объем работы, с которым Вы сможете справиться.
  6. Работа над мыслями. Чем больше негативных мыслей засело в Вашей голове, тем сильнее нервное напряжение. Так что человек сами повышает для себя уровень стресса, если он зациклился на негативных мыслях. Чтобы преодолеть стресс, Вы должны уметь контролировать свое негативное мышление и научиться находить во всех ситуациях положительные стороны. Таким образом, Вы будете сосредоточены на поиске решения проблемы, а не ее наличии.
  7. Позитивное мышление. Вы можете научиться мыслить позитивно. Конечно, это требует времени и практики. Вот несколько способов стать более оптимистичным. Попробуйте записать свои мысли, чтобы их было легче анализировать. Если Вы видите, что какое-то обстоятельство постоянно портит Вам настроение, пора его искоренить. Постарайтесь обращать внимание не только на отрицательные моменты, но и на преимущества, которые у Вас есть в жизни, ведь счастье в мелочах. Постарайтесь окружить себя позитивными людьми. Тот, кто умеет смеяться над жизнью, испытывает меньше стресса. Позвольте себе улыбаться, особенно в трудные времена, и находите позитив в повседневных событиях. Старайтесь думать только об успехе и не бойтесь поражения.
  8. Питайтесь правильно. Люди по-разному ведут себя в сложных ситуациях: одни прибегают к эмоциональному перееданию, другие ненавидят саму мысль о еде. Когда Вы испытываете нервное напряжение, Вам нужно поесть, но при этом важно соблюдать диету. В условиях стресса Вашему организму требуется больше белков, витаминов и микроэлементов. При постоянном эмоциональном напряжении самыми важными являются витамины группы В, С, Е, D, а также магний и мелатонин. Комплексы Orthomol Vital F и Orthomol Vital M были разработаны для женщин и мужчин, которые подвержены эмоциональному выгоранию и хроническому стрессу. Они обеспечивают нормальное функционирование нервной системы и помогают бороться с усталостью.

0 отзывов

Помогает при хронической усталости и эмоциональном выгорании у женщин

0 грн

2 483 грн

Нет на складе

Есть в наличии

Нет на складе

Ресурс 10 В корзину

0 отзывов

Помогает при хронической усталости и эмоциональном выгорании у мужчин

0 грн

2 483 грн

Нет на складе

Есть в наличии

Нет на складе

Ресурс 10 В корзину

Хотя повысить стрессоустойчивость – задача достаточно непростая, однако, вполне выполнимая. Уже сегодня Вы можете начать тренировать себя, работать над образом своего мышления и изменить свою жизнь к лучшему.

Повышение стрессоустойчивости персонала. Различные методы и пути.

За последний год вопрос стрессоустойчивости и управления эмоциями из актуального превратился буквально в самую «горячую» тему!

Как быть, если ваш бизнес — это сфера услуг и от стрессоустойчивости ваших сотрудников зависит его успех на рынке? Как грамотно работать со стрессом, когда на осознание и анализ причин его возникновения нет времени?

Открою несколько экспресс-методов для повышения EQ, которые помогут вам восстановить эмоциональный баланс и позволят быстро освободиться от накопленного стресса. Важно подготовиться к возможным стрессовым ситуациям:

  • Знать и принимать законы сервиса.
  • Выстраивать коммуникацию с клиентом «на равных».
  • Приучать себя осознанно реагировать на события
  • Знать и принимать законы сервиса.

Исходя из многолетнего опыта работы, могу выделить два важных закона сервиса, которые работают практически в любой сфере и при любых обстоятельствах.

Первое, на чем я делаю акцент во время тренингов — сложные ситуации в работе были, есть и будут! При этом в наших силах изменить свое отношение к ним. Здесь важна работа с установками, которые получают сотрудники организации.

Первый закон

сервис никогда не был справедлив, и это важно запомнить всем сотрудникам сферы обслуживания. А ожидание справедливости от клиентов всегда приведет к разочарованию. Так что просто следует мудро принять этот факт как специфику работы. Похвала со стороны клиента — это подарок! Согласитесь, наивно полагать, что все клиенты будут хорошими и благодарными, а события выстроятся в одну сплошную приятную череду. Если работники это понимают, жить и работать им станет намного легче.

К тому же, мы склонны преувеличивать возможность одного человека влиять на чувства другого. Здесь следует понимать, что ответственность за наши чувства лежит на нас. Не клиент вас обидел, а вы обиделись. Не он вас расстроил, а вы расстроились. Поэтому только вы в состоянии повлиять на свои эмоции!

Второй закон гласит

Чем выше уровень заявленного/ожидаемого сервиса, тем более критично его будут оценивать и тем меньше прощаются какие-либо огрехи со стороны сотрудника и организации.

Это значит, что к обычному кафе или придорожному мотелю у посетителя, скорее всего, возникнет меньше претензий, нежели к авторитетному ресторану либо к пятизвездочной гостинице. От простого заведения клиент ничего особенного не ожидает, в то время как от всеми признанного комплекса премиум-класса каждый желал бы получить, буквально, исполнения чудес и прихотей. Это данность, и персонал должен воспринимать это как можно более спокойно.

К клиенту стоит относиться как к учителю, который помогает персоналу совершенствоваться в его работе, а жалобы расценивать как подарки, благодаря которым можно исправить прежние ошибки и довести свой сервис до идеала. Как только ваши сотрудники откажутся от оценочных установок, любые споры и конфликты станут восприниматься философски.

Выстраивать коммуникацию на равных

В самом начале коммуникации с клиентом крайне важно занять правильную позицию. Позиция — это психологическое состояние, восприятие себя по отношению к другому человеку во время общения. Условно можно выделить три позиции: снизу — «Жертва», позиция сверху — «Хищник» и позиция «На равных».

Любая позиция проявляется невербально, в интонациях, мимике, жестах, и не очень контролируется человеком.

В случае «Жертвы» сотрудник условно смотрит на клиента снизу вверх, обозначая тем самым доминантность второго. Выражение лица сотрудника в таком случае чаще всего заискивающее или напуганное, тон голоса слабый или дрожащий, жестикуляция суетливая или, наоборот, отсутствует. Поэтому мгновенный эффект на собеседника предсказуем — клиент автоматически становится «Хищником», и часто, даже не отдавая себе в этом отчет. Не рекомендую обслуживающим сотрудникам использовать в работе данную позицию, так как рано или поздно все же сработает принцип «клиент всегда прав», а сотрудник может лишиться рабочего места.

Вторая позиция, когда сам сотрудник выступает «Хищником», также недопустима в сервисе. Невербально это может выражаться в повышении тона голоса, усиленной жестикуляции, надменном выражении лица или демонстрации снисходительности. Тут сказываются отголоски советского прошлого, когда на клиента смотрели с презрением сверху вниз, и делали большое одолжение, обслуживая его. Естественно, ни к чему хорошему такая позиция персонала не приведет, ведь вполне ожидаемый эффект на собеседника — его раздражение, возмущение и агрессия. Автоматически клиент также выберет позицию «Хищника» — и конфликт уже неизбежен.

Если один человек демонстрирует агрессивность, силу, то второй становится в позицию просящего и извиняющегося, что может привести к конфликту или к неравноценному общению. Так сотрудник, занявший извиняющуюся позицию, может сделать большие скидки или пойти на другие требования клиента, даже в ущерб компании, а сотрудник, занявший позицию «Хищник», может просто довести общение до конфликта и потерять клиента.

Благо, мы, люди, в отличие от животных, можем управлять эмоциями и осознанно выбирать поведение. Поэтому для продуктивного клиент-ориентированного обслуживания, а также с целью повышения лояльности клиентов я рекомендую выбирать третий вариант поведения — позицию «На равных». С такой позицией даже из самых неприятных ситуаций сотрудник сможет выйти дипломатом, сохранив спокойствие, уважение и доброжелательность по отношению к клиенту, как с хорошим деловым партнером. Подобное поведение называют ассертивным — позиция уверенного равноправия. И даже в случае возникновения какой-либо спорной ситуации, велика вероятность, что клиент пойдет на компромисс, ведь с партнерами скандалить не принято.

Итак, если вы принимаете законы сервиса и умеете выстраивать коммуникацию на равных с клиентом, — полдела сделано! Но это не избавит нас целиком и полностью от конфликтных клиентов или сложных ситуаций. Что делать, если все-таки вы оказались в подобной ситуации и стресс одолевает без предупреждения.

Приучать себя осознанно реагировать на события

Методы управления эмоциями

Для начала следует научиться справляться со своими эмоциями и осознанно выбирать эмоциональную реакцию на возникшую ситуацию. Это сложно, но возможно, и чем больше вы будете тренироваться, тем меньше времени вам понадобится, чтобы совладать со своими эмоциями в очередной раз.

Здесь вам в помощь эффективный метод «АВС-анализ», который поможет в кратчайшие сроки «разложить по полочкам» ситуацию и возникшие чувства.

Определенные события могут являться причиной тех или иных эмоций. Например, когда клиент кричит на сотрудника, последний обижается, не понимая, чем заслужил такое отношение. И, скорее всего, либо сильно расстроится, либо включит защитную реакцию и начнет кричать в ответ на клиента. В любом случае, конструктивного диалога уже не получится и ситуация зайдет в тупик. Суть «АВС-анализа» заключается в том, что негативные эмоции вызывает не само событие, а мысли об этом событии.

Исходя из этого, «А» — событие которое произошло, «С» — эмоции, а «В» — это те мысли, которые мы часто «пропускаем», но которые неизменно являются истинной причиной наших эмоций!

Что дает нам это знание? То, что события в глобальном смысле сами по себе нейтральны, и только наши внутренние мысли и оценки несут в себе те или иные эмоции.

Главная трудность при использовании данного метода — выявить негативную мысль и заменить более рациональной, которая поможет нейтрализовать напряжение. Например, возьмем одну и ту же ситуацию и посмотрим, как меняются эмоции в зависимости от того, что человек думает о ситуации.

«А» — событие

«B» — мысли

«С» — эмоциональное состояние

Клиент кричит, обзывается на официанта, прочитав имя на бейджике, переходит на личности.

а) Негативные — он (клиент) хочет самоутвердиться и подчеркнуть свою значимость, статус, а это несправедливо по отношению ко мне, ведь я старался.

а) Обида, негодование, раздражение, агрессия.

б) Рациональные — скорее всего, он (клиент) чем-то расстроен, возможно, у него неприятности в семье, на работе, а это случайное недоразумение в нашем кафе было последней каплей. Ведь агрессия — явный признак, что человек расстроен, ему плохо.

б) Спокойствие, сочувствие, мудрое принятие.

Поначалу это дается непросто, ведь наши мысли пролетают автоматически, и отследить их бывает достаточно сложно. Для этого предлагаю использовать мойэкспресс-метод «Вершина айсберга» как самую «скорую помощь» в стрессовых ситуациях.

Идея метода проста: когда, например, клиент кричит, его крик следует воспринимать как вершину айсберга. Вершину (агрессию) мы видим, а причин не знаем, они скрыты под водой как большая часть айсберга.

Причин для этого крика у человека может быть более чем предостаточно: плохое настроение, болезнь, неприятности дома или на работе, волнение, неуверенность в своих силах и т.д. В любом случае, истинные причины нам не известны. Это является той частью айсберга, которая скрывается под водой. Конечно, нам не стоит докапываться до первоисточника, и не нужно стараться помочь или развеселить клиента, ведь такая реакция сотрудника может и усугубить ситуацию. Мысленно скажите себе, что, возможно, сегодня этому человеку плохо или период такой, или не умеет он по-другому решать вопросы, проявите весь свой профессионализм и решите запрос клиента.

Главное, нужно четко понимать, что причина агрессии клиента — не вы! Запомните, никто не хамит и не ругается, когда он счастлив. Для профессионала в обслуживании это верный сигнал — клиенту плохо! Как только сотрудник сервиса поймет это — его эмоции автоматически изменятся. Естественно, радостней ему от этого станет вряд ли, но обида, агрессия и злость на клиента точно уйдут.

Независимо от того, как закончится общение с конфликтным клиентом, главное, после подобной стрессовой ситуации не застрять в ней.

Есть хорошая притча по этому поводу. Однажды два монаха возвращались в свой храм. На пути они встретили молодую женщину, которая не могла перебраться через реку из-за сильного течения. При этом монахам запрещалось прикасаться к женщинам. Один монах, увидев женщину, отвернулся, а второй молча взял ее на руки и перенес на другой берег. Весь оставшийся путь монахи хранили молчание, но уже у ворот храма один монах не выдержал:

— Как ты мог прикоснуться к женщине!? Ведь нам категорически запрещено это делать! Ты нарушил обет.

На что второй ответил:

— Я перенес ее и оставил на берегу реки, а ты до сих пор ее несешь.

Задача — не нести в себе негатив, и уж тем более не переносить его на других клиентов. Важно уметь наполнять себя позитивными мыслями. Я называю этотметод «Наводнение». Советую вспомнить о каком-нибудь приятном и радостном событии или человеке, а также обязательно себя похвалить хотя бы за то, что вы не расплакались.

Важно также помнить, что практически любая ситуация, какой бы неприятной она ни казалась на первый взгляд, это всего лишь ситуация, факт, который произошел, а то, в какие цвета вы его окрасите и что в нем увидите, зависит только от вас!

В завершение расскажу еще одну поучительную притчу.

Купил человек себе новый дом — большой, красивый — и сад с фруктовыми деревьями возле дома. А рядом в стареньком домике жил завистливый сосед, который постоянно пытался испортить ему настроение: то мусор под ворота подбросит, то ещё какую гадость натворит.

Однажды проснулся человек в хорошем настроении, вышел на крыльцо, а там — ведро с помоями. Он взял ведро, помои вылил, ведро вычистил до блеска, насобирал в него самых больших, спелых и вкусных яблок и пошёл к соседу. Сосед, услышав стук в дверь, злорадно подумал: «Наконец-то! Я его достал!». Открывает дверь в надежде на скандал, а человек протянул ему ведро с яблоками и сказал:

— Кто чем богат, тот тем и делится!

Даже в самые непростые времена для каждого из нас и нашей страны, в целом, находите в себе ресурс делиться позитивом и добром с клиентами, друзьями и близкими людьми. Теперь вы знаете несколько эффективных методов управления эмоциями, используйте их при необходимости и, вопреки сложностям, добивайтесь новых успехов в повышении уровня EQ!

Способы совладания со стрессом и повышение стрессоустойчивости

Способы совладания со стрессом и повышения стрессоустойчивости в периоды жизненных изменений

10 октября является Всемирным днем психического здоровья, который был впервые учреждён по инициативе Всемирной федерации психического здоровья в 1992 году, а в России он отмечается с 2002 года. Ежегодно выбирается животрепещущая тема этого дня, так в 2020 году он проходит под девизом: «Психическое здоровье доступно всем». Под психическим здоровьем здесь подразумевается право человека на доступную и качественную помощь. Каждый человек должен иметь возможность быть услышанным. Независимо от социального статуса и уровня жизни человека, ему должна быть оказана необходимая психиатрическая помощь и поддержка.

Особое внимание реализации этого призыва уделено сейчас, во время глобальной чрезвычайной ситуации в мире – наложение пандемии с беспрецедентными экономическими и социальными последствиями на все возрастающее число психических расстройств. Непредвиденная ситуация потребовала мобилизации социальных сообществ, эффективное выполнение своей социальной роли для части людей стало затруднительным, некоторым и вовсе пришлось сменить сферу деятельности. Социальная ситуация неопределенности, давление СМИ, внешние ограничения, опасения за собственное здоровье способствовало росту уровня тревожности, страха, изоляции, утраты чувства безопасности и актуальных жизненных смыслов у большого числа людей. Современная жизнь является слабо предсказуемой: постоянно нарастающий ритм жизни, многозадачность, необходимость ролевой и коммуникативной гибкости в связи с нередко предъявляемыми амбивалентными требованиями к человеку в разных видах взаимоотношений, быстрое изменение внешней ситуации. Поэтому сейчас важно обладать достаточной степенью жизнестойкости, чтобы укрепить свое здоровье и заниматься эффективной деятельностью. «Нас убивает не сам стресс, а наша реакция на него» (Г. Селье). Приведенная цитата хорошо описывает суть явления устойчивости к стрессу.

Стрессоустойчивость

Стрессоустойчивость – способность личности активно противостоять проблемам, трудностям, изменчивым жизненным условиям. Это качество  позволяет выдерживать значительные волевые и эмоциональные нагрузки без явного ущерба для собственного здоровья и окружающих людей. Актуальным запросом людей становится поиск информации о методах нейтрализации стресса и поддержания стрессоустойчивости человека. Их можно условно разделить на три группы.

Первая группа включает способы, в основе которых лежат физические факторы воздействия и релаксации. К ней можно отнести профилактику гиподинамии, занятия физической культурой, закаливание организма, контрастный душ; сбалансированное питание, глубокий сон не менее 7-8 часов. Рекомендуют пробуждаться утром на несколько минут раньше, чем обычно, чтобы дать своему организму постепенно перейти в режим бодрствования и снизить степень утреннего раздражения. Размеренное и организованное утро уменьшает общую напряженность в течение дня. Сделайте что-нибудь для улучшения вашего внешнего облика и настроения, это может помочь вам чувствовать себя лучше. Например, смена прически, аккуратный костюм, для женщин новый, освежающий макияж помогут придать вам тот жизненный тонус, в котором вы нуждаетесь. Хороший эффект оказывает работа с природным материалом: хождение по камням, песку, траве (методы «заземления»), а также любые сенсорно обогащающие занятия (например, прогулки на природе, работа с тестом и выпечка, ароматерапия, самомассаж, массаж и т.д.).

Вторая группа связана со способами интеллектуальной и эмоциональной саморегуляции. Помимо релаксации для поддержания оптимального эмоционального настроя важны: адекватная оценка значимости события; достаточная информированность по проблемному вопросу или ситуации; запасные отступные стратегии. Все это помогает снизить уровень напряженности и уменьшает неуверенность и тревогу получить неблагоприятное решение, создает оптимальный фон для разрешения проблемы. В случае неуспеха можно произвести общую переоценку значимости ситуации (анализ причин, определение раздражающих факторов, возможные новые сценарии ситуации). Изменение субъективной значимости события помогает отойти на заранее подготовленные позиции и подготовиться к следующей попытке без значительных потерь здоровья. При трудностях во взаимоотношениях важно умение устанавливать личные границы, желание и возможность выговориться. Когда человек находится в состоянии сильного возбуждения, успокаивать его бывает бесполезно, лучше помочь ему разрядить эмоцию, дать ему выговориться до конца, просто побыть рядом. При ослаблении возбуждения появляется возможность разъяснить ему что-либо, успокоить, направить его.

Полезный способ снижения психической напряженности – активизация чувства юмора. Как считал С. Л. Рубинштейн, суть чувства юмора не в том, чтобы «видеть и чувствовать комическое там, где оно есть, а в том, чтобы воспринимать как комическое то, что претендует быть серьезным», т.е. уметь поменять отношение к напрягающей ситуации как к чему-то недостойному серьезного внимания, суметь улыбнуться или рассмеяться в трудный момент. Смех позволяет снизить тревожность; физиологически, когда человек просмеялся, то его мышцы расслабляются, и нормализуется сердцебиение.

К третьей группе способов повышения общей устойчивости можно отнести переструктурирование смыслов и мотивов поведения. Важность этой группы определяется тем, что человек всегда нуждается в смысле, поскольку отсутствие в жизни целей, ценностей и идеалов вызывает значительные страдания вплоть до нервно-психических расстройств, которые могут привести человека к суициду. Некоторые психологи называют последствия пандемии не просто стрессом, а «кризисом смыслообразования» (А.В. Цветков). Поэтому переосмысление своих потребностей, своей жизненной ситуации, целей, увеличение источников смыслов становится все более актуальным. Переосмысление жизни заключается в том, чтобы человеку, который утратил смысл жизни, показать, что он нужен другому человеку и значим для него (например, супруга,  ребенка, родителя, любого другого родственника или друга).

Человек может обрести себя в творчестве, в том, что он делает добро для других, в общении с другими людьми или в поисках истины. Самое главное, чтобы он мог получать удовлетворение от всех этих дел и видов деятельности.  Неоднократно доказано, что занятие любимым делом заставляет организм выделять «гормон радости». А общение с интересными и значимыми людьми, совместное проведение досуга с семьей (походы, выезды на природу, общее дело, в котором участвуют все члены семьи, задушевные разговоры на отвлеченные от работы, учебы, политики, экономики темы) положительно заряжает качественной энергией,  взаимно обогащая всех собеседников.

Внимание к своему организму и психическому здоровью, разнообразие способов снятия напряжения и обретение себя в любимом деле помогают человеку преодолеть сложные жизненные ситуации. Берегите себя и своих близких.

 Куликова А.С., Куликов С.А.

 Куликова А. С. – дипломированный клинический психолог высшей категории;

Куликов С.А. – дипломированный клинический психолог высшей категории, заведующий патопсихологической лаборатории, ГБУЗ АО АКПБ, г. Архангельск

уровни стресса, как повысить стрессоустойчивость, полезные советы

По разным оценкам от хронического стресса страдают до 70% россиян. Треть наших сограждан ежедневно переживают повышенные стрессовые нагрузки. Строчка «стрессоустойчивость» стала привычной в резюме и описаниях вакансий. Однако разновидности стресса, как и типы стрессоустойчивости, бывают разными.

Существуют ли на самом деле «непрошибаемые» люди и везде ли они нужны? Как успешно справляться с неблагоприятными обстоятельствами и не превратиться в робота? Давайте обратимся к опыту врачей и психологов.


Устойчивость к стрессам: миф или реальность?

Стресс — термин, пришедший к нам из английского языка, на самом деле происходит от французского estresse, означающего «угнетенность», «подавленность». Впервые это понятие использовал канадский ученый Ганс Селье. По его определению, стресс — это нервно-психическая реакция, которая возникает в критических ситуациях и направлена на мобилизацию защитных сил организма. В обиходе стрессом называют физические, умственные и психоэмоциональные перегрузки. Стрессоустойчивостью, соответственно, считается способность справляться со стрессовыми воздействиями. В основном мы встречаем этот термин, когда речь идет об устройстве на работу в офис. Однако стрессоустойчивость требуется и в других сферах жизни. Об этом хорошо знают, например, молодые матери, студенты, представители творческих профессий, спортсмены, люди, переживающие возрастные и духовные кризисы.

Существует классификация стрессоустойчивости, по которой все люди разделены на 4 типа:

  • Стрессонеустойчивые. Люди с низким уровнем адаптации к внешним условиям, с незыблемыми установками и понятиями, не склонные менять свое поведение в зависимости от обстоятельств. Любые неожиданности или даже намек на них в будущем являются для них стрессовым воздействием. В напряженные моменты они не могут действовать быстро и конструктивно.
  • Стрессотренируемые. Адаптируются постепенно и только на поверхностном уровне, непринужденном, безболезненном. Если по объективным причинам требуются более серьезные изменения в жизни, этот тип легко становится раздражительным и даже может впасть в депрессию. Однако со временем, когда накапливается опыт преодоления критических ситуаций, этот тип реагирует на стрессовые воздействия более спокойно и даже может стать в такой ситуации лидером, предлагающим конструктивные варианты решения проблем.
  • Стрессотормозные. Имеют жесткие принципы и установки, однако согласны на «точечные» перемены, чтобы дальше вести привычный им образ жизни — например, кардинально сменить сферу деятельности. В череде стрессовых воздействий, особенно вялотекущих, этот тип теряет присутствие духа и перестает контролировать свои эмоции.
  • Стрессоустойчивые. Остро ощущают общую неустойчивость мира и потому спокойно относятся к любым переменам. Обратная сторона этого качества — ироничное отношение к стабильности, склонность постоянно преобразовывать мир вокруг себя, вплоть до революций. Как стрессовое воздействие такие люди воспринимают только личные или семейные катастрофы и зачастую остаются безразличными к стрессовым реакциям других людей.

Типы людей по стрессоустойчивости не закреплены жестко за каждым на всю жизнь, это качество можно в себе развить, как и любое другое. Ко многим оно приходит естественным образом по мере накопления жизненного опыта, другим требуется помощь специалистов, духовные или психологические практики. Однако чрезмерная работа в этом направлении может привести в обыденной жизни к апатии, цинизму, жестокости. Следует помнить, что цель развития стрессоустойчивости — выживание в социуме, а не противопоставление себя ему.

Это интересно
По данным Всероссийского центра изучения общественного мнения, в России принято избавляться от стресса следующими методами: просмотр телепередач — 46%, прослушивание музыки — 43%, употребление алкоголя — 19%, прием пищи — 16%, прием медикаментов — 15%, занятия спортом — 12%, занятия сексом — 9%, занятия йогой и медитативными практиками — 2%.


Самостоятельная работа по развитию стрессоустойчивости: путь воина духа

Известный российский ученый Х. Алиев, автор ряда трудов, посвященных стрессу, и уникальных методик борьбы с ним, построил свою теорию стрессоустойчивости на следующем тезисе. Стресс — это неконтролируемый рост напряжения, вызванный блокировкой мозговых перестроечных процессов. Блоками могут являться факторы психологические и физиологические — от комплексов и стереотипов мышления до нарушения кровотока. Специальные методики Алиева успешно используются в самых тяжелых случаях — например, для восстановления людей после стресса, вызванного террористическими актами. В общем же случае снять блокировки, по мнению психологов, можно следующими методами:

  • Терпимость к поведению окружающих, стремление к компромиссным решениям, продиктованные пониманием того факта, что все люди разные.
  • Повышение самооценки и эффективное распределение нагрузок за счет совершенствования в своей профессии.
  • Применение приемов релаксации: дыхательная гимнастика, медитация, йога, массаж, успокоительные ванны.
  • Наличие хобби, помогающего не зацикливаться на неприятной рутине.
  • Чередование разных вариантов отдыха. Интеллектуальные развлечения должны уравновешиваться физическими упражнениям и прогулками, сон и релаксация — здоровой активностью.
  • Анализ и оценка стрессовых ситуаций, работа над ошибками.
  • Психологическая подготовка к стрессу на основе наблюдений, развитие интуиции.
  • Отказ от вредных привычек. Курение, алкоголь, «заедание» стресса, частая смена половых партнеров — все это дает лишь краткосрочное облегчение, исподволь отнимающее силы и ослабляющее организм в целом.

Не каждый, однако, способен реализовать все эти методы самостоятельно. Многим, особенно в запущенных случаях, требуется психологическая и медикаментозная терапия. В этом нет ничего страшного. Напротив, разделив ответственность за свое состояние с грамотным специалистом, вы автоматически снизите уровень ежедневного стресса.

Терапия в помощь! Когда стоит обратиться к специалистам?

Если методики самостоятельной работы над собой не приносят ожидаемого эффекта и все продолжает валиться из рук, возможны два варианта. Первый — вы что-то делаете неправильно. Второй — стресс перешел в хроническую стадию, и вам требуется фармакологическая поддержка (так называемые анксиолитические препараты). Как правило, верны оба утверждения, и пора обратиться за помощью.

  1. Лечим без лекарств. Занятия с психотерапевтом, физиотерапия, релаксационные занятия в группах и индивидуально (йога, бассейн, арт-терапия) — все это, с одной стороны, требует времени на себя и свое здоровье, с другой — позволяет чувствовать поддержку со стороны разных людей. Меняется взгляд на ситуацию, переключается внимание, достигается чувство внутреннего равновесия. Такие нелекарственные методы могут применяться как самостоятельно, так и в сочетании с поддерживающей медикаментозной терапией.
  2. Фармакотерапия. Здесь следует помнить, что любые средства стоит применять строго по рекомендации или назначению врача, даже «безобидные травки» и безрецептурные средства. Как минимум, они должны быть правильно дозированы, и консультация специалиста здесь необходима.
  • Препараты с сопутствующим успокоительным действием. Например, «Глицин» — регулятор обмена веществ, нормализующий и активирующий процессы защитного торможения в центральной нервной системе. Повышает умственную работоспособность, снижает психоэмоциональное напряжение. Однако стоит знать, что к побочным эффектам приема этого, казалось бы, безобидного средства относятся головные боли. Другое средство — «Валокордин» — оказывает седативное, спазмолитическое и снотворное действие, близок к нему по составу «Корвалол». Эти препараты часто назначаются при различных нервных расстройствах, они доступны по стоимости, но могут нанести со временем серьезный токсический вред печени, желчевыводящим путям и всему организму в целом.
  • Средства на основе растительных компонентов, БАДы. Сушеные ромашку и зверобой для заваривания можно приобрести в аптеке или заготовить летом самостоятельно. «Ново-Пассит» и «Персен», настойки пустырника и валерианы, экстракт пассифлоры также оказывают успокаивающее действие. Женьшень и элеутерококк — биостимуляторы, помогающие повысить стрессоустойчивость, на их основе делаются аптечные препараты и биоактивные добавки. Несмотря на свою относительную (!) безвредность, такие средства имеют существенный недостаток — их прием вызывает сонливость.
  • Современные противотревожные средства. К этой группе можно отнести селективный анксиолитик «Афобазол», действие которого принципиально отличается от основной массы противотревожных и успокаивающих препаратов, так как направлено на восстановление нормальной работы нервной системы. «Афобазол» не просто устраняет такие проявления и последствия стресса, как тревога, напряжение, раздражительность, но и защищает нервные клетки от губительного воздействия стресса. Важная особенность препарата состоит в том, что его приему не сопутствуют дневная сонливость и слабость, он не ухудшает внимание и память. Кроме того, «Афобазол» не вызывает привыкания и зависимости даже при длительном применении, поэтому разрешен для безрецептурного отпуска. «Афобазол» не вступает в лекарственные взаимодействия с широким спектром препаратов, поэтому его можно применять пациентам с соматическими заболеваниями, которые часто сопровождаются повышенной тревогой.
Справка
В ходе многочисленных исследований с участием более 4500 пациентов было доказано, что на фоне применения «Афобазола» уровень тревоги снижается в 2 раза, 78% пациентов становятся менее раздражительными, у них улучшается настроение, у 70% наблюдается повышение работоспособности и снижение утомляемости.
  • Рецептурные препараты. Это сильнодействующие успокоительные средства и антидепрессанты. Могут быть назначены по отдельности, в качестве монотерапии — для снятия нервного напряжения или депрессивных состояний — или комплексно — в сочетании с другими рецептурными и безрецептурными средствами. Принимать такие лекарства нужно только по назначению и под строгим контролем специалиста.

Первым шагом в повышении стрессоустойчивости и в борьбе со стрессом должно стать признание наличия проблемы и необходимости работать над ее решением. Многие люди считают, что переживаемый ими стресс — это случайное стечение обстоятельств. В легких случаях это может быть действительно так. Однако если ситуация повторяется, и вы начинаете чувствовать себя хуже и хуже, следует предпринять меры.

Фактор, способствующий долголетию, TCER-1, широко подавляет стрессоустойчивость и врожденный иммунитет.

  • 1.

    Zhou, K. I., Pincus, Z. & Slack, F. J. Долголетие и стресс у Caenorhabditis elegans . Старение (Олбани, штат Нью-Йорк) 3 , 733–753 (2011).

    Артикул Google ученый

  • 2.

    Мураками С. Стрессоустойчивость в долгоживущих моделях мышей. Exp. Геронтол. 41 , 1014–1019 (2006).

    CAS PubMed Статья Google ученый

  • 3.

    Эпель, Э. С. и Литгоу, Дж. Дж. Биология стресса и механизмы старения: к пониманию глубокой связи между адаптацией к стрессу и долголетием. J. Gerontol. Биол. Sci. Med. Sci. 69 (Дополнение 1), S10 – S16 (2014).

    CAS PubMed PubMed Central Статья Google ученый

  • 4.

    Ван Х. Д., Каземи-Эсфарджани П. и Бензер С. Анализ множественного стресса для выделения генов долголетия дрозофилы . Proc. Natl Acad. Sci. США 101 , 12610–12615 (2004).

    ADS CAS PubMed Статья Google ученый

  • 5.

    Муньос, М. Дж. И Риддл, Д. Л. Положительный отбор мутантов Caenorhabditis elegans с повышенной стрессоустойчивостью и долголетием. Генетика 163 , 171–180 (2003).

    CAS PubMed PubMed Central Google ученый

  • 6.

    Фабрицио П., Поцца Ф., Плетчер С. Д., Гендрон К. М. и Лонго В. Д. Регулирование продолжительности жизни и стрессоустойчивости с помощью Sch9 в дрожжах. Наука 292 , 288–290 (2001).

    ADS CAS PubMed Статья Google ученый

  • 7.

    Hou, Y. et al. Ген 9-липоксигеназы хурмы DkLOX3 играет положительную роль как в стимулировании старения, так и в повышении устойчивости к абиотическому стрессу. Фронт. Plant Sci. 6 , 1073 (2015).

    PubMed PubMed Central Статья Google ученый

  • 8.

    Курепа, Дж., Смалле, Дж., Ван Монтегю, М. и Инз, Д. Устойчивость к окислительному стрессу и долголетие у арабидопсиса : поздноцветущий мутантный гигантский гигант устойчив к параквату. Plant J. 14 , 759–764 (1998).

    CAS PubMed Статья Google ученый

  • 9.

    Dues, D. J. et al. Разделение устойчивости к окислительному стрессу и продолжительности жизни у долгоживущих митохондриальных мутантов isp-1 у Caenorhabditis elegans . Свободный Радич. Биол. Med. 108 , 362–373 (2017).

    CAS PubMed PubMed Central Статья Google ученый

  • 10.

    Meissner, B., Boll, M., Daniel, H. & Baumeister, R. Делеция кишечного пептидного транспортера влияет на передачу сигналов инсулина и TOR у Caenorhabditis elegans . J. Biol. Chem. 279 , 36739–36745 (2004).

    CAS PubMed Статья Google ученый

  • 11.

    Arum, O. & Johnson, T. E. Снижение экспрессии Caenorhabditis elegans . p53 ortholog cep-1 приводит к увеличению продолжительности жизни. J. Gerontol. Биол. Sci. Med. Sci. 62 , 951–959 (2007).

    PubMed Статья Google ученый

  • 12.

    Lee, S. S. et al. Систематический скрининг РНКи определяет критическую роль митохондрий в продолжительности жизни C. elegans . Nat. Genet. 33 , 40–48 (2003).

    CAS PubMed Статья Google ученый

  • 13.

    Кейт, С. А., Амрит, Ф. Р., Ратнаппан, Р. и Гази, А. Набор инструментов для анализа продолжительности жизни и стрессоустойчивости C. elegans . Методы 68 , 476–486 (2014).

    CAS PubMed Статья Google ученый

  • 14.

    Richardson, A. et al. Показатели продолжительности здоровья как показатели старения мышей — рекомендация. J. Gerontol. Биол. Sci. Med. Sci. 71 , 427–430 (2016).

    PubMed Статья Google ученый

  • 15.

    Мелов С. Геронаучные подходы к увеличению продолжительности жизни и замедлению старения. Препринт на https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/2715847510.12688/f1000research.7583.1 (2016).

  • 16.

    Швенке Р. А., Лаззаро Б. П. и Вольфнер М. Ф. Компромисс между репродуктивным иммунитетом у насекомых. Annu. Преподобный Энтомол. 61 , 239–256 (2016).

    CAS PubMed Статья Google ученый

  • 17.

    Лю, К., Кейс, А., Репродуктивная, E. и бесплодие, C. Продвинутый репродуктивный возраст и фертильность. J. Obstet. Gynaecol. Жестяная банка. 33 , 1165–1175 (2011).

    PubMed Статья Google ученый

  • 18.

    Николич-Цугич, Дж. Сумерки иммунитета: новые концепции старения иммунной системы. Nat. Иммунол. 19 , 10–19 (2018).

    CAS PubMed Статья Google ученый

  • 19.

    Родригес, М., Снук, Л. Б., Де Боно, М. и Камменга, Дж. Э. Черви в состоянии стресса: C. elegans стрессовая реакция и ее значение для сложных заболеваний и старения человека. Trends Genet. 29 , 367–374 (2013).

    CAS PubMed Статья Google ученый

  • 20.

    Miller, et al. Пути реакции на стресс. В г. Старение: уроки C. elegans. Здоровое старение и долголетие (ред. Олсен, А.И Гилл, М.) (Спрингер, Нью-Йорк, 2017).

  • 21.

    Ким, Д. Х. и Эубанк, Дж. Дж. Передача сигналов при врожденном иммунном ответе. WormBook 2018 , 1–51 (2018).

    PubMed PubMed Central Статья Google ученый

  • 22.

    Pellegrino, M. W. et al. Врожденный иммунитет, регулируемый UPR митохондрий, обеспечивает устойчивость к патогенной инфекции. Природа 516 , 414–417 (2014).

    ADS CAS PubMed PubMed Central Статья Google ученый

  • 23.

    Наргунд, А. М., Пеллегрино, М. В., Фиорез, К. Дж., Бейкер, Б. М. и Хейнс, К. М. Эффективность импорта митохондрий ATFS-1 регулирует активацию митохондриального UPR. Наука 337 , 587–590 (2012).

    ADS CAS PubMed PubMed Central Статья Google ученый

  • 24.

    Oliveira, R.P. et al. Регулировка гена стресса и долголетия, адаптированная к условиям, с помощью Caenorhabditis elegans SKN-1 / Nrf. Ячейка старения 8 , 524–541 (2009).

    CAS PubMed PubMed Central Статья Google ученый

  • 25.

    Сингх В. и Абаллай А. Путь фактора транскрипции теплового шока (HSF) -1, необходимого для иммунитета Caenorhabditis elegans . Proc. Natl Acad.Sci. США 103 , 13092–13097 (2006).

    ADS CAS PubMed Статья Google ученый

  • 26.

    Shao, Z., Zhang, Y., Ye, Q., Saldanha, JN & Powell-Coffman, JA C. elegans SWAN-1 связывается с EGL-9 и регулирует опосредованный HIF-1 устойчивость к бактериальному патогену Pseudomonas aeruginosa PAO1. PLoS Pathog. 6 , e1001075 (2010).

    PubMed PubMed Central Статья Google ученый

  • 27.

    Tullet, J. M. et al. Прямое ингибирование фактора увеличения продолжительности жизни SKN-1 с помощью инсулиноподобной передачи сигналов у C. elegans . Cell 132 , 1025–1038 (2008).

    CAS PubMed PubMed Central Статья Google ученый

  • 28.

    Hsu, A. L., Murphy, C. T. и Kenyon, C. Регулирование старения и возрастных заболеваний с помощью DAF-16 и фактора теплового шока. Наука 300 , 1142–1145 (2003).

    ADS CAS PubMed PubMed Central Статья Google ученый

  • 29.

    Morrow, G., Samson, M., Michaud, S. & Tanguay, R.M. Избыточная экспрессия малого митохондриального Hsp22 увеличивает продолжительность жизни Drosophila и повышает устойчивость к окислительному стрессу. FASEB J. 18 , 598–599 (2004).

    CAS PubMed Статья Google ученый

  • 30.

    Грир, Э. Л. и Брюнет, А. Факторы транскрипции FOXO на границе между долголетием и подавлением опухоли. Онкоген 24 , 7410–7425 (2005).

    CAS PubMed Статья Google ученый

  • 31.

    Garigan, D. et al. Генетический анализ старения тканей у Caenorhabditis elegans : роль фактора теплового шока и размножения бактерий. Генетика 161 , 1101–1112 (2002).

    CAS PubMed PubMed Central Google ученый

  • 32.

    Ли Д. Х., Локхарт Д. Дж., Лернер Р. А. и Шульц П. Г. Нарушение регуляции митоза и старение человека. Наука 287 , 2486–2492 (2000).

    ADS CAS PubMed Статья Google ученый

  • 33.

    Sanchez-Hernandez, N. et al. Динамика in vivo TCERG1, фактора, который связывает удлинение транскрипции со сплайсингом. РНК 22 , 571–582 (2016).

    CAS PubMed PubMed Central Статья Google ученый

  • 34.

    Coiras, M. et al. Регулятор элонгации транскрипции 1 (TCERG1) регулирует опосредованное компетентной РНК-полимеразой II элонгацию транскрипции ВИЧ-1 и способствует эффективной репликации вируса. Ретровирология 10 , 124 (2013).

    PubMed PubMed Central Статья Google ученый

  • 35.

    Ghazi, A., Henis-Korenblit, S. & Kenyon, C. Фактор удлинения транскрипции, который связывает сигналы от репродуктивной системы с увеличением продолжительности жизни у Caenorhabditis elegans . PLoS Genet. 5 , e1000639 (2009).

    PubMed PubMed Central Статья Google ученый

  • 36.

    Амрит, Ф. Р. Г. и Гази, А. Влияние клеток зародышевой линии на продолжительность жизни и здоровье организма.In Aging: Lessons from C. elegans (ред. Олсен, А. и Гилл, М.С.) (Springer International Publishing, Нью-Йорк, 2017).

  • 37.

    Amrit, F. R. et al. DAF-16 и TCER-1 способствуют адаптации к потере зародышевой линии, восстанавливая гомеостаз липидов и подавляя репродуктивную физиологию у C. elegans . PLoS Genet. 12 , e1005788 (2016).

    PubMed PubMed Central Статья Google ученый

  • 38.

    Арантес-Оливейра, Н., Апфельд, Дж., Диллин, А. и Кеньон, С. Регулирование продолжительности жизни стволовыми клетками зародышевой линии у Caenorhabditis elegans . Наука 295 , 502–505 (2002).

    ADS CAS PubMed Статья Google ученый

  • 39.

    Пауэлл, Дж. Р. и Осубель, Ф. М. Модели заражения Caenorhabditis elegans бактериальными и грибковыми патогенами. Methods Mol.Биол. 415 , 403–427 (2008).

    CAS PubMed Google ученый

  • 40.

    Miyata, S., Begun, J., Troemel, E. R., Ausubel, F. M. DAF-16-зависимое подавление иммунитета во время репродукции у Caenorhabditis elegans . Генетика 178 , 903–918 (2008).

    CAS PubMed PubMed Central Статья Google ученый

  • 41.

    Alper, S. et al. Зародышевая линия Caenorhabditis elegans регулирует различные сигнальные пути для контроля продолжительности жизни и врожденного иммунитета. J. Biol. Chem. 285 , 1822–1828 (2010).

    CAS PubMed Статья Google ученый

  • 42.

    Evans, E. A., Chen, W. C. и Tan, M. W. Инсулиноподобный сигнальный путь DAF-2 независимо регулирует старение и иммунитет у C. elegans . Ячейка старения 7 , 879–893 (2008).

    CAS PubMed PubMed Central Статья Google ученый

  • 43.

    Дарби К., Косма К. Л., Томас, Дж. Х. и Манойл К. Смертельный паралич Caenorhabditis elegans по Pseudomonas aeruginosa . Proc. Natl Acad. Sci. США 96 , 15202–15207 (1999).

    ADS CAS PubMed Статья Google ученый

  • 44.

    Сифри, К. Д., Бегун, Дж., Осубель, Ф. М. и Колдервуд, С. Б. Caenorhabditis elegans в качестве модельного хозяина для патогенеза Staphylococcus aureus . Заражение. Иммун. 71 , 2208–2217 (2003).

    CAS PubMed PubMed Central Статья Google ученый

  • 45.

    Янгман М. Дж., Роджерс З. Н. и Ким Д. Х. Снижение передачи сигналов p38 MAPK лежит в основе иммунного старения у Caenorhabditis elegans . PLoS Genet. 7 , e1002082 (2011).

    CAS PubMed PubMed Central Статья Google ученый

  • 46.

    Робинсон Д. П. и Кляйн С. Л. Беременность и гормоны, связанные с беременностью, изменяют иммунные реакции и патогенез заболевания. Horm. Behav. 62 , 263–271 (2012).

    CAS PubMed PubMed Central Статья Google ученый

  • 47.

    Пушпа, К., Кумар, Г. А. и Субраманиам, К. PUF-8 и TCER-1 необходимы для нормальных уровней множественных мРНК в C. elegans . зародышевая линия. Девелопмент 140 , 1312–1320 (2013).

    CAS PubMed PubMed Central Статья Google ученый

  • 48.

    Troemel, E. R. et al. p38 MAPK регулирует экспрессию генов иммунного ответа и способствует продолжительности жизни у C. elegans . PLoS Genet. 2 , e183 (2006).

    PubMed PubMed Central Статья Google ученый

  • 49.

    Shapira, M. et al. Консервативная роль фактора транскрипции GATA в регуляции эпителиальных врожденных иммунных ответов. Proc. Natl Acad. Sci. США 103 , 14086–14091 (2006).

    ADS CAS PubMed Статья Google ученый

  • 50.

    Twumasi-Boateng, K. & Shapira, M. Диссоциация иммунных ответов от колонизации патогенами поддерживает распознавание паттернов у C. elegans . PLoS ONE 7 , e35400 (2012).

    ADS CAS PubMed PubMed Central Статья Google ученый

  • 51.

    Nakad, R. et al. Противоположное поведение иммунной защиты беспозвоночных, вызванное одним геном, Caenorhabditis elegans ген рецептора нейропептида npr-1 . BMC Genom. 17 , 280 (2016).

    Артикул Google ученый

  • 52.

    Mertenskotter, A., Keshet, A., Gerke, P. и Paul, RJ. P38 MAPK PMK-1 демонстрирует индуцированную нагреванием ядерную транслокацию, поддерживает экспрессию шаперона и влияет на термостойкость Caenorhabditis elegans . Шапероны клеточного стресса 18 , 293–306 (2013).

    PubMed Статья Google ученый

  • 53.

    Pagano, D. J., Kingston, E. R. и Kim, D. H. Паттерн тканевой экспрессии PMK-2 p38 MAPK установлен семейством miR-58 в C. elegans . PLoS Genet. 11 , e1004997 (2015).

    PubMed PubMed Central Статья Google ученый

  • 54.

    Bond, M. R., Ghosh, S. K., Wang, P. & Hanover, J. A. Консервативный датчик питательных веществ O-GlcNAc трансфераза является неотъемлемой частью C.elegans патоген-специфический иммунитет. PLoS ONE 9 , e113231 (2014).

    ADS PubMed PubMed Central Статья Google ученый

  • 55.

    Restif, C. et al. CeleST: программа компьютерного зрения для количественного анализа плавательного поведения C. elegans раскрывает новые особенности передвижения. PLoS Comput. Биол. 10 , e1003702 (2014).

    PubMed PubMed Central Статья Google ученый

  • 56.

    McColl, G. et al. Использование улучшенной модели токсичности бета-амилоида (Abeta (1) (-) (4) (2)) в Caenorhabditis elegans для скрининга лекарств на болезнь Альцгеймера. Мол. Neurodegener. 7 , 57 (2012).

    CAS PubMed PubMed Central Статья Google ученый

  • 57.

    Houtkooper, R.H. et al. Дисбаланс митонуклеарных белков как консервативный механизм долголетия. Природа 497 , 451–457 (2013).

    ADS CAS PubMed PubMed Central Статья Google ученый

  • 58.

    Ma, DK, Vozdek, R., Bhatla, N. & Horvitz, HR CYSL-1 взаимодействует с O2-чувствительной гидроксилазой EGL-9, способствуя h3S-модулированной гипоксии-индуцированной поведенческой пластичности при температуре C. elegans . Нейрон 73 , 925–940 (2012).

    CAS PubMed PubMed Central Статья Google ученый

  • 59.

    Кимура, К., Танака, Н., Накамура, Н., Такано, С. и Окума, С. Нокдаун митохондриального белка теплового шока 70 способствует прогериеподобным фенотипам у Caenorhabditis elegans . J. Biol. Chem. 282 , 5910–5918 (2007).

    CAS PubMed Статья Google ученый

  • 60.

    Boehnisch, C. et al. Лизоцимы протистического типа нематоды Caenorhabditis elegans способствуют устойчивости к патогенному Bacillus thuringiensis . PLoS ONE 6 , e24619 (2011).

    ADS CAS PubMed PubMed Central Статья Google ученый

  • 61.

    Рэгланд, С. А. и Крисс, А. К. От уничтожения бактерий до иммунной модуляции: недавнее понимание функций лизоцима. PLoS Pathog. 13 , e1006512 (2017).

    PubMed PubMed Central Статья Google ученый

  • 62.

    Акира С., Уэмацу С. и Такеучи О. Распознавание патогенов и врожденный иммунитет. Cell 124 , 783–801 (2006).

    CAS PubMed PubMed Central Статья Google ученый

  • 63.

    Ghazi, A., Henis-Korenblit, S. & Kenyon, C. Регулирование продолжительности жизни Caenorhabditis elegans протеасомным комплексом лигазы E3. Proc. Natl Acad. Sci. США 104 , 5947–5952 (2007).

    ADS CAS PubMed Статья Google ученый

  • 64.

    Чанг, Х. К., Пэк, Дж. И Ким, Д. Х. Естественные полиморфизмы в лигазе HECW-1 E3 C. elegans влияют на поведение избегания патогенов. Природа 480 , 525–529 (2011).

    ADS CAS PubMed PubMed Central Статья Google ученый

  • 65.

    Баковски, М.A. et al. Убиквитин-опосредованный ответ на микроспоридии и вирусную инфекцию у C. elegans . PLoS Pathog. 10 , e1004200 (2014).

    PubMed PubMed Central Статья Google ученый

  • 66.

    Портер, Р. С. Регулирование организационного протеостаза с помощью передачи сигналов трансклеточного шаперона. Cell 153 , 1366–1378 (2013).

    PubMed PubMed Central Статья Google ученый

  • 67.

    Schinzel, R. & Dillin, A. Эндокринные аспекты неавтономной передачи сигналов митохондрий и ER органелл стресс-клетками. Curr. Opin. Cell Biol. 33 , 102–110 (2015).

    CAS PubMed Статья Google ученый

  • 68.

    О’Брайен Д. и ван Остен-Хоул П. Регулирование клеточно-неавтономного протеостаза у многоклеточных животных. Очерки биохимии. 60 , 133–142 (2016).

    PubMed PubMed Central Статья Google ученый

  • 69.

    Либина, Н., Берман, Дж. Р. и Кеньон, С. Тканевые активности C. elegans DAF-16 в регуляции продолжительности жизни. Cell 115 , 489–502 (2003).

    CAS PubMed Статья Google ученый

  • 70.

    Hwangbo, D. S., Gershman, B., Tu, M. P., Palmer, M. & Tatar, M. Drosophila dFOXO контролирует продолжительность жизни и регулирует передачу сигналов инсулина в мозге и жировом теле. Nature 429 , 562–566 (2004).

    ADS CAS PubMed Статья Google ученый

  • 71.

    Bai, H., Kang, P., Hernandez, A. M. & Tatar, M. Передача сигналов активина, нацеленная на инсулин / dFOXO, регулирует старение и протеостаз мышц у Drosophila . PLoS Genet. 9 , e1003941 (2013).

    PubMed PubMed Central Статья Google ученый

  • 72.

    Williams, K. W. et al. Xbp1s в нейронах Pomc связывает стресс ER с энергетическим балансом и гомеостазом глюкозы. Cell Metab. 20 , 471–482 (2014).

    CAS PubMed PubMed Central Статья Google ученый

  • 73.

    Wolff, S. et al. SMK-1, важный регулятор продолжительности жизни, опосредованной DAF-16. Cell 124 , 1039–1053 (2006).

    CAS PubMed Статья Google ученый

  • 74.

    Steuerwald, N. M., Bermudez, M. G., Wells, D., Munne, S. & Cohen, J. Дифференциальные глобальные профили экспрессии в зависимости от возраста матери, наблюдаемые в человеческих ооцитах. Репродукция. Биомед. Интернет 14 , 700–708 (2007).

    CAS PubMed Статья Google ученый

  • 75.

    Mizuno, T. et al. Caenorhabditis elegans MAPK-фосфатаза VHP-1 опосредует новый JNK-подобный сигнальный путь в ответ на стресс. EMBO J. 23 , 2226–2234 (2004).

    CAS PubMed PubMed Central Статья Google ученый

  • 76.

    Оккема П. Г., Харрисон С. В., Плунджер В., Арьяна А. и Файер А. Требования к последовательности для экспрессии и регуляции гена миозина у Caenorhabditis elegans . Генетика 135 , 385–404 (1993).

    CAS PubMed PubMed Central Google ученый

  • 77.

    Warren, C.E., Krizus, A. & Dennis, J. W. Комплементарные паттерны экспрессии шести несущественных Caenorhabditis elegans core 2 / I N -ацетилглюкозаминилтрансферазных гомологов. Гликобиология 11 , 979–988 (2001).

    CAS PubMed Статья Google ученый

  • 78.

    Lee, KZ, Kniazeva, M., Han, M., Pujol, N. & Ewbank, JJ Синтаза жирных кислот fasn-1 действует выше киназ WNK и Ste20 / GCK-VI, модулируя экспрессия антимикробного пептида в C.elegans эпидермис. Вирулентность 1 , 113–122 (2010).

    PubMed PubMed Central Статья Google ученый

  • 79.

    Chen, L., Fu, Y., Ren, M., Xiao, B. & Rubin, CS A RasGRP, C. elegans RGEF-1b, связывает внешние стимулы с поведением, активируя LET- 60 (Ras) в сенсорных нейронах. Neuron 70 , 51–65 (2011).

    CAS PubMed PubMed Central Статья Google ученый

  • 80.

    Han, S. K. et al. OASIS 2: онлайн-приложение для анализа выживаемости 2 с функциями для анализа максимальной продолжительности жизни и продолжительности здоровья в исследованиях старения. Oncotarget 7 , 56147–56152 (2016).

    PubMed PubMed Central Google ученый

  • 81.

    Taylor, R.C. & Dillin, A. XBP-1 является клеточно-неавтономным регулятором стрессоустойчивости и долголетия. Cell 153 , 1435–1447 (2013).

    CAS PubMed PubMed Central Статья Google ученый

  • 82.

    Yu, Y., Zhi, L., Wu, Q., Jing, L. & Wang, D. NPR-9 регулирует врожденный иммунный ответ у Caenorhabditis elegans , противодействуя активности интернейронов AIB . Cell Mol. Иммунол. 15 , 27–37 (2018).

    CAS PubMed Статья Google ученый

  • Тектохризин увеличивает стрессоустойчивость и продлевает продолжительность жизни Caenorhabditis elegans через FOXO / DAF-16

  • Amakura Y, Tsutsumi T, Nakamura M, Handa H, Yoshimura M, Matsuda R, Yoshida T (2011) Ариландовый рецептор углеводов деятельность, связанная с коммерческими продуктами здорового питания.Food Chem 126: 1515–1520. https://doi.org/10.1016/j.foodchem.2010.12.034

    CAS Статья PubMed Google ученый

  • Апфельд Дж., Кеньон С. (1999) Регулирование продолжительности жизни посредством сенсорного восприятия у Caenorhabditis elegans . Nature 402: 804–809. https://doi.org/10.1038/45544

    CAS Статья PubMed Google ученый

  • Bielak-Zmijewska A, Grabowska W, Ciolko A, Bojko A, Mosieniak G, Bijoch Ł, Sikora E (2019) Роль куркумина в модуляции старения.Инт. Журнал мол. Науки 20: 1239. https://doi.org/10.3390/ijms20051239

    CAS Статья PubMed Central Google ученый

  • Biswas T, Mathur AK, Mathur A (2017) Обновленная литература, освещающая производство гинсенозидов Panax с особым акцентом на стратегии обогащения антинеопластических минорных гинсенозидов в препаратах женьшеня. Appl Microbiol Biotechnol 101: 4009–4032. https://doi.org/10.1007/s00253-017-8279-4

    CAS Статья PubMed Google ученый

  • Brenner S (1974) Генетика Caenorhabditis elegans .Генетика 77: 71–94

    CAS PubMed PubMed Central Google ученый

  • Calabrese EJ, Baldwin LA (2002) Гормезис и группы высокого риска. Regul Toxicol Pharmacol 35: 414–428. https://doi.org/10.1006/rtph.2001.1529

    CAS Статья PubMed Google ученый

  • Castillo-Quan JI, Kinghorn KJ, Bjedov I (2015) Генетика и фармакология долголетия: путь к терапии для здорового старения.Adv Genet 90: 1–101. https://doi.org/10.1016/bs.adgen.2015.06.002

    CAS Статья PubMed Google ученый

  • Chamoli M, Singh A, Malik Y, Mukhopadhyay A (2014) Новая киназа регулирует продолжительность жизни, опосредованную ограничением питания, у Caenorhabditis elegans . Ячейка старения 13: 641–655. https://doi.org/10.1111/acel.12218

    CAS Статья PubMed PubMed Central Google ученый

  • Chen F, Li HL, Tan YF, Guan WW, Zhang JQ, Li YH, Zhao YS, Qin ZM (2014) Различные профили накопления нескольких компонентов между околоплодником и семенами Alpinia oxyphylla капсульного плода, как определено УФЖХ-МС / МС.Молекулы 19: 4510–4523. https://doi.org/10.3390/molecules110

    CAS Статья PubMed PubMed Central Google ученый

  • Colman RJ, Beasley TM, Kemnitz JW, Johnson SC, Weindruch R, Anderson RM (2014) Ограничение калорийности снижает возрастную и общую смертность у макак-резусов. Нац Коммуна 5: 3557. https://doi.org/10.1038/ncomms4557

    CAS Статья PubMed PubMed Central Google ученый

  • Curtis R, O’Connor G, DiStefano PS (2006) Сети старения в Caenorhabditis elegans : AMP-активированная протеинкиназа ( aak-2 ) связывает множественные пути старения и метаболизма.Ячейка старения 5: 119–126. https://doi.org/10.1111/j.1474-9726.2006.00205.x

    CAS Статья PubMed Google ученый

  • Cypser JR, Johnson TE (2003) Hormesis у Caenorhabditis elegans мутантов с дефектом Дауэра. Биогеронтология 4: 203–214. https://doi.org/10.1023/a:1025138800672

    CAS Статья PubMed Google ученый

  • Denzel MS, Lapierre LR, Mack HID (2019) Новые темы в C.elegans , исследование старения: регуляция транскрипции, реакция на стресс и эпигенетика. Механическое старение Dev 177: 4–21. https://doi.org/10.1016/j.mad.2018.08.001

    CAS Статья PubMed Google ученый

  • Feng S, Cheng H, Xu Z, Shen S, Yuan M, Liu J, Ding C (2015) Устойчивость к термическому стрессу и эффекты старения полисахаридов Panax notoginseng на Caenorhabditis elegans . Int J Biol Macromol 81: 188–194.https://doi.org/10.1016/j.ijbiomac.2015.07.057

    CAS Статья PubMed Google ученый

  • Govindan S, Amirthalingam M, Duraisamy K, Govindhan T., Sundararaj N, Palanisamy S (2018) Гормезис, индуцированный фитохимическими веществами, защищает Caenorhabditis elegans от агрегации альфа-синуклеинового белка и стресса посредством модуляции HSF-1. Сигнальные пути / Nrf2. Biomed Pharmacother 102: 812–822. https: // doi.org / 10.1016 / j.biopha.2018.03.128

    CAS Статья PubMed Google ученый

  • Greer EL, Brunet A (2009) Различные режимы ограничения питания увеличивают продолжительность жизни как независимыми, так и перекрывающимися генетическими путями у C. elegans . Ячейка старения 8: 113–127. https://doi.org/10.1111/j.1474-9726.2009.00459.x

    CAS Статья PubMed PubMed Central Google ученый

  • He Z-H, Ge W, Yue GG-L, Lau CB-S, He M-F, But PP-H (2010) Антиангиогенные эффекты плода Alpinia oxyphylla .Дж. Этнофармакол 132: 443–449. https://doi.org/10.1016/j.jep.2010.08.024

    Статья PubMed Google ученый

  • He Q, Huang G, Chen Y, Wang X, Huang Z, Chen Z (2017) Защита новых производных 2-арилэтилхинолина от ухудшения ассоциативной обучающей памяти, вызванного нейронным Aβ в C . elegans Модель болезни Альцгеймера. Neurochem Res 42: 3061–3072. https://doi.org/10.1007/s11064-017-2339-0

    CAS Статья PubMed Google ученый

  • He B, Xu F, Yan T, Xiao F, Wu B, Wang Y, Bi K, Jia Y (2019) Tectochrysin from Alpinia Oxyphylla Miq.смягчает вызванные Aβ (1–42) нарушения обучения и памяти у мышей. Eur J Pharmacol 842: 365–372. https://doi.org/10.1016/j.ejphar.2018.11.002

    CAS Статья PubMed Google ученый

  • Heidler T, Hartwig K, Daniel H, Wenzel U (2010) Caenorhabditis elegans Увеличение продолжительности жизни, вызванное лечением орально активным генератором ROS, зависит от DAF-16 и SIR-2.1. Биогеронтология 11: 183–195. https: // doi.org / 10.1007 / s10522-009-9239-x

    CAS Статья PubMed Google ученый

  • Hou R, Han Y, Fei Q, Gao Y, Qi R, Cai R, Qi Y (2018) Пищевой флавоновый тектохризин оказывает противовоспалительное действие, напрямую ингибируя MEK1 / 2 в макрофагах, примированных LPS. Mol Nutr Food Res 62: 1700288. https://doi.org/10.1002/mnfr.201700288

    CAS Статья Google ученый

  • Huang C, Xiong C, Kornfeld K (2004) Измерения возрастных изменений физиологических процессов, которые позволяют прогнозировать продолжительность жизни Caenorhabditis elegans .Proc Natl Acad Sci U S A 101: 8084–8089. https://doi.org/10.1073/pnas.0400848101

    CAS Статья PubMed PubMed Central Google ученый

  • Jagust W (2018) Визуализация эволюции и патофизиологии болезни Альцгеймера. Nat Rev Neurosci 19: 687–700. https://doi.org/10.1038/s41583-018-0067-3

    CAS Статья PubMed PubMed Central Google ученый

  • Jovaisaite V, Mouchiroud L, Auwerx J (2014) Митохондриальный развернутый белковый ответ, консервативный путь стрессовой реакции с последствиями для здоровья и болезней.J Exp Biol 217: 137–143. https://doi.org/10.1242/jeb.0

  • CAS Статья PubMed PubMed Central Google ученый

  • Кумар С., Иган Б.М., Кочисова З., Шнайдер Д.Л., Мерфи Дж. Т., Диван А., Корнфельд К. (2019) Увеличение продолжительности жизни в C . elegans , вызванного бактериальной колонизацией кишечника и последующей активацией врожденного иммунного ответа. Ячейка Разработчика 49 (100–117): e6. https://doi.org/10.1016/j.devcel.2019.03.010

    CAS Статья Google ученый

  • Kuningas M, Mooijaart SP, van Heemst D, Zwaan BJ, Slagboom PE, Westendorp RGJ (2008) Гены, кодирующие долголетие: от модельных организмов до людей. Ячейка старения 7: 270–280. https://doi.org/10.1111/j.1474-9726.2008.00366.x

    CAS Статья PubMed Google ученый

  • Kunugi H, Mohammed Ali A (2019) Маточное молочко и его компоненты способствуют здоровому старению и долголетию: от животных моделей до людей.Int J Mol Sci 20: 4662. https://doi.org/10.3390/ijms20194662

    CAS Статья PubMed Central Google ученый

  • Kurz CL, Tan MW (2004) Регулирование старения и врожденный иммунитет у C. elegans . Ячейка старения 3: 185–193. https://doi.org/10.1111/j.1474-9728.2004.00108.x

    CAS Статья PubMed Google ученый

  • Lakowski B, Hekimi S (1998) Генетика ограничения калорийности у Caenorhabditis elegans .Proc Natl Acad Sci U S A 95: 13091–13096. https://doi.org/10.1073/pnas.95.22.13091

    CAS Статья PubMed PubMed Central Google ученый

  • Lee S, Kim KS, Park Y, Shin KH, Kim BK (2003) Антиоксидантная активность тектохризина in vivo. Arch Pharm Res 26: 43–46. https://doi.org/10.1007/bf03179930

    CAS Статья PubMed Google ученый

  • Lee SJ, Hwang AB, Kenyon C (2010) Подавление дыхания распространяется на C.elegans продолжительность жизни за счет активных форм кислорода, которые увеличивают активность HIF-1. Curr Biol 20: 2131–2136. https://doi.org/10.1016/j.cub.2010.10.057

    CAS Статья PubMed PubMed Central Google ученый

  • Li F, Ma X, Cui X, Li J, Wang Z (2018) Потребление рекомбинантного глютаредоксина гречихи увеличивает продолжительность жизни и устойчивость к стрессу за счет активации hsf-1 в Caenorhabditis elegans . Опыт Геронтол 104: 86–97.https://doi.org/10.1016/j.exger.2018.01.028

    CAS Статья PubMed Google ученый

  • Ma L, Zhao Y, Chen Y, Cheng B, Peng A, Huang K (2018) Caenorhabditis elegans в качестве модельной системы для идентификации мишеней и скрининга лекарств против нейродегенеративных заболеваний. Eur J Pharmacol 819: 169–180. https://doi.org/10.1016/j.ejphar.2017.11.051

    CAS Статья PubMed Google ученый

  • Марджи О., Палмер К., Чин-Санг I (2013) К.elegans анализ хемотаксиса. J Vis Exp 74: 50069

    Google ученый

  • Newell Stamper BL, Cypser JR, Kechris K, Kitzenberg DA, Tedesco PM, Johnson TE (2018) Снижение перемещений в течение продолжительности жизни мутантов Caenorhabditis elegans в инсулино-инсулиноподобном сигнальном пути. Ячейка старения 17: e12704. https://doi.org/10.1111/acel.12704

    CAS Статья Google ученый

  • Olsen A, Vantipalli MC, Lithgow GJ (2006) Увеличение продолжительности жизни Caenorhabditis elegans после многократных мягких горметических термических обработок.Биогеронтология 7: 221–230. https://doi.org/10.1007/s10522-006-9018-x

    Статья PubMed Google ученый

  • Park SK, Tedesco PM, Johnson TE (2009) Окислительный стресс и долголетие у Caenorhabditis elegans при посредничестве SKN-1. Ячейка старения 8: 258–269. https://doi.org/10.1111/j.1474-9726.2009.00473.x

    CAS Статья PubMed PubMed Central Google ученый

  • Pees B, Kloock A, Nakad R, Barbosa C, Dierking K (2017) Повышенная поведенческая иммунная защита в C.elegans , мутант гена лектин-подобного домена С-типа. Dev Comp Immunol 74: 237–242. https://doi.org/10.1016/j.dci.2017.04.021

    CAS Статья PubMed Google ученый

  • Peixoto H, Roxo M, Krstin S, Röhrig T, Richling E, Wink M (2016) Богатый антоцианом экстракт асаи ( Euterpe precatoria Mart.) В Caenorhabditis elegans . J. Agric Food Chem. 64: 1283–1290. https://doi.org/10.1021/acs.jafc.5b05812

    CAS Статья PubMed Google ученый

  • Peixoto H, Roxo M, Koolen H, da Silva F, Silva E, Braun MS, Wang X, Wink M (2018) Calycophyllum spruceanum (Benth), амазонское «древо молодости», продлевает жизнь и укрепляет стрессоустойчивость в Caenorhabditis elegans . Молекулы 23: 534. https://doi.org/10.3390/molecules23030534

    CAS Статья PubMed Central Google ученый

  • Peixoto H, Roxo M, Silva E, Valente K, Braun M, Wang X, Wink M (2019) Экстракт коры амазонского дерева Endopleura uchi (Humiriaceae) продлевает продолжительность жизни и повышает стрессоустойчивость у Caenorhabditis elegans .Молекулы 24: 915. https://doi.org/10.3390/molecules24050915

    CAS Статья PubMed Central Google ученый

  • Писковацкая В., Стори К. Б., Вайзерман А. М., Лущак О. (2020) Использование метформина для увеличения продолжительности жизни человека. Adv Exp Med Biol 1260: 319–332. https://doi.org/10.1007/978-3-030-42667-5_13

    Статья PubMed Google ученый

  • Rangsinth P, Prasansuklab A, Duangjan C, Gu X, Meemon K, Wink M, Tencomnao T (2019) Экстракт листьев Caesalpinia mimosoides повышает устойчивость к окислительному стрессу и продлевает продолжительность жизни у Caenorhabditis elegans .BMC Complement Altern Med 19: 164–164. https://doi.org/10.1186/s12906-019-2578-5

    CAS Статья PubMed PubMed Central Google ученый

  • Rezaizadehnajafi L, Wink M (2014) EPs7630 (®) из Pelargonium sidoides увеличивает стрессоустойчивость у Caenorhabditis elegans , вероятно, через путь DAF-16 / FOXO. Фитомедицина 21: 547–550. https://doi.org/10.1016/j.phymed.2013.10.027

    CAS Статья PubMed Google ученый

  • Russo GL, Spagnuolo C, Russo M, Tedesco I, Moccia S, Cervellera C (2019) Механизмы старения и потенциальная роль выбранных полифенолов в продлении срока здоровья.Biochem Pharmacol. https://doi.org/10.1016/j.bcp.2019.113719

    Статья PubMed Google ученый

  • Seo K, Choi E, Lee D, Jeong DE, Jang SK, Lee SJ (2013) Фактор теплового шока 1 опосредует долголетие, обеспечиваемое ингибированием сигнальных путей TOR и инсулина / IGF-1 в C. elegans . Клетка старения 12: 1073–1081. https://doi.org/10.1111/acel.12140

    CAS Статья PubMed Google ученый

  • Shanmuganathan B, Sathya S, Balasubramaniam B, Balamurugan K, Devi KP (2019) Невропатологические действия, индуцированные амилоидом-β, подавляются Padina gymnospora (Phaeophyceae) и его активным составляющим α-бис2абол 4 в клетках Caenorhabditis elegans Модель Альцгеймера.Оксид азота 91: 52–66. https://doi.org/10.1016/j.niox.2019.07.009

    CAS Статья PubMed Google ученый

  • Shi G-F, An L-J, Jiang B, Guan S, Bao Y-M (2006) Протокатеховая кислота Alpinia защищает от окислительного повреждения in vitro и снижает окислительный стресс in vivo. Neurosci Lett 403: 206–210. https://doi.org/10.1016/j.neulet.2006.02.057

    CAS Статья PubMed Google ученый

  • Shi W, Zhong J, Zhang Q, Yan C (2020) Структурная характеристика и антинейровоспалительная активность нового гетерополисахарида, полученного из плодов Alpinia oxyphylla .Carbohydr Polym 229: 115405. https://doi.org/10.1016/j.carbpol.2019.115405

    CAS Статья PubMed Google ученый

  • Stępień K, Wojdyła D, Nowak K, Mołoń M (2020) Влияние куркумина на репликативное и хронологическое старение в дрожжах Saccharomyces cerevisiae . Биогеронтология 21: 109–123. https://doi.org/10.1007/s10522-019-09846-x

    CAS Статья PubMed Google ученый

  • Sun X, Chen WD, Wang YD (2017) Фактор транскрипции DAF-16 / FOXO в старении и долголетии.Фронт Pharmacol 8: 548. https://doi.org/10.3389/fphar.2017.00548

    CAS Статья PubMed PubMed Central Google ученый

  • Tan L, Wang S, Wang Y, He M, Liu D (2015) Воздействие бисфенола A ускорило процесс старения у нематоды Caenorhabditis elegans . Toxicol Lett 235: 75–83. https://doi.org/10.1016/j.toxlet.2015.03.010

    CAS Статья PubMed Google ученый

  • Tissenbaum HA (2018) DAF-16: FOXO в контексте C.elegans . Curr Top Dev Biol 127: 1–21. https://doi.org/10.1016/bs.ctdb.2017.11.007

    CAS Статья PubMed Google ученый

  • Wilson MA, Shukitt-Hale B, Kalt W., Ingram DK, Joseph JA, Wolkow CA (2006) Полифенолы черники увеличивают продолжительность жизни и термотолерантность у Caenorhabditis elegans . Ячейка старения 5: 59–68. https://doi.org/10.1111/j.1474-9726.2006.00192.x

    CAS Статья PubMed PubMed Central Google ученый

  • Xie Y, Xiao M, Ni Y, Jiang S, Feng G, Sang S, Du G (2018) Alpinia oxyphylla Miq.экстракт предотвращает диабет у мышей, регулируя микробиоту кишечника. J Diabetes Res 2018: 4230590. https://doi.org/10.1155/2018/4230590

    CAS Статья PubMed PubMed Central Google ученый

  • Xu J, Yuan Y, Zhang R, Song Y, Sui T, Wang J, Wang C, Chen Y, Guan S, Wang L (2019) Пептид дейтерогемина защищает трансгенную модель Caenorhabditis elegans болезни Альцгеймера путем ингибирования агрегации Aβ (1–42).Bioorg Chem 82: 332–339. https://doi.org/10.1016/j.bioorg.2018.10.072

    CAS Статья PubMed Google ученый

  • Yen K, Narasimhan SD, Tissenbaum HA (2011) DAF-16 / Forkhead box O фактор транскрипции: множество путей к одной развилке (головке) на дороге. Антиоксидный окислительно-восстановительный сигнал 14: 623–634. https://doi.org/10.1089/ars.2010.3490

    CAS Статья PubMed PubMed Central Google ученый

  • Zhang J, Wang S, Li Y, Xu P, Chen F, Tan Y, Duan J (2013) Противодиарейные компоненты Alpinia oxyphylla .Фитотерапия 89: 149–156. https://doi.org/10.1016/j.fitote.2013.04.001

    CAS Статья PubMed Google ученый

  • Zhang J, Lu L, Zhou L (2015) Олеаноловая кислота активирует daf-16 для увеличения продолжительности жизни у Caenorhabditis elegans . Biochem Biophys Res Commun 468: 843–849. https://doi.org/10.1016/j.bbrc.2015.11.042

    CAS Статья PubMed Google ученый

  • Zhang J, Xue X, Yang Y, Ma W, Han Y, Qin X (2018a) Множественные биологические дефекты, вызванные каликозин-7-O-β-d-глюкозидом у нематоды Caenorhabditis elegans , связаны с активация окислительного повреждения.J Appl Toxicol 38: 801–809. https://doi.org/10.1002/jat.3588

    CAS Статья PubMed Google ученый

  • Zhang Q, Zheng Y, Hu X, Hu X, Lv W, Lv D, Chen J, Wu M, Song Q, Shentu J (2018b) Этнофармакологические применения, фитохимия, биологическая активность и терапевтические применения Alpinia oxyphylla Miquel: обзор. Дж. Этнофармакол 224: 149–168. https://doi.org/10.1016/j.jep.2018.05.002

    CAS Статья PubMed Google ученый

  • Zheng SQ, Huang XB, Xing TK, Ding AJ, Wu GS, Luo HR (2017) Хлорогеновая кислота увеличивает продолжительность жизни Caenorhabditis elegans через сигнальный путь инсулина / IGF-1.Журнал «Геронтол», биол. И мед. Науки 72: 464–472. https://doi.org/10.1093/gerona/glw105

    CAS Статья PubMed Google ученый

  • Продление продолжительности жизни и устойчивость к окислительному стрессу экстрактов листьев Anacardium occidentale L. у Caenorhabditis elegans

    Anacardium occidentale (AO) содержит ряд полифенольных вторичных метаболитов с антиоксидантной активностью. Цели этого исследования были направлены на изучение роли экстрактов листьев АО в антиоксидантном стрессе и долголетии, а также лежащих в их основе механизмов у Caenorhabditis elegans ( C.elegans ) модель. Экстракты АО опосредовали выживаемость нематод при окислительном стрессе за счет ослабления внутриклеточных активных форм кислорода (АФК) через сигнальные пути DAF-16 / FoxO и SKN-1 / Nrf-2. Экстракты АО стимулировали экспрессию генов стрессовой реакции, включая SOD-3 и GST-4. Кроме того, экстракты АО проявляют антивозрастную активность и увеличивают продолжительность жизни. Мы наблюдали улучшение насосной функции глотки, ослабление накопления пигмента (липофусцин) и увеличение продолжительности жизни червей.В совокупности наши результаты продемонстрировали, что экстракты АО проявляют как устойчивость к окислительному стрессу, так и антивозрастные свойства в модели C. elegans и могут привести к появлению новых агентов, которые принесут пользу людям в ближайшем будущем.

    1. Введение

    Долгая жизнь и здоровое старение зависят от множества взаимодействий между биологическими факторами и факторами окружающей среды. Старение — это неизбежно естественный процесс, сопровождающийся накоплением поврежденных макромолекул, таких как нуклеиновые кислоты, липиды и белки.Следовательно, изменения физиологических характеристик, такие как повышенный окислительный стресс и усиление воспаления, могут отрицательно повлиять на качество жизни [1]. Хотя механизмы процесса старения до конца не изучены, все больше данных свидетельствует о том, что старение, по-видимому, связано с биоактивностью активных форм кислорода (АФК). Защитные эффекты ROS — это стратегия замедления старения и связанных с ним дегенеративных заболеваний. Несколько линий доказательств ранее сообщали, что снижение ROS и воспаление низкой степени может увеличить продолжительность жизни у широкого спектра модельных организмов [1, 2].

    Свободноживущая почвенная нематода C. elegans стала ценной моделью для изучения генетического и фармакологического влияния АФК на здоровье и долголетие. C. elegans отличается высокой скоростью воспроизводства и коротким сроком службы, а также прост в обслуживании [3]. Его геном полностью секвенирован, и различные трансгенные штаммы доступны для экспериментальных исследований [4]. Важно отметить, что C. elegans имеет консервативные гены долголетия и стрессоустойчивости, которые гомологичны человеческим генам и, таким образом, могут служить моделью процессов старения человека [5].Таким образом, C. elegans стал популярным модельным организмом для изучения потенциальных свойств природных соединений против старения и устойчивости к стрессу.

    Путь передачи сигналов инсулин / IGF-1 (IIS) является одним из наиболее известных путей, изученных у C. elegans , который участвует в регуляции ответов уровня питательных веществ через фактор транскрипции вилки O (FoxO). и его последующие цели. Компоненты пути IIS хорошо законсервированы и связаны с продолжительностью жизни у C.elegans , а также людей [6]. У C. elegans, фактор транскрипции FoxO DAF-16 играет роль в метаболизме, формировании дауэра, устойчивости к стрессу и модуляции продолжительности жизни [7, 8]. Кроме того, гены-мишени транскрипции DAF-16, включая супероксиддисмутазу-3 (SOD-3), каталазу-1 (CTL-1) и малый белок теплового шока-16.2 (HSP-16.2), являются ключевыми факторами, способствующими опосредовать окислительный стресс и реакцию на стресс теплового шока [9–11]. Сигнальный путь SKN-1 / Nrf-2 с фактором транскрипции SKN-1 локализован в кишечнике.Он регулируется и зависит от роста, питательных веществ и метаболических сигналов у C. elegans . SKN-1 также участвует в функциях острой реакции на стресс, регулируя свои нижестоящие мишени, такие как глутатион-S-трансфераза 4 (GST-4), которая является ферментом детоксикации фазы II. Важно отметить, что SKN-1 играет центральную роль во многих регуляторных путях и вмешательствах, которые увеличивают продолжительность жизни у C. elegans [12]. Предыдущий отчет предполагает, что как DAF-16, так и SKN-1 способствуют устойчивости к стрессу и, следовательно, увеличению продолжительности жизни [13].

    Дерево кешью Anacardium occidentale L. (AO), которое на тайском языке известно как mamuanghimmaphan, принадлежит к семейству Anacardiaceae. Он происходит из Бразилии, но в настоящее время культивируется во многих тропических странах по всему миру. Недавнее исследование показало, что экстракты листьев A. occidentale богаты бета-каротином, лютеином и полифенолами, которые известны своей высокой антиоксидантной активностью [14].

    Поскольку люди хотят жить дольше и здоровее, здоровому питанию в последние годы уделяется все больше внимания.Несколько исследований сообщили о положительной корреляции между антиоксидантами в продуктах питания, напитках и долголетием. Сообщается, что ряд натуральных продуктов продлевает продолжительность жизни C. elegans , таких как различные антиоксидантные соединения [15, 16], включая галлат эпигаллокатехина [17], кверцетин [18] или антоцианы [19]. Таким образом, натуральные продукты из пищевых добавок и лекарственных растений с антиоксидантными свойствами могут быть многообещающими кандидатами для борьбы с различными заболеваниями, связанными со старением, и для увеличения продолжительности жизни.

    Экстракты листьев АО представляют большой интерес из-за их выраженного антиоксидантного действия [20, 21]. Однако влияние экстрактов листьев АО на возрастные заболевания и увеличение продолжительности жизни еще предстоит выяснить. Таким образом, цели этого исследования были направлены на изучение модулирующих ролей и лежащих в основе механизмов экстрактов листьев АО на окислительный стресс и увеличение продолжительности жизни в модели C. elegans . Наши новые открытия могут инициировать дальнейшее применение экстрактов листьев АО в качестве натуральных продуктов, полезных для человека в будущем.

    2. Материалы и методы
    2.1. Химические вещества и реагенты

    Юглон (5-гидрокси-1,4-нафтохинон) и 2,7-дихлорфлуоресцеиндиацетат (h3DCF-DA) были получены от Sigma-Aldrich GmbH (Штайнхайм, Германия). Азид натрия был получен от AppliChem GmbH (Дармштадт, Германия). EGCG () был приобретен у Sigma-Aldrich (Мюнхен, Германия). Диметилсульфоксид (ДМСО), диаммониевая соль 2,2-азино-бис (3-этилбензотиазолин-6-сульфоновой кислоты) (ABTS), 2,2-дифенил-1-пикрилгидразил (DPPH), реагент Фолин-Чокальте и кверцетин. получено от Sigma-Aldrich (Миссури, США).Галловую кислоту приобретали в TCI America (OR, США). L-аскорбиновая кислота была получена от Calbiochem (Калифорния, США). Остальные реагенты, использованные для экстракции, были аналитической чистоты и были приобретены в RCI Labscan (Бангкок, Таиланд).

    2.2. Растительный материал и экстракция
    2.2.1. Растительный материал

    Листья Anacardium occidentale L. (AO) были собраны в районе Джана, провинция Сонгкхла, на юге Таиланда и хранились в виде путевого образца (№ BCU-015863) в гербарии Касин Суватабандху (департамент ботаники, факультет естественных наук, Университет Чулалонгкорн, Таиланд).

    2.2.2. Экстракция растений

    Высушенные листья АО (40 г) последовательно экстрагировали 400 мл гексана, дихлорметана и метанола по Сокслету в течение 36 часов. Экстракты упаривали при 35-45 ° C после фильтрации с использованием Whatman no. 1 фильтровальная бумага. Остаток растворяли в диметилсульфоксиде (ДМСО) до конечной концентрации 100 мг / мл в виде исходного раствора и хранили при -20 ° C до тех пор, пока он не понадобился для анализа.

    2.3. Качественный фитохимический скрининг

    Гексановый и метанольный экстракты подвергали скринингу и фитохимическому анализу с использованием ГЖХ-МС и ЖХ-МС (масс-спектрометрия газовой / жидкостной хроматографии) в Институте системной биологии (Universiti Kebangsaan Malaysia, Малайзия).

    Для ГЖХ-МС хроматографическое разделение проводили на системе Clarus 600 GC-MS (PerkinElmer, Shelton, CT, USA), разделенную на колонке Elite-5MS (PerkinElmer, США). Температуру печи устанавливали на 40 ° C и увеличивали на 5 ° C / мин, пока она не достигла 250 ° C, а газом-носителем был гелий при постоянном потоке 1 мл / мин. В качестве параметров МС использовались режим электронного удара (EI) после напряжения ионизации 70 эВ, температура источника ионов 200 ° C и диапазон сканирования 40–600 Да.База данных Национального института стандартов и технологий (NIST) (версия 2.0, Гейтерсбург, Мэриленд, США) использовалась для идентификации соединений путем превышения отношения сигнал / шум (S / N) 100 и сравнения изменчивой информации на основе на составное имя. Значения совпадений и обратных совпадений ниже 800 были отфильтрованы.

    Для ЖХ-МС хроматографическое разделение проводили на системе УВЭЖХ Dionex ™ UltiMate 3000 (Thermo Scientific), оснащенной колонкой Acclaim ™ Polar Advantage II C18 (размер частиц 3 мкм, мкм) (Thermo Scientific, США) при использовании объема впрыска 1 мкл л.Подвижная фаза содержала 0,1% муравьиной кислоты в воде (растворитель A) и 100% ацетонитрил (растворитель B), скорость потока которой составляла 400 мк л / мин в течение 22 мин. Через 0–3 мин, 3–10 мин, 10–15 мин и 15–22 мин для градиентного элюирования использовали 5% В, 80% В, 80% В и 5% В соответственно. МС-анализ высокого разрешения проводили в режиме ионизации положительным электрораспылением с использованием MicrOTOF-Q III (Bruker Daltonik GmbH, Бремен, Германия). Напряжение на капилляре 4500 В, поток сушильного газа 8 л / мин, температура источника ионов 200 ° C, давление распылителя 1.2 бара, смещение торцевой пластины -500 В и диапазон сканирования от 50 до 1000 использовались в качестве параметров для прибора. Базы данных METLIN и KNApSAcK использовались для идентификации соединений путем сравнения наблюдаемых значений с рассчитанными значениями массы из ранее опубликованных данных. Содержание отдельных соединений рассчитывали из процента площади пика по отношению к общей площади всех пиков на хроматограммах.

    2.4.
    In vitro Оценка антиоксидантных свойств
    2.4.1. Активность улавливания радикалов

    Стабильный радикал DPPH (DPPH •) и стабильный катион-радикал ABTS (ABTS • +) использовали для измерения активности улавливания свободных радикалов. Вкратце, реакция состояла из раствора DPPH • или ABTS • + и экстракта (1 мг / мл) в соотношении 1: 1. После инкубации в темноте в течение 30 минут оптическую плотность считывали при 517 нм или 734 нм с помощью многорежимного считывателя планшетов EnSpire® (PerkinElmer, США) и спектрофотометра UV-VIS с аскорбиновой кислотой (витамин C) в различных концентрациях, используемых в качестве стандарт.Витамин C и EGCG использовали в качестве положительного контроля. Активность по улавливанию радикалов выражали как процент ингибирования радикала, рассчитанный по следующему уравнению:. Антиоксидантная способность выражалась как значение EC 50 .

    2.4.2. Общее содержание фенолов

    Для определения общего содержания фенолов использовали метод Фолина-Чокальте. Вкратце, 50 мкл л экстракта (1 мг / мл) смешивали с 50 мкл л фенольного реагента Фолин-Чокальтеу, разбавленного в несколько раз.Через 20 минут смесь нейтрализовали добавлением 50 мкл л раствора 7,5% () Na 2 CO 3 и инкубировали в темноте в течение 20 минут. Затем измеряли оптическую плотность при 760 нм. Галловую кислоту использовали в качестве стандарта для калибровочной кривой. Общее содержание фенолов выражали в эквивалентах галловой кислоты (GAE / мг растительных экстрактов).

    2.4.3. Общее содержание флавоноидов

    Для измерения общего содержания флавоноидов использовали колориметрический метод хлорида алюминия.Вкратце, 50 мкл л экстракта (1 мг / мл) были смешаны со 150 мкл л 95% этанола, 10 мкл л 10% раствора () AlCl 3 и 10 мкл. л 1 М раствора NaOAc. Затем смесь инкубировали в темноте в течение 40 мин и измеряли оптическую плотность при 415 нм. Общее содержание флавоноидов рассчитывали по калибровочной кривой с использованием кверцетина в качестве стандарта, и результаты выражали в эквивалентах кверцетина (QE / мг экстрактов растений).

    2.5. Штаммы
    C. elegans и условия культивирования

    Штаммы N2 (дикий тип), TK22 (Mev-1 [kn1] III), TJ375 (gpIs1 [hsp-16-2 :: GFP]), CF1553 (muls84 [pAD76 (sod-3 :: GFP)]), TJ356 (zIs356 [daf-16p :: daf-16a / b :: GFP + rol-6]), CF1038 (daf-16 [mu86] I), BA17 ( fem-1 [hc17] IV), EU1 (skn-1 [zu67]), CL2166 ([pAF15] GST-4p :: GFP :: NLS), LD1 (ldls7) и Escherichia coli OP50 были получены из Центр генетики Caenorhabditis Университета Миннесоты, США. Все штаммы поддерживали в чашках с агаром со средой для выращивания нематод (NGM) при 20 ° C, за исключением штамма BA17, который поддерживали при 25 ° C для предотвращения откладки яиц.Червей засевали живыми E. coli OP50 в качестве источника пищи. В некоторых экспериментах использовалась жидкая среда с S-средой, которая была приготовлена ​​путем смешивания с E. coli OP50 ().

    Синхронизированные по возрасту популяции C. elegans были получены обработкой гипохлоритом. Червей, выращенных на агаре NGM, промывали стерильной водой и обрабатывали 5 М NaOH и 5% NaOCl в соотношении 1: 2 в течение 8-10 мин для лизиса и обеззараживания. Лизат осаждали центрифугированием (1200 об / мин, 2 мин) для получения яиц.Яйца разделяли в слое осадка, и осадок промывали стерильной водой в соотношении 1: 2 с последующим центрифугированием (1200 об / мин, 2 мин). Удаляли верхний слой воды, собирали яичный осадок и позволяли вылупиться яйцам в буфере M9 [19].

    Для экспериментальной группы были проведены тесты на токсичность для определения нетоксичной концентрации экстрактов АО с E. coli OP50 (данные не показаны). Глистов обрабатывали соответствующими концентрациями экстрактов АО: 25, 50 и 100 мкл г / мл гексанового экстракта АО; 25, 50 и 100 μ г / мл дихлорметанового экстракта АО; и 1, 2.5 и 5 мкМ г / мл метанольного экстракта АО. В контрольной группе червей обрабатывали 1% () ДМСО. В группе положительного контроля червей обрабатывали 25 мкг мкг / мл EGCG во всех экспериментах, кроме анализа продолжительности жизни, в котором червей обрабатывали 100 мкг мкг / мл EGCG.

    2.6. Анализ выживаемости при окислительном стрессе, индуцированном юглоном

    Для анализа выживаемости в условиях окислительного стресса личинки L1 дикого типа (N2) и трансгенных (CF1038, EU1) червей обрабатывали экстрактами растений различных концентраций в S-среде для 48 ч; в каждой группе по 80 человек.Каждую группу обрабатывали 80 мкг M прооксидантным юглоном в течение 24 часов. Затем подсчитывали мертвых и живых червей. Черви считались мертвыми, когда они не реагировали на легкое прикосновение к телу платиновой проволокой [19].

    2.7. Измерение внутриклеточных ROS

    Для измерения внутриклеточного накопления ROS у C. elegans , личинок L1 дикого (N2) и трансгенных (CF1038, EU1) червей обрабатывали экстрактами растений различных концентраций в S-среде в течение 48 дней. час; каждая группа состояла из 50-100 человек.После обработки червей осаждали центрифугированием, добавляли к раствору 50 мкл М 2,7-дихлородигидрофлуоресцеиндиацетата (H 2 DCF-DA) и инкубировали в темноте при 20 ° C в течение 1 часа. После инкубации червей парализовали с помощью 10 мМ азида натрия и помещали на предметное стекло для микроскопа. Червей произвольно фотографировали (30 червей на группу) с помощью флуоресцентного микроскопа BIOREVO BZ-9000 (Keyence Deutschland GmbH, Ной-Изенбург, Германия). Относительную флуоресценцию всего тела измеряли и оценивали как среднюю интенсивность флуоресценции с использованием программного обеспечения ImageJ (National Institutes of Health, Bethesda, MD).

    2,8. Количественная оценка экспрессии HSP-16.2 :: GFP, GST-4 :: GFP и SOD-3 :: GFP

    Трансгенных червей TJ375, CL2166 и CF1553, промотор гена которых слит с репортером GFP, использовали для измерить экспрессию HSP-16.2, GST-4 и SOD-3 соответственно. Личинок L1 обрабатывали экстрактами растений разной концентрации в S-среде при 20 ° C; каждая группа содержала 50-100 червей. Трансгенных червей TJ375 и CL2166 инкубировали в течение 72 и 48 часов соответственно. Затем червей подвергали несмертельной дозе 20 мкМ М юглона в течение 24 часов.Червей CF1553 инкубировали 72 часа. После этого все черви были подвергнуты флуоресцентной микроскопии, как описано ранее.

    2.9. Определение субклеточной локализации DAF-16 и SKN-1

    Для определения локализации факторов транскрипции DAF-16 и SKN-1 использовали трансгенные штаммы TJ356 и LD1 соответственно. Личинок L1 обрабатывали экстрактами растений разной концентрации в S-среде при 20 ° C в течение 72 ч; в каждой группе по 50–100 личинок. После инкубации червей подвергали флуоресцентной микроскопии, как описано ранее.

    2.10. Анализ размера выводка

    Для анализа потенциального токсического воздействия АО на репродуктивную систему был измерен размер выводка. Синхронизированные черви N2 на личиночной стадии L4 были отсортированы и помещены по одному на каждую чашку с агаром NGM. В чашки добавляли различные концентрации растительных экстрактов в E. coli OP50 и инкубировали при 20 ° C в течение 24 часов. Взрослых червей переносили на свежую среду каждый день во время репродуктивной фазы, чтобы отделить их от потомства.Подсчет яиц производился с помощью препаровального микроскопа каждый день в течение 4 дней для определения среднего размера выводка [19].

    2.11. Длина тела и площадь поверхности тела

    Чтобы выявить предполагаемый эффект ограничения диеты со стороны АО, измеряли длину тела и площадь поверхности тела червей. Для измерения длины тела синхронизированных и обработанных червей анализировали так же, как и в анализе размера выводка. После лечения взрослых червей 1 дня парализовали с помощью 10 мМ азида натрия и помещали на предметное стекло для микроскопа.Тридцать червей были сфотографированы случайным образом с использованием 10-кратного объектива светлопольного микроскопа. Длину тела червей анализировали с помощью программного обеспечения BZ-II Analyzer (Keyence Corp.) и сообщали в микрометрах.

    Для измерения площади поверхности тела трансгенных червей BA17 на стадии личинки L1 обрабатывали экстрактами растений различных концентраций в S-среде при 25 ° C; каждая группа состояла из 50-100 особей. СМИ меняли раз в два дня. На 8-й день червей фотографировали и измеряли площадь поверхности тела с помощью программного обеспечения ImageJ (Национальные институты здравоохранения, Бетесда, Мэриленд).

    2.12. Количественное определение липофусцина

    Для измерения накопления аутофлуоресцентного пигмента липофусцина использовали трансгенных червей BA17. Синхронизированных и обработанных червей анализировали так же, как и в анализе площади поверхности тела. После лечения до 16 дня червей парализовали 10 мМ азидом натрия и помещали на предметное стекло. Тридцать червей были сфотографированы случайным образом с использованием флуоресцентного микроскопа BIOREVO BZ-9000 ( λ ex 360/20 нм, λ em 460/38 нм).

    2.13. Скорость откачки глотки

    Чтобы определить возможное возрастное снижение мышечной функции, измеряли скорость откачки жидкости из глотки. Синхронизацию и обработку проводили так же, как и в анализе размера расплода. Червей стадии личинки L4 обрабатывали экстрактами АО в течение 24 ч, за исключением контрольной группы. Каждая группа состояла из 30-50 человек. Взрослых червей переносили на свежую среду с обработкой каждый день во время репродуктивной фазы до отделения от потомства.После этого взрослых червей переносили на свежую среду с обработкой через день. Насос через глотку анализировали на 6, 8, 10 и 12 дни, подсчитывая частоту откачки терминальной луковицы глотки каждого отдельного червя в течение 60 с. Диссекционный микроскоп использовали для измерения скорости откачки по крайней мере 20 червей из каждой группы. Когда черви ползали по лужайке E. coli OP50, частота откачки была записана и представлена ​​как насос · мин -1 [19].

    2.14. Анализ продолжительности жизни

    Для определения продолжительности жизни использовали червей дикого типа (N2) и трансгенных (TK22) червей. Синхронизацию и обработку проводили так же, как и в анализе размера расплода. Каждая группа состояла из 30-50 человек. Количество червей подсчитывали каждый день и представляли как процент от выживших червей. Черви, которые не реагировали на легкое прикосновение платиновой проволокой, считались мертвыми и исключались из пластин. Черви с внутренне вылупившимся потомством или экструдированными гонадами оценивали как цензоры и исключали из анализа.

    2,15. Статистический анализ

    . Измерения представлены как среднее значение трех независимых прогонов () и выполнены с помощью GraphPad Prism 6. Статистическое сравнение между контролем и обработками было выполнено с помощью однофакторного дисперсионного анализа по методу Бонферрони (post hoc). Данные о продолжительности жизни определялись с помощью лог-ранговых тестов (Мантел-Кокса) с последующим тестом Гехана-Бреслоу-Уилкоксона. Все эксперименты проводились не менее трех раз. Различия между данными считались значимыми при.

    3. Результаты
    3.1. Фитохимические компоненты экстрактов AO гексана и метанола

    Экстракцию листьев AO проводили с использованием Сокслета с различными растворителями, включая гексан, дихлорметан и метанол. Выход экстракции составил 1,21%, 0,46% и 15,97% соответственно. ГЖХ-МС и ЖХ-МС использовали для фитохимического анализа экстрактов. Хроматографические пики идентифицировали путем сравнения значений пиков молекулярных ионов в положительном режиме со значениями в базах данных.ГЖХ-МС гексанового экстракта дала более 50 пиков (рис. 1 (а)). Более того, ЖХ-МС метанольного экстракта дала более 120 пиков (Рисунок 1 (b)) (подробности в Таблице S1-2 (вспомогательная информация)). Мы предварительно идентифицировали 9 соединений (пики № 22, 28, 29, 1, 25, 2, 9, 31 и 5) из гексанового экстракта, а также 7 соединений (пики № 116, 71, 77, 80, 72. , 17 и 26) из метанольного экстракта.

    3.2. Антиоксидантная активность экстрактов АО

    Сначала было изучено влияние экстракционных растворителей на восстановление вторичных метаболитов антиоксидантов (таблица 1).Метанольный экстракт проявлял мощную антиоксидантную активность in vitro . При тестировании в анализах DPPH и ABTS метанольный экстракт АО эффективно улавливал радикалы на 90,62% () и 99,36% (), соответственно (подробности на Рисунке S1-2 (вспомогательная информация)).

    улавливание активности радикалов1648

    Экстракт Общее количество фенолов (мгGAE / г) Общее количество флавоноидов (мгQE / г) DPPH анализ по улавливанию
    EC 50 ( μ г / мл)% активность по улавливанию радикалов EC 50 ( μ г / мл)

    AOH
    AOD
    AOM
    EGCG

    AOH: 1 мг / мл гексанового экстракта АО; AOD: дихлорметановый экстракт AO, 1 мг / мл; АОМ: 1 мг / мл метанольного экстракта АО; экстракта 1 мг / мл; образец сухой массы; значения выражаются как ().

    Эти значения находятся в том же диапазоне, что и у известных антиоксидантов, таких как EGCG и аскорбиновая кислота. В соответствии с антиоксидантной активностью в метанольном экстракте было зарегистрировано высокое содержание фенолов и флавоноидов 160,35 ГАЭ / г образца по сухому весу и 46,96 QE / г образца по сухому весу.

    Более того, гексановый экстракт АО показал активность по улавливанию радикалов на 61,03% (), как определено с помощью анализа ABTS. Тест ABTS может измерять поглощающую активность гидрофильных и гидрофобных веществ.Возможно, что поглощающая активность гексанового экстракта АО зависит от некоторых гидрофобных биоактивных соединений в гексановом экстракте АО. Объединенные результаты согласуются с недавним исследованием, показывающим, что экстракты АО содержат полифенолы и обладают антиоксидантным действием [14, 20]. Однако дихлорметановый экстракт АО не проявлял антиоксидантной активности, поэтому этот экстракт не использовали для последующих экспериментов.

    Для анализа антиоксидантной активности экстрактов АО in vivo уровни накопления внутриклеточных АФК были измерены с использованием H 2 DCF-DA, который деацетилируется внутриклеточными эстеразами, испуская флуоресценцию, которая коррелирует с внутриклеточными уровнями АФК [22]. .На рис. 2 показано влияние экстрактов АО на внутриклеточные АФК, а репрезентативные микроскопические изображения отдельных червей можно найти во вспомогательной информации (рис. S3). Черви дикого типа, обработанные гексановым экстрактом 25 мкл г / мл, показали сниженное накопление внутриклеточных ROS на 45,24% (скорректировано). Кроме того, черви дикого типа, обработанные 1,0 и 2,5 мкл г / мл метанольного экстракта, имели сниженное внутриклеточное накопление ROS на 7,22% и 58,10% соответственно (с поправкой) (рис. 2 (а)).Результаты находятся в том же диапазоне, что и положительный контроль EGCG, который является хорошо известным антиоксидантом из зеленого чая [17]. Были протестированы более высокие концентрации обоих экстрактов (50 и 100 мкл, г / мл гексанового экстракта,> 5 мкл г / мл метанольного экстракта); они не снижали уровень АФК у червей, возможно, из-за прооксидантной активности растительных экстрактов. Однако экстракты АО не смогли снизить уровни ROS у червей CF1038 (мутант DAF-16) и EU1 (мутант SKN-1) (рисунки 2 (b) и 2 (c)).Эти данные показывают, что экстракты АО в умеренных концентрациях обладают in vitro и in vivo антиоксидантной активностью за счет ослабления внутриклеточных уровней ROS в C. elegans. По-видимому, задействованы пути DAF-16 и SKN-1.

    Кроме того, мешающее влияние экстрактов на флуоресцентные измерения измеряли с помощью автофлуоресцентного анализа. Мы обнаружили, что экстракты АО, ДМСО и EGCG не влияли на экспрессию аутофлуоресцентного пигмента по сравнению с необработанным контролем.Эти данные показывают, что обработка EGCG, DMSO и экстрактом АО не влияла на интенсивность флуоресценции у червей (подтверждающая информация, рисунок S6).

    3.3. Экстракты АО повышают выживаемость нематод в условиях окислительного стресса

    Для дальнейшего исследования антиоксидантных свойств экстрактов АО была проанализирована выживаемость нематод в условиях окислительного стресса. При обработке юглоном 80 μ M в течение 24 ч выжило только 21% червей. Выживаемость червей дикого типа, предварительно обработанных 25 и 50 мкг г / мл гексанового экстракта, увеличилась на 36.71% () и 49,15% () соответственно. Кроме того, выживаемость червей дикого типа, предварительно обработанных 1,0 и 2,5 мкг г / мл метанольного экстракта, увеличилась на 40,89% () и 45,48% (), соответственно (рис. 3 (а)). Выживаемость была аналогична таковой у EGCG-положительного контроля (40,80%). Однако более высокие концентрации экстрактов АО (≥100 мкл г / мл гексанового экстракта и ≥5 мкл г / мл метанольного экстракта) не увеличивали значительно выживаемость червей в окислительных условиях по сравнению с таковыми из реагента ДМСО. контрольная группа, возможно, из-за их прооксидантной активности in vivo (подтверждающая информация Рисунок S4).

    3.4. Экстракты АО подавляли индуцированную стрессом экспрессию HSP-16.2 / GFP

    Для определения механизма антиоксидантной активности изучали защитную активность экстрактов АО против окислительного стресса. У нематод промотор белка теплового шока 16.2 (HSP-16.2) был соединен с GFP (штамм TJ375). В условиях окислительного стресса (20 мкг M юглона) индукция HSP-16.2 визуализировалась по высокой интенсивности флуоресценции GFP в голове трансгенных червей.Однако, когда черви TJ375 были предварительно обработаны 25, 50 и 100 мкг г / мл гексанового экстракта, интенсивность флуоресценции GFP была ниже, чем у контрольной группы DMSO в тех же условиях на 64,90%, 67,77% и 45,86%. % (), соответственно. Более того, черви TJ375, предварительно обработанные 1,0, 2,5 и 5 мкл г / мл метанольного экстракта, продемонстрировали интенсивность флуоресценции, которая снизилась на 78,04%, 68,27% и 22,32% (), соответственно (Рисунок 4 (a)). Экспрессия HSP-16.2 в условиях окислительного стресса, вызванного юглоном, подавлялась у червей экстрактами АО, аналогичными 25 мкг мкг / мл EGCG (61.91%,). Эти данные показывают, что экстракты АО являются биодоступными и проявляют in vivo антиоксидантных свойств.

    3.5. Экстракты АО индуцировали экспрессию SOD-3 / GFP у трансгенных
    C. elegans

    Для дальнейшего исследования антиоксидантных свойств экстрактов в контексте антиоксидантных ферментов в CF1553 определяли экспрессию SOD-3 (супероксиддисмутазы 3). черви. По сравнению с контрольной группой ДМСО черви CF1553, обработанные 25, 50 и 100 мкг г / мл гексанового экстракта, показали увеличение флуоресценции GFP на 25.41% (), 23,70% () и 22,64% () соответственно. Более того, черви CF1553, обработанные метанольным экстрактом 1,0, 2,5 и 5 мкг / г / мл, также показали усиление флуоресценции GFP на 27,37% (), 29,11% () и 24,87% (), соответственно, аналогично обработке EGCG. (Рисунок 4 (б)). Эти данные показывают, что экстракты АО могут усиливать антиоксидантный эффект in vivo за счет индукции антиоксидантных ферментов.

    3,6. Влияние экстрактов АО на локализацию транскрипционного фактора DAF-16 / FoxO в
    C.elegans

    Чтобы выяснить, опосредуют ли экстракты АО их антиоксидантную активность через путь DAF-16 / FoxO, мутантные черви DAF-16 с потерей функции (CF1038) были использованы в анализах выживаемости (рис. 3 (b)) и внутриклеточных Накопление ROS (рисунок 2 (b)) и трансгенные черви TJ356 были использованы в анализе субклеточной локализации DAF-16 (рисунок 4 (c)). Черви CF1038, предварительно обработанные всеми концентрациями экстрактов гексана и метанола, не показали ни увеличения выживаемости при окислительном стрессе (рис. 3 (b)), ни снижения уровня внутриклеточного накопления ROS по сравнению с контролем DMSO (рис. 2 (b)).Эти данные показывают, что экстракты АО не смогли увеличить выживаемость при окислительном стрессе и ослабить внутриклеточные уровни ROS у мутантов с потерей функции DAF-16.

    По сравнению с контрольной группой ДМСО, черви TJ356, обработанные 25, 50 и 100 мкг г / мл гексанового экстракта, показали повышенный уровень ядерной локализации DAF-16 :: GFP на 59,73% (), 63,74 % () и 57,45% () соответственно (Рисунок 4 (c)). Более того, у червей TJ356, обработанных 1,0, 2,5 и 5 мкг г / мл метанольного экстракта, наблюдалась аналогичная структура ядерной локализации (ядерная локализация 49.68% (), 58,74% () и 68,17% () соответственно). Эти эффекты аналогичны эффекту 25 мкг мкг / мл EGCG в качестве положительного контроля (45,95%,) (рис. 4 (c)). Наши данные показывают сильную ядерную локализацию DAF-16 по сравнению с контрольной группой ДМСО (13,56%). Интересно, что 5 мкл г / мл метанольного экстракта увеличивают ядерную локализацию DAF-16 :: GFP сильнее, чем EGCG (рис. 4 (c)). Взятые вместе, анализы выживаемости, накопления внутриклеточных АФК и анализы субклеточной локализации DAF-16 убедительно свидетельствуют о том, что экстракты АО опосредуют антиоксидантную активность и устойчивость к стрессу у C.elegans по пути DAF-16 / FoxO.

    3,7. Экстракты АО увеличивают экспрессию GST-4 / GFP в трансгенных
    C. elegans

    Глутатион является важным антиоксидантом в клетках и субстратом для глутатион-S-трансферазы. Ген глутатион-S-трансферазы 4 (GST-4) является целевым геном во второй фазе детоксикации и регулируется сигнальным путем SKN-1 [13]. Чтобы изучить влияние экстрактов АО на путь SKN-1, мы исследовали экспрессию GST-4 у червей CL2166.Черви CL2166, обработанные 25 и 50 мкг г / мл гексанового экстракта, показали повышенную интенсивность флуоресценции GFP (по сравнению с контрольной группой ДМСО) на 41,99% () и 17,68% () соответственно. Более того, черви CL2166, подвергшиеся воздействию метанольного экстракта 1,0, 2,5 и 5 мкг / г / мл, показали усиление флуоресценции GFP на 27,38% (), 23,80% () и 50,19% (), соответственно (рис. 5 (а)). Эти данные показывают, что антиоксидантная активность экстрактов АО также включает путь SKN-1.

    3.8. Влияние экстрактов АО на локализацию фактора транскрипции SKN-1 / Nrf-2 в
    C. elegans

    Для дальнейшего изучения того, проявляют ли экстракты АО свою антиоксидантную активность через сигнальный путь SKN-1, потеря SKN-1 -офункциональный мутант (EU1) использовался в анализах выживаемости (рисунок 3 (c)) и внутриклеточного накопления ROS (рисунок 2 (c)).

    Предварительная обработка этих мутантов метанольным экстрактом не приводила к значительному увеличению выживаемости червей в условиях окислительного стресса (рис. 3 (c)) и не уменьшала уровень внутриклеточного накопления ROS (рис. 2 (c)) у червей EU1.Эти данные показывают, что путь SKN-1, по-видимому, участвует в реакции на окислительный стресс, подобно пути DAF-16.

    Более того, трансгенных червей LD1 подвергали анализу субклеточной локализации фактора транскрипции в SKN-1. Черви LD-1, обработанные метанольным экстрактом 1,0, 2,5 и 5 μ г / мл, показали повышенную ядерную локализацию SKN-1 :: GFP на 28,49% (), 22,55% () и 24,10% (), соответственно (рис. 5 (б)). В то время как метанольный экстракт индуцировал ядерную транслокацию SKN-1, гексановый экстракт этого не делал.Эти данные убедительно свидетельствуют о том, что экстракты АО проявляют свою антиоксидантную активность и эффекты устойчивости к стрессу у C. elegans также через сигнальный путь SKN-1.

    3.9. Экстракты АО ослабляют маркеры старения

    Чтобы исследовать возможное влияние экстрактов АО на старение, измеряли накопление аутофлуоресцентного пигмента липофусцина и скорость глоточного насоса. Черви дикого типа, обработанные 25, 50 и 100 мкг г / мл гексанового экстракта, имели значительно более низкий уровень липофусцина (11.96%,; 17,55%,; и 12,62%; , соответственно). Аналогичный результат был получен для червей дикого типа, обработанных 1,0, 2,5 и 5 мкг г / мл метанольного экстракта (рис. 6 (а)) (снижение липофусцина на 12,25%, 18,48% и 8,39%, соответственно). Эти эффекты находятся в том же диапазоне, что и у 25 мкг г / мл EGCG (21,58%,).

    В другой серии экспериментов мы исследовали влияние экстрактов АО на функциональную активность мышц, маркер старения. Мы определили скорость глоточной откачки.На 5, 8, 10 и 12 дни взрослой жизни червей дикого типа обрабатывали гексановыми и метанольными экстрактами всех концентраций. Эти черви показали более высокую скорость откачки жидкости из глотки по сравнению с червями в контрольной группе с растворителем ДМСО. Более того, на 12-й день скорость откачки глотки у червей, обработанных гексановым экстрактом 25 μ г / мл и метанольным экстрактом 1,0 μ г / мл, была на 166% и 222% соответственно выше, чем у червей. в контрольной группе ДМСО (72%) () (Рисунки 6 (b) и 6 (c)).Эти данные (накопление липофусцина и скорость перекачки глотки) указывают на то, что экстракты АО, по-видимому, обладают эффектом против старения.

    3.10. Экстракты АО не повлияли на размер выводка, длину тела и площадь поверхности тела
    C. elegans

    На старение может влиять ограничение в питании (DR). Мы провели ряд экспериментов, чтобы определить, могут ли экстракты АО проявлять ДР.

    Для исследования потенциального мешающего воздействия экстрактов АО на DR были измерены размер выводка и длина тела нематод.На размер выводка и длину тела у червей дикого типа не влияли различные концентрации экстрактов гексана, дихлорметана и метанола (подтверждающая информация: Таблица S3 и Рисунок S5). Эти данные показали, что эффекты экстрактов АО не были вызваны DR.

    Чтобы исследовать мешающее влияние экстрактов АО на размер тела червей, была измерена площадь поверхности тела. На 8-й день площадь поверхности тела червей существенно не различалась по сравнению с таковой в контрольной группе ДМСО.Эти данные показали, что на улучшение скорости откачки жидкости из глотки, вызванной экстрактами АО, не повлиял размер тела червей. (Вспомогательная информация, рисунок S5c).

    3.11. Экстракты АО увеличивают среднюю продолжительность жизни C. elegans
    дикого типа

    Чтобы изучить, могут ли экстракты АО влиять на продолжительность жизни, мы проанализировали их влияние на продолжительность жизни мутантов дикого типа (N2) и Mev-1 (TK22). (мутация сукцинатдегидрогеназы цитохрома b вызывает окислительный стресс и короткую продолжительность жизни) червей [23].Гексановый экстракт (50 μ г / мл) увеличивал среднюю продолжительность жизни N2-червей на 20,31% () (рис. 7 (а)). Более того, 1 мкг г / мл метанольного экстракта вызывал увеличение средней продолжительности жизни N2-червей на 3,36% () (рис. 7 (b)). Однако экстракты AO гексана и метанола не смогли увеличить среднюю продолжительность жизни червей TK22 (рис. 7 (c) и 7 (d)) (подробности в таблице S4 (вспомогательная информация)). Эти данные показали, что экстракты АО могут влиять на продолжительность жизни через путь DAF-16.

    4.Обсуждение

    Природные соединения могут представлять собой новые агенты против старения, и многочисленные исследования сообщили о корреляции между природными антиоксидантными соединениями и способностями против старения [17, 18]. Это первый отчет, в котором описываются свойства экстрактов листьев AO против старения и устойчивости к окислительному стрессу, наблюдаемые у C. elegans .

    В этом исследовании мы обнаружили, что экстракты АО могут эффективно защищать C. elegans от тяжелого окислительного стресса и снижать внутриклеточные уровни ROS при умеренных концентрациях.Напротив, более высокие концентрации экстрактов АО оказались неэффективными. Возможно, что АО содержит анакардиновую кислоту, которая, как сообщалось, в высоких дозах токсична для клеток меланомы, бактерий и насекомых [21, 24, 25]. Мы предположили, что растительный экстракт может действовать как прооксидант и нуждается в оптимальной концентрации для защиты и снижения уровня АФК у червей [26].

    HSP представляют собой семейство белков, участвующих в сенсоре функции окислительного стресса. В C. elegans , HSP-16.2 играет ключевую роль в защите от окислительного стресса и АФК [27]. Мы наблюдали, что экстракты АО обладают защитным действием против окислительного стресса, поскольку они уменьшают накопление внутриклеточных АФК и противодействуют активности юглона (наблюдаемого по снижению экспрессии HSP-16.2). Эти способности были аналогичны эффектам антиоксидантных агентов, таких как EGCG [17] и богатые антоцианином экстракты пурпурной пшеницы [28].

    Путь передачи сигналов инсулин / IGF-1 (IIS) является хорошо известным путем долголетия в C.elegans , который модулирует экспрессию стрессовой реакции, метаболизм и продолжительность жизни посредством фактора транскрипции DAF-16 / FoxO и его нижестоящих мишеней [7, 8]. В нормальных условиях DAF-16 / FoxO остается неактивным в цитозоле до тех пор, пока условия окружающей среды, такие как стресс или определенные лиганды, не стимулируют транслокацию DAF-16 / FoxO из цитоплазмы в ядро, что приводит к экспрессии различных генов, которые способствуют стрессовой реакции [ 9]. SOD-3 — это антиоксидантный фермент, который активируется DAF-16; он опосредует O 2 • — очистку и балансировку ROS [19].Мы наблюдали, что экстракты АО гексана и метанола влияли на экспрессию SOD-3 и устойчивость к стрессу у C. elegans через путь DAF-16 / FoxO. Эти эффекты аналогичны эффектам других полифенолов, таких как богатый антоцианом экстракт пурпурной пшеницы [29], богатый антоцианом экстракт асаи [19] и хлорофилл [30], которые также, как было показано, активируют DAF-16. Путь FoxO в C. elegans .

    Другой путь, который участвует в продолжительности жизни и в антиоксидантных путях, — это путь передачи сигналов SKN-1 / Nrf-2.Ген SKN-1 является хорошо известным геном реакции на стресс и участвует в обеспечении долголетия у C. elegans [12, 13]. Глутатион (GSH) защищает от острого окислительного стресса [12]. Мы наблюдали, что метанольный экстракт влияет на экспрессию GST-4 и устойчивость к стрессу у C. elegans через сигнальный путь SKN-1. Эти эффекты аналогичны некоторым натуральным продуктам, включая пептиды эфирных масел кунжута и розы [31, 32]. Хотя гексановый экстракт АО не влиял на ядерную локализацию SKN-1, он индуцировал экспрессию GST-4.Возможно, что GST-4 активируется другим фактором транскрипции. Эти данные были поддержаны Detienne et al., Показав, что не только SKN-1, но также EOR-1, который является фактором транскрипции, опосредующим эффекты пути эпидермального фактора роста (EGF), может активировать GST-4 [33].

    В C. elegans функция мышц снижается с точки зрения насосной функции глотки; накопление пигмента (липофусцин) — еще один известный биомаркер старения. Важно отметить, что экстракты гексана и метанола могут снизить уровень липофусцина и улучшить скорость откачки жидкости из глотки у поздних взрослых червей, о чем уже сообщалось для EGCG [17, 34], антоцианов [19], хлорофилла [30], кофейной кислоты, кверцетина. , и кемпферол [18, 35].Экстракты АО проявили антивозрастные свойства. Мы обнаружили, что гельминты, обработанные гексановым экстрактом 50 мкг / г / мл и метанольным экстрактом 1 мкл г / мл, имели значительно более длительную среднюю продолжительность жизни, чем черви дикого типа. Однако экстракты АО не смогли увеличить среднюю продолжительность жизни мутантных червей Mev-1 (TK22), которые показали сокращенную продолжительность жизни. Эти эффекты были аналогичны эффектам, наблюдаемым в некоторых других натуральных продуктах, таких как хлорофилл [30] и натуральные лигнаны из Arctium lappa [26], что указывает на то, что эффект увеличения продолжительности жизни, вероятно, основан не только на устойчивости к окислительному стрессу и антиоксидантном эффекте.Этот результат убедительно свидетельствует об участии эндогенных сигнальных путей, отличных от прямого антиоксидантного механизма. Стрессоустойчивость и увеличение продолжительности жизни в основном зависят от DAF-16 / FoxO-зависимого пути [8]. Экстракты АО могут увеличивать экспрессию генов DAF-16 / FoxO и SKN-1, которые относятся к пути долголетия инсулина / IGF-1 (IIS) у C. elegans . Таким образом, факторы транскрипции DAF-16 и SKN-1 являются частью модуляторов увеличения продолжительности жизни у C.elegans .

    Насколько нам известно, это первое сообщение о биологически активных соединениях (флавоноидных гликозидах) в экстрактах листьев АО. Богатые флавоноидами растительные экстракты и кверцетин могут увеличивать продолжительность жизни, уменьшать накопление липофусцина и защищать червей от окислительного стресса за счет снижения внутреннего окислительного стресса и внутриклеточных АФК в C. elegans [18, 35, 36]. Эти данные подтверждают наш результат о том, что экстракты АО модулируют устойчивость к окислительному стрессу и увеличивают продолжительность жизни при температуре C.elegans .

    Более того, фитохимический анализ показывает, что гексановый экстракт АО содержит пальмитиновую кислоту, α -линоленовую кислоту и β -кариофиллен. В предыдущих работах сообщалось, что α -линоленовая кислота может восстанавливать глоточную помпу и увеличивать продолжительность жизни у C. elegans через сигнальный путь SKN-1 [37, 38], а β -кариофиллен может модулировать стрессовую реакцию за счет снижения внутриклеточного уровни свободных радикалов и влияние на пищевое поведение и скорость откачки жидкости из глотки, а также снижение уровня липофусцина в кишечнике и увеличение продолжительности жизни при C.elegans через SIR-2.1, SKN-1 и DAF-16 [39]. Эти данные свидетельствуют о том, что экстракты АО повышают устойчивость к окислительному стрессу через сигнальные пути DAF-16 / FoxO и SKN-1 / Nrf2. Поскольку известно, что эффекты продолжительности жизни и продолжительности жизни сильно коррелированы [26], экстракты АО могут опосредовать оба эффекта через сигнальные пути DAF-16 / FoxO и SKN-1 / Nrf2. Однако необходимы дальнейшие исследования для выяснения механизмов, лежащих в основе экстрактов АО по увеличению продолжительности жизни C. elegans .

    5. Выводы

    Таким образом, экстракты листьев АО продемонстрировали свойства устойчивости к окислительному стрессу через сигнальные пути DAF-16 / FoxO и SKN-1 / Nrf-2. Экстракты листьев АО также влияют на замедление старения и увеличение продолжительности жизни у C. elegans . Необходимы дальнейшие исследования, чтобы прояснить механизмы, лежащие в основе экстрактов АО по увеличению продолжительности жизни в тестах C. elegans и in vivo с более сложными модельными организмами.

    Сокращения
    -DAO Газовая хроматография масс-спектрометрия 16 916 54 Газовая хроматография масс-спектрометрия16 54
    AO: Anacardium occidentale L.
    AOH: Гексановый экстракт AO
    AOD: AO дихлорметановый экстракт
    AOM: AO метанольный экстракт
    DAO метанольный экстракт
    Foxhead box
    SKN-1 / Nrf-2: Ядерный фактор, связанный с эритроидом 2, фактор 2
    SOD-3: Супероксиддисмутаза-3
    GST-4: 916athione Glutathione 916-48 4
    HSP-16.2: Белок теплового шока-16,2
    ROS: Активные формы кислорода
    h3DCF-DA: 2,7-дихлорфлуоресцеиндиацетат
    Juglone: , 4-нафтохинон)
    ABTS: 2,2-Азинобис (3-этилбензотиазолин-6-сульфоновая кислота)
    DPPH: Диаммониевая соль, 2,2-дифенил-1-пикрилгидразил
    ДМСО: Диметилсульфоксид
    EGCG: Галлат эпигаллокатехина
    ГХ-МС: Газовая хроматография масс-спектрометрия 16 916 54
    VCEAC: Эквивалентная антиоксидантная способность витамина C
    GAE: Эквиваленты галловой кислоты
    QE: Эквиваленты кверцетина 916 53
    NaOH: Гидроксид натрия
    NaOCl: Гипохлорит натрия.
    Доступность данных

    Данные, использованные для подтверждения результатов этого исследования, включены в статью и файл дополнительной информации.

    Конфликт интересов

    Авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов в отношении публикации этой статьи.

    Благодарности

    Эта работа была поддержана стипендией «72-я годовщина со дня рождения Его Величества Короля для получения докторской стипендии», «Фондом Чулалонгкорнского университета 90 -й годовщины », а также «Фондом зарубежных исследований» Стипендия на получение опыта для аспирантов »аспирантуры Университета Чулалонгкорн.Особая благодарность выражается Мариане Роксо, Пилле Линк и Шаосюн Чжан (IPMB, Гейдельбергский университет, Германия) за предоставление инструкций по экспериментам C. elegans и обсуждение экспериментов, а также профессору Чарльзу Генри (Университет штата Колорадо, Колорадо, США). ) за языковую помощь и вычитку статьи.

    Дополнительные материалы

    Дополнительный рисунок S1: ABTS-активность AOH по улавливанию радикалов (4,69-600 μ г / мл) (a), AOD (37,5-600 μ г / мл) (b), AOM (2 .5-40 μ г / мл) (c), EGCG и витамин C (0,31-20 μ г / мл) (d). Дополнительный рисунок S2: активность АОМ по улавливанию радикалов DPPH (1,25-40 μ г / мл) (a) и EGCG и витамин C (0,31-20 μ г / мл) (b). Дополнительный рисунок S3: репрезентативные изображения флуоресценции DCFDA у червей, обработанных 25 μ г / мл AOH (a), 50 μ г / мл AOH (b), 100 μ г / мл AOH (c), 1 μ г / мл AOM (d), 2,5 μ г / мл AOM (e), 5 μ г / мл AOM (f), необработанный контроль (g), контроль растворителем DMSO (h) и 25 мкг г / мл EGCG (i).Дополнительная фигура S4: прооксидантный эффект экстрактов АО на внутриклеточные ROS у червей дикого типа. Обработка с использованием высоких концентраций экстракта AO (150 и 200 мкл / мл AOH; 10 и 20 мкл г / мл AOM) увеличивала уровни ROS у червей N2 по сравнению с контрольной группой DMSO. Данные представлены в виде (, повторяется трижды). ,, и, по сравнению с контролем ДМСО с помощью однофакторного дисперсионного анализа по методу Бонферрони (post hoc). Дополнительная таблица 1: предложенные фитохимические компоненты в гексановом экстракте АО с использованием ГХ-МС.Дополнительная таблица 2: предложенные фитохимические компоненты в метанольном экстракте АО с использованием ЖХ-МС. Дополнительная таблица 3: влияние экстрактов АО на маркеры старения и развития у C. elegans . Дополнительный рисунок S5: (а) размер расплода (вес), (б) длина тела (вес) и (в) площадь поверхности тела (ВА17) червей после обработки экстрактом АО. Обработка АО не влияла на активность яйцекладки, длину тела и площадь поверхности тела. Результаты представлены в виде трех независимых экспериментов ().Группы обработки сравнивают с контролем ДМСО с помощью однофакторного дисперсионного анализа по методу Бонферрони (post hoc). Дополнительный рисунок S6: обработка экстрактом АО не оказывала влияния на экспрессию аутофлуоресцентного пигмента. На интенсивность флуоресценции у червей обработка EGCG, DMSO и экстрактом АО не влияла. Данные представлены в виде () по сравнению с необработанным контролем с помощью однофакторного дисперсионного анализа по методу Бонферрони (post hoc). Дополнительная таблица 4: результаты и статистический анализ обработанного экстрактом АО C.elegans в анализе продолжительности жизни. (Дополнительные материалы)

    Стрессоустойчивость и увеличение продолжительности жизни Caenorhabditis elegans, усиленное пептидами из гидролизата белка мидий (Mytilus edulis)

    Биоактивные пептиды, полученные из мидий, выполняют несколько лечебных функций. В данной работе мы стремились изучить влияние препарата пептидов мидий на продолжительность жизни, стрессоустойчивость, апоптоз и старение у Caenorhabditis elegans .Продолжительность жизни определяли путем ежедневного подсчета количества выживших нематод. Уровень АФК и липофусцин измеряли с помощью флуоресцентного микроскопа. Белок мидий был приготовлен и гидролизован, а затем фракционирован ультрафильтрацией. Фракцию (<3 кДа) очищали гель-фильтрацией для получения биоактивных пептидов, и были идентифицированы пептидные последовательности, включенные во фракции, которые в основном состоят из пептидов с <20 аминокислотными остатками. Было обнаружено, что обработка пептидами мидий значительно повышает устойчивость к окислительному стрессу и увеличивает продолжительность жизни C.elegans . Кроме того, это лечение также снизило уровень эндогенных АФК и накопление пигментов старения у C. elegans , а также апоптоз. В совокупности эти находки продемонстрировали, что пептиды мидий могут способствовать увеличению продолжительности жизни C. elegans посредством регулирования экспрессии мРНК daf-2 и daf-16. Эти результаты подчеркнули важную роль пептидов мидий для пищевой и фармацевтической промышленности в разработке новых нутрицевтиков и функциональных пищевых продуктов.

    У вас есть доступ к этой статье

    Подождите, пока мы загрузим ваш контент… Что-то пошло не так. Попробуйте снова?

    Профилирование экспрессии генов ответа на окислительный стресс у мутантов AMPK с дефектом старения C. elegans с использованием массивно параллельного секвенирования транскриптомов | BMC Research Notes

    Мы провели глобальный сравнительный анализ транскриптомов животных aak-2 и животных дикого типа как в нормальных условиях, так и в условиях окислительного стресса, чтобы выявить различия между профилями экспрессии генов.В частности, мы сравнили транскриптомы от стрессированного транскриптома дикого типа и подвергнутого стрессу мутантов aak-2 и мутантов aak-2 в нормальных условиях против нестрессированного транскриптома дикого типа (N2). Мы использовали уровни экспрессии генов в нестрессорном транскриптоме дикого типа в качестве исходного уровня / контроля и сравнили уровни экспрессии генов в трех других транскриптомах с этим исходным уровнем, чтобы идентифицировать гены с дифференциальной экспрессией в каждом образце относительно дикого типа, а затем сравнили группы дифференциально экспрессируемые гены относительно нестрессированного дикого типа между транскриптомами (нестрессированный дикий тип с этого момента называется просто диким типом, и все меры изменения экспрессии генов относятся к дикому типу).

    Чтобы идентифицировать статистически значимые изменения в экспрессии генов, мы рассчитали p-значения Audic Claverie [21] для каждого попарного сравнения образцов с диким типом. Числа считывания последовательностей были нормализованы для каждого гена, сначала по его длине, учитывая, что считывания последовательностей показали довольно равномерное распределение, а затем по общему количеству считываний каждого образца. Мы выбрали гены с p-значениями менее 0,01 и минимальным ~ 1,5-кратным различием (т.е. log 2 (нормализованные чтения aak-2 / нормализованные чтения N2) <-0.7 или> 0,7).

    Общее количество считываний последовательностей для каждой библиотеки последовательностей кДНК указано в дополнительном файле 1. В среднем 71% всех считываний последовательностей были сопоставлены с транскриптомом C. elegans в WormBase (WS180). После того как мы устранили неоднозначные совпадения последовательностей с несколькими генами, которые включали много псевдогенов (данные не показаны), мы смогли однозначно отнести примерно 65% от общего числа считываний последовательностей из каждой библиотеки последовательностей к транскриптому C. elegans .Количество считываний последовательностей, отображаемых на ген, варьируется от одного до более 100000 считываний. Приблизительно 85% из транскриптов C. elegans были идентифицированы считыванием последовательностей в каждой библиотеке.

    Затем мы провели Q-PCR, чтобы подтвердить некоторые изменения уровня экспрессии генов, измеренные путем секвенирования. Мы выбрали 20 генов, которые показали значительное повышение или понижение регуляции у подвергнутых стрессу мутантов aak-2 по сравнению с диким типом, но показали незначительные изменения экспрессии у подвергнутых стрессу животных дикого типа по сравнению с диким типом.Для этой проверки мы подготовили новые образцы РНК, которые также могут служить в качестве биологических копий. Результат Q-PCR показывает общее хорошее соответствие профилей экспрессии генов и изменений с данными WTSS, как показано в дополнительном файле 2, который подтверждает наш подход.

    Ответ на окислительный стресс у животных дикого типа (N2)

    Сначала мы исследовали транскрипционные изменения у животных дикого типа после воздействия параквата, вызванного окислительным стрессом. Используя описанный выше статистический метод, мы идентифицировали 499 генов, экспрессия которых была значительно изменена.Из 499 дифференциально экспрессируемых генов 323 были активированы, а 176 подавлены (рис. 1). Чтобы идентифицировать избыточно представленные функции, связанные с дифференциально экспрессируемыми генами, мы использовали GOstat [22], инструмент для категоризации аннотаций генной онтологии и генерации статистики избыточно представленных терминов.

    Рисунок 1

    Гены со статистически значимой дифференциальной экспрессией генов . Количество генов, подвергшихся значительному усилению или понижению регуляции у стрессированных мутантов aak-2, и нестрессированных мутантов aak-2 по сравнению с нестрессированными мутантами дикого типа, используемыми в качестве контроля.У подвергнутых стрессу и нестрессированных мутантов aak-2 имеется значительно больше генов, регулируемых с повышением или понижением регуляции, чем у подвергнутых стрессу мутантов дикого типа.

    Гены, участвующие в реакции на стресс и старение, активируются у животных дикого типа в условиях оксидативного стресса

    Как и ожидалось, у животных, подвергшихся стрессу, повышается активность генов, связанных со стрессом и старением, включая несколько генов белков теплового шока ( hsp-16.1). , hsp-16.11, hsp-16.2, hsp-16.41, hsp-16.48, hsp-16.49 ), гены, участвующие в окислительном фосфорилировании и синтезе АТФ ( atp-2 , h38O16.1, F58F12.1 , vha-1, vha-2, vha-4, vha-8, vha-11, vha-15 ) и гены, участвующие в старении ( acdh-1, mca-3, ppn- 1, cct-5 , T27F7.3, T27F7.1 , rab-1, cgh-1 , F59E10.3, T02H6.11, C30C11.4, cpr-1, ifb-1, dod-6 ). Однако наиболее широко представленной группой генов, активируемых в ответ на окислительный стресс, были гены, кодирующие коллагены, примерно 50 из которых были значительно активированы у этих животных. Несколько hedgehog-подобных белков ( grl-16, grl-4, grl-7, wrt-4, wrt-10 ) также были активированы, как и регулируемые гены daf-2 и daf-16 . dao-2, dao-4 и dao-5 (дополнительный файл 3).Наиболее сильно представленные термины GO, связанные с активацией генов у дикого типа в ответ на окислительный стресс, показаны в дополнительном файле 4: Supplementary Table S3a.

    Биосинтетические и репродуктивные процессы подавляются у животных дикого типа при окислительном стрессе

    Гены, которые значительно подавляются у животных дикого типа при окислительном стрессе (дополнительный файл 5), включают гистоны ( his ) и рибосомные белки (). рпс, рпл ).Снижение транскрипции генов гистонов и рибосомных белков указывает на то, что процессы биосинтеза, такие как транскрипция и трансляция, подавляются, поскольку синтез гистонов зависит от продолжающейся репликации ДНК [23]. Другие гены с пониженной регуляцией, участвующие в метаболических процессах мРНК, включают gut-2, lin-40, lsm-5 , lsm-6, mxl-1, nhr-37 и rab-18 . Гены, участвующие в репродукции, также были подавлены, как и несколько генов, которые, как известно, действуют в установлении клеточной локализации ( aps-3, ddp-1, dyrb-1, elc-1, pfd-6 ) и гены, кодирующие просапозины ( spp-3, spp-4, spp-5, spp-14, spp-17, spp-23 ), липид-связывающих белков, необходимых для постэмбрионального развития.Наиболее сильно представленные термины GO (биологические процессы), связанные с подавляемыми генами у дикого типа в ответ на окислительный стресс, показаны в дополнительном файле 4: Дополнительная таблица S3b.

    Стрессовые ответы

    мутантов aak-2 по сравнению со стрессовыми ответами животных дикого типа

    Мы исследовали изменения уровня экспрессии генов у мутантов aak-2 в условиях окислительного стресса по сравнению с диким типом. На основе этого анализа мы идентифицировали 763 гена, которые были значительно активированы, и 202 гена, которые были значительно подавлены по сравнению с диким типом (рис. 1, дополнительный файл 6).Затем мы сравнили эти дифференциально экспрессируемые гены с транскрипционными изменениями у животных дикого типа в условиях стресса, чтобы выявить сходства и различия в их ответах на окислительный стресс.

    Корреляция между изменениями уровня экспрессии всех генов в ответ на окислительный стресс у дикого типа и мутантов aak-2 показана на рисунке 2A (R 2 = 0,58). На рис. 2В показаны гены, которые обычно активируются или подавляются как у мутантов aak-2 дикого типа, так и у мутантов aak-2 в ответ на окислительный стресс по сравнению с генами дикого типа (как показано зеленым).Эта корреляция очень высока, о чем свидетельствует линейная регрессия (R 2 = 0,92). 239 гена с повышенной экспрессией и 142 гена с пониженной регуляцией были общими как для мутантов дикого типа, так и для мутантов aak-2 (рис. 3A, B), и в большинстве случаев степень изменения уровня экспрессии этих генов в ответ на окислительный стресс напрямую зависела от сопоставимы между мутантами aak-2 дикого типа и .

    Рисунок 2

    Сравнение изменений уровня экспрессии генов против окислительного стресса между диким типом и aak-2 мутантами . (A) Корреляция между изменениями уровня экспрессии всех генов, идентифицированных у подвергнутых стрессу мутантов aak-2 дикого типа и подвергнутых стрессу мутантов aak-2 по сравнению с нестрессированными мутантами дикого типа. (B) Корреляция между изменениями уровня экспрессии генов, которые значительно усиливаются или подавляются, как правило, у подвергнутых стрессу мутантов дикого типа и подвергнутых стрессу мутантов aak-2 по сравнению с нестрессированными мутантами дикого типа (зеленый). Обычно активируемые или подавляемые гены у мутантов aak-2 , подвергнутых стрессу, и у мутантов aak-2 , подвергнутых стрессу, демонстрируют гораздо более высокую корреляцию по сравнению со всеми генами, что указывает на то, что эти гены обычно регулируются не только у мутантов aak-2 дикого типа и против окислительного стресса. но и степень изменений уровня экспрессии в целом довольно схожа.Обычно активируются или подавляются гены у подвергнутых стрессу мутантов aak-2 дикого типа и стрессовых aak-2 , и уровень их экспрессии изменяется у нестрессированных мутантов aak-2 (оранжевый). Большая группа коллагенов обычно активируется у подвергнутых стрессу мутантов aak-2 дикого типа и стрессированных мутантов aak-2 , но незначительно изменяется у нестрессированных мутантов aak-2 , как указано.

    Рисунок 3

    Число обычно или статистически дифференциально регулируемых генов у мутантов aak-2 в ответ на окислительный стресс и примеры . (A) Диаграмма Венна, показывающая количество обычно повышающих или (B) подавляемых генов со статистически значимыми изменениями уровня экспрессии генов у дикого типа и мутантов aak-2 в ответ на окислительный стресс по сравнению с диким типом (перекрытие регионов), а также количество генов, которые подвергаются повышенной или пониженной регуляции исключительно у подвергнутых стрессу мутантов aak-2 дикого типа или подвергнутых стрессу aak-2 по сравнению с диким типом (неперекрывающиеся области). Цифры в скобках указывают на гены, которые показали наибольшую разницу в экспрессии генов по сравнению с диким типом между двумя библиотеками, подвергнутыми стрессу дикого типа и подвергнутому стрессу aak-2 (i.е. гены, которые показали значительные изменения в одной библиотеке (то есть соотношение Log 2 относительно дикого типа больше или меньше, чем | 0,7 |, p-val <0,01), но показали незначительные изменения (то есть отношение Log2 относительно дикого типа больше или меньше, чем ~ | 0.3 |) или существенно изменились в противоположном направлении в другой библиотеке). Например, в скобках имеется относительно большая подгруппа генов (125), значительно активированная у мутантов aak-2 в ответ на окислительный стресс, но либо незначительно регулируемая, либо значительно подавляющаяся у дикого типа при окислительном стрессе. (C) Просмотр в браузере UCSC hsp-16.2 и hsp-16.41 с последовательностями, выровненными с моделями генов. Показаны четыре образца (стрессированный дикий тип (N2), стрессированный aak-2 , ненапряженный дикий тип (N2), ненапряженный aak-2 ). Очевидно, что hsp-16.2 и hsp-16.41 гораздо более высоко экспрессируются у стрессированных мутантов aak-2 дикого типа и стрессированных мутантов aak-2 , чем у нестрессированных мутантов aak-2 , подвергнутых стрессу, и у стрессированных мутантов aak-2 , особенно у стрессированных aak. -2 мутантов.Примечание. Шкалы минимального и максимального количества считываний для четырех образцов различаются. (D) Просмотр в браузере UCSC fat-7 с последовательностью считывания, выровненной с моделью гена. Показаны четыре образца (стрессированный дикий тип, стрессированный , aak-2 , стрессированный дикий тип, нестрессированный , aak-2 ). Как показывает количество картированных считываний последовательностей, fat-7 гораздо более высоко экспрессируется в мутантах aak-2 (подвергнутых стрессу и без стресса) по сравнению с мутантами дикого типа (подвергнутыми стрессу и без стресса).Примечание. Шкалы минимального и максимального количества считываний для четырех образцов различаются.

    Обычно повышенная или понижающая регуляция генов у мутантов дикого типа и aak-2 в условиях окислительного стресса — мутанты aak-2 демонстрируют повышенный стрессовый ответ

    Большинство обычно негативно регулируемых генов у стрессированных генов дикого типа и aak-2 мутанты необходимы для трансляции и транскрипции, включая рибосомные белки и гистоны. Просапозины также сильно подавлены как у стрессированных мутантов дикого типа, так и у мутантов aak-2 (дополнительный файл 7).

    Большинство генов, активируемых у животных дикого типа в ответ на окислительный стресс, также были активированы у подвергнутых стрессу мутантов aak-2 (дополнительный файл 8). У мутантов aak-2 , подвергшихся стрессу, экспрессия некоторых генов была заметно более высокой, включая белки теплового шока ( hsp-16.1, hsp-16.2, hsp-16.11, hsp-16.41, hsp-16.48 и hsp-16.49). ) (рис. 3C), acdh-1 , короткоцепочечная ацил-CoA дегидрогеназа, участвующая в выработке энергии и увеличении продолжительности жизни [24], и lgg-1 , связанный с микротрубочками якорный белок, участвующий в аутофагии и мембране. торговля людьми [25].Кроме того, lys-4, lys-5, lys-6, , лизоцимы, о которых известно, что они функционируют в системе врожденного иммунитета [26], были значительно более активными у подвергнутых стрессу мутантов aak-2 . Наконец, гены коллагена, которые были значительно активированы у животных дикого типа, также были активированы у мутантов aak-2 в ответ на окислительный стресс, показывая немного повышенную общую экспрессию в подвергшейся стрессу популяции aak-2 . Из этого результата мы заключаем, что подвергнутые стрессу мутанты aak-2 демонстрируют более повышенный общий стрессовый ответ, поскольку транскрипция генов, участвующих в стрессоустойчивости, регулируется в большей степени, чем у подвергнутых стрессу животных дикого типа.

    Различия в ответной реакции на стресс между мутантами дикого типа и aak-2 — AAK-2 участвует в подавлении биосинтетических процессов в ответ на окислительный стресс

    Как показано на рисунке 3A, существует подмножество из 125 генов, которые специфически активны. регулируется у мутантов aak-2 в условиях окислительного стресса, перечисленных в таблице 1. Это гены, экспрессируемые в наибольшей степени между подвергнутыми стрессу диким типом и подвергнутыми стрессу мутантами aak-2 , поскольку они показывают значительные изменения уровня экспрессии генов в стрессированных aak-2 мутантов относительно дикого типа, но они либо незначительны, либо значительно подавлены у животных дикого типа в условиях стресса по сравнению с диким типом (в дополнительном файле 9 перечислены сравнения кратных изменений для этих генов в стрессовом состоянии дикого типа по сравнению с диким типом и в стрессовом состоянии aak- 2 мутантов относительно дикого типа, а также описания генов).Интересно, что исследование функционально охарактеризованных генов в этой группе выявило повышенную регуляцию определенных биосинтетических процессов, особенно синтеза жирных кислот (Таблица 2). Известные гены в этом случае включают десатуразы жирных кислот (, жир, -), и несколько белков, связывающих жирные кислоты (, дальний — ), также были активированы в мутантах aak-2 в ответ на окислительный стресс по сравнению с диким типом. Хотя это и не является статистически значимым, интересно отметить, что некоторые элонгазы длинноцепочечных жирных кислот ( elo-), особенно elo-1 , немного повышали регуляцию у мутантов aak-2 , подвергшихся стрессу, по сравнению с мутантами дикого типа.Кроме того, гены, участвующие в биосинтезе коферментов и аминокислот, а также гены, участвующие в процессе метаболизма углеводов, также подвергаются повышенной регуляции. Эти наблюдения могут означать, что AAK-2 действует в подавлении этих энергозатратных биосинтетических процессов, когда животные находятся в состоянии окислительного стресса (дополнительный файл 10).

    Таблица 1 125 генов со значительным усилением регуляции исключительно у подвергнутых стрессу мутантов aak-2 , отсортированных по изменениям уровня экспрессии у подвергнутых стрессу aak-2 , по сравнению с животными дикого типа. Таблица 2 Наиболее широко представленные биологические процессы, в которых участвуют 125 генов, перечисленных в Таблице 1, по результатам анализа GO

    Восемь генов значительно активированы у подвергнутых стрессу животных дикого типа, но незначительно изменены или значительно подавлены у животных подвергнутые стрессу мутанты aak-2 относительно дикого типа — это tsn-1 , C17h22.8, C30G12.2, K07C5.4, K10C2.3, R09E12.3, Y57G11C.9 и Y113G7B.17. Как показано на Фигуре 3B, только девять генов были значительно подавлены исключительно у животных дикого типа в ответ на окислительный стресс по сравнению с диким типом ( col-95 , C45B2.1, F53A9.1, F53A9.8, lbp-6 , MTCE.15 , nspa-5, tin-9.1 и Y60A3A.21), в то время как они были либо незначительно изменены, либо значительно повышены в условиях стресса. aak-2 мутантов относительно дикого типа. Еще 11 генов специфически подавляются у мутантов aak-2 , подвергшихся стрессу, по сравнению с мутантами дикого типа ( cct-8 , rpl-25.2, rps-27 , F15E11.1, F15E11.14, F15E11.15, F45D11 .14, F45D11.15, F45D11.16, K10C2.3 и Y48G8AL.12) также были отмечены.

    Эти исключительно регулируемые гены являются наиболее дифференцированно регулируемыми генами между подвергнутыми стрессу мутантами aak-2 дикого типа и подвергнутыми стрессу aak-2 , и, следовательно, эти гены могут быть потенциальными нижестоящими мишенями, которые потенциально находятся под прямым или косвенным контролем AAK-2. Многие из этих генов не имеют известных функций и еще предстоит охарактеризовать. Дальнейшее исследование этих генов может раскрыть новые отношения и функции для aak-2 и выявить конкретные мишени aak-2 , которые действуют в биологических процессах, в которых, как известно, участвует AAK-2.

    Дифференциально регулируемые гены у нестрессированных

    мутантов aak-2 по сравнению с животными дикого типа

    Всего 1074 гена показали статистически значимую дифференциальную экспрессию генов у нестрессированных мутантов aak-2 по сравнению с диким типом. Среди этих генов 706 генов были активированы, а 368 генов подавлены (Рисунок 1).

    Гены, участвующие в стрессовой реакции, старении и зародышевой линии, активируются у нестрессированных мутантов aak-2 по сравнению с диким типом

    В дополнительном файле 11 перечислены гены, которые значительно активированы у нестрессированных мутантов aak-2 по сравнению с диким типом. Тип животных, а в дополнительном файле 12 показаны наиболее широко представленные биологические процессы, в которых участвуют эти гены, согласно анализу GOstat.Включены гены, которые, как известно, участвуют в реакции старения и стресса ( acdh-1, cgh-1, dao-5, daf-16, daf-18, fat-7, lin-41, mup-4, mdt-15 ), белки теплового шока ( hsp-16.1, hsp-16.11, hsp-6, hsp25 ) и вакуолярные протон-транслоцирующие АТФазы ( vha-4, vha-5, vha-8, vha-11, vha- 13, vha-14, vha-15, vha-16 ).

    Другой интересной группой генов, которые в высокой степени активированы у нестрессированных мутантов aak-2 по сравнению с диким типом, являются гены вителлогенина (от vit-1 до vit-6 ), все из которых были статистически высоко значимыми. дифференциально экспрессируемые гены наблюдались у мутантов aak-2 дикого типа и нестрессированных (среднее значение p-val = 4.05E-42). Наконец, большая группа генов, участвующих в репродукции, была активирована у нестрессированных мутантов aak-2 по сравнению с диким типом. Эти гены участвуют в генерации гамет, откладывании яиц и регуляции мейоза, оогенеза, дифференцировки пола, эмбрионального дробления и деления клеток.

    Биосинтетические процессы и выработка энергии подавляются у нестрессированных мутантов aak-2 по сравнению с диким типом

    Многие гены, кодирующие рибосомные белки, и гены гистонов подавляются у нестрессированных мутантов aak-2 , что указывает на общую подавляющую регуляцию биосинтетические процессы.Гены, участвующие в удлинении трансляции ( rla-2 , rla-1 , c37a2.7, zk512.4) и метаболических процессах мРНК ( snr-7, snr-6, lsm-3, lsm-8, кишечник- 2, snr-3, lsm-6, lsm-5, snr-5 и y48g1c.9) были подавлены. Кроме того, большое количество основных белков сперматозоидов (MSP) значительно подавляется. Другие интересные гены с пониженной регуляцией включают просапозины ( spp-3, spp-4, spp-5, spp-14, spp-17, spp-23 ) и tin-13, tin-9.1 и ddp. -1 , которые участвуют в организации и биогенезе внутренней митохондриальной мембраны, а также в импорте белка во внутреннюю мембрану митохондрий (дополнительный файл 13).

    Гены, участвующие в окислительном фосфорилировании и генерации энергии, также подавлялись у нестрессированных мутантов aak-2 по сравнению с мутантами дикого типа ( asg-1 , atp-4 , mtce.4 , vha- 3 , cyc-2.1, tag-174 , F26E4.6, Y82E9BR.3, C33A12.1, T27E9.2, F45h20.2, B0035.18, R07E4.3, F29C4.2, Y71h3AM.5, F45h20 .3, R04F11.2 и D2030.4) (дополнительный файл 14). Наконец, наиболее сильно подавляемые гены у нестрессированных мутантов aak-2 — это F15E11.1, и паралоги F15E11.12, F15E11.13, F15E11.15 и Y19D10B.7, которые принадлежат к семейству, специфичному для нематод. Транскрипция этих генов была почти полностью подавлена, что свидетельствует об уменьшении численности в 12–14 раз у нестрессированных мутантов aak-2 по сравнению с диким типом.

    Сравнение нестрессированных мутантов

    aak-2 с подвергнутыми стрессу мутантов aak-2

    Наконец, мы сравнили значительно дифференциально экспрессируемые гены у нестрессированных aak-2 и подвергнутых стрессу мутантов aak-2 по сравнению с животными дикого типа в чтобы идентифицировать изменений экспрессии специфического гена aak-2 у мутантов до и после воздействия параквата.Поскольку большинство транскрипционных изменений у подвергнутых стрессу мутантов aak-2 также наблюдались у подвергнутых стрессу животных дикого типа, мы также включили в сравнение изменения экспрессии генов у подвергнутых стрессу животных дикого типа.

    Обычно дифференциально регулируемые гены у нестрессированных мутантов aak-2 и стрессовых aak-2: нестрессированные мутанты aak-2 проявляют стрессовую реакцию

    Как показано на рисунке 4A, у нестрессированных мутантов aak-2 имеется 91 ген, значительно активированный относительно дикого типа, которые являются общими для подвергнутых стрессу мутантов aak-2 , а также для подвергнутых стрессу мутантов дикого типа по сравнению с диким типом.К ним относятся гены, участвующие в защитной реакции, окислительном фосфорилировании и старении (дополнительный файл 15). Кроме того, существует 118 генов, которые значительно подавлены у нестрессированных мутантов aak-2 , которые также значительно подавлены у подвергнутых стрессу aak-2 и подвергнутых стрессу животных дикого типа по сравнению с диким типом (Рисунок 4B, дополнительный файл 16). Эти гены включают ряд рибосомных белков, гистонов и просапозинов. Этот результат может указывать на то, что нестрессированные мутанты aak-2 реагируют на некоторый фоновый уровень внутреннего окислительного стресса, включая метаболизм и репродукцию, предположительно в результате отсутствия AAK-2.

    Рисунок 4

    Обычно дифференциально регулируемые гены у нестрессированных aak-2 и стрессовых aak-2 и транскрипционных изменений, специфичных для нестрессированных мутантов aak . (A) Диаграмма Венна, показывающая количество обычно повышающих или (B) подавляемых генов со статистически значимыми изменениями уровня экспрессии генов у подвергнутых стрессу диких типов, подвергнутых стрессу мутантов aak-2 и нестрессированных мутантов aak-2 (перекрывающиеся области), а также количество генов, регулируемых с повышением или понижением исключительно в одной библиотеке (неперекрывающиеся области).Примечательно, что существует относительно большая подгруппа генов с повышенной (137) или подавляющей (92) значимой у нестрессированных мутантов aak-2 , но либо незначительно регулируется, либо значительно регулируется в противоположном направлении у подвергнутых стрессу дикого типа и подвергнутых стрессу aak- 2 мутантов. (C) Гены значительно дифференциально экспрессируются в нестрессированных мутантах aak-2 по сравнению с мутантами дикого типа, но незначительно регулируются или значительно изменяются в противоположном направлении у подвергнутых стрессу мутантов aak-2 дикого типа или значительно изменяются в противоположном направлении.Гены отсортированы по изменению уровня экспрессии (соотношение log 2 ) у нестрессированных мутантов aak-2 , а некоторые интересные гены помечены, как вителлогенины ( vit ) и основные белки сперматозоидов ( msp ). Например, гены msp сильно подавлены у нестрессированных мутантов aak-2 , как показано красными точками, но слегка повышены в среднем у подвергнутых стрессу мутантов aak-2 , подвергнутых стрессу, дикого типа и подвергнутых стрессу мутантов aak-2 , как показано синие и зеленые точки соответственно.

    Изменения транскрипции, специфичные для нестрессированных мутантов aak-2: нестрессированные мутанты aak-2 демонстрируют транскрипционные изменения при репродукции

    Однако есть гены, которые не показывают значительных изменений в экспрессии или значительно подавляются у нестрессированных мутантов aak-2 относительно дикого типа, которые обычно активируются как у подвергнутых стрессу aak-2 , так и у подвергнутых стрессу животных дикого типа по сравнению с диким типом (как показано оранжевым цветом на рисунке 2B). В эту группу генов входят коллагены, гены, участвующие в старении ( dod-6, dao-2, dao-4 , F59E10.3, T02H6.11, T27F7.3), защитный ответ ( hsp-16.2, hsp-16.41 ) и локализация белка ( arf-3, dlc-1, trap-3, tag-170 , C28H8.4 , F59E10.3, W10D9.5) (дополнительный файл 17), предполагая, что стрессовая реакция нестрессированных мутантов aak-2 не такая сильная, как у животных, получавших паракват, либо из-за разной степени тяжести уровня окислительного стресса. или отсутствие активности AAK-2 в стрессоустойчивости. Подвергнутые стрессу мутанты aak-2 , однако, продемонстрировали даже более высокую стрессовую реакцию, чем подвергшиеся стрессу животные дикого типа, как обсуждалось ранее, что потенциально указывает на активность альтернативных путей стрессовой реакции у этих животных, которые компенсировали отсутствие функций AAK-2 в более тяжелых случаях. стрессовая среда.

    Напротив, имеется 137 генов с повышенной регуляцией и 92 гена с пониженной регуляцией только в нестрессированных мутантах aak-2 по сравнению с мутантами дикого типа (рис. 4C). Большая часть этих генов участвует в репродуктивных процессах, таких как генерация гамет, дифференциация пола, развитие ооцитов, регуляция митоза и мейоза зародышевой линии, развитие вульвы и оплодотворение, как и все гены вителлогенина ( vit-1 от до vit-6 ), которые, как известно, участвуют в транспортировке и хранении жира в зародышевой линии [27] (Таблица 3).Кроме того, что особенно важно, гены, участвующие в стрессовых ответах, такие как фактор транскрипции вилки, daf-16 и липид фосфатаза, daf-18 , более высоко регулируются у нестрессированных мутантов aak-2 по сравнению с мутантами aak-2 . дикого типа, чем у подвергнутых стрессу мутантов aak-2 дикого типа или стрессированных мутантов aak-2 по сравнению с диким типом. Известно, что DAF-16 и DAF-18 регулируют широкий спектр генов, участвующих в долгожительстве и стрессовых реакциях.

    Таблица 3 Гены со значительным усилением регуляции исключительно у нестрессированных aak- 2 мутантов относительно дикого типа и связанных с ними терминов GO (биологический процесс)

    Большое количество генов основных белков сперматозоидов (~ 30) было высоко подавлялись у нестрессированных мутантов aak-2 по сравнению с диким типом, но были незначительно изменены у стрессированных мутантов дикого типа и стрессированных мутантов aak-2 по сравнению с диким типом.Другие интересные гены, подавляемые только у нестрессированных мутантов aak-2 , включают dao-2 и emo-1 . DAO-2 представляет собой секретируемый белок, который подавляется у daf-2 мутантных животных и, таким образом, может участвовать в образовании дауэра [28]. EMO-1 является ортологом гамма-субъединицы S. cerevisiae Sec61p, которая необходима для транслокации секретируемых и мембранных белков в эндоплазматический ретикулум. EMO-1 необходим для оогенеза и овуляции [29].

    Наконец, лизоцимы lys-1 и lys-2 , малые ядерные рибонуклеопротеины snr-3, snr-6, snr-7 и F45h20.2, Y71h3AM.5, T27E9.2, D2030.4, гены, участвующие в гомеостазе воды / осморегуляции и генерации метаболитов-предшественников и энергии, значительно подавляются только у нестрессированных мутантов aak-2 по сравнению с диким типом, но незначительно изменяются у подвергнутых стрессу мутантов aak-2 по сравнению с мутантами дикого типа и у стрессированных мутантов aak-2 по сравнению с дикий тип (дополнительный файл 18).

    Повышение стрессоустойчивости и продолжительности жизни у Chaenorhabditis elegans Wildtype и нокаут-мутантов — значение для лечения депрессии лекарственными травами

    Molecules2021, 26, 182722of23

    41. Naß, J.; Абдельфатах, S .; Эфферт, Т. WithanolideA.Phytomedicine2021, 84, 153482, doi: 10.1016 / j.phymed.2021.153482.

    42. Naß, J.; Abdelfatah, S.; Efferth, T.Ursolicacid повышает стресс-резистентность, снижаетаккумуляциюROSи продлевает продолжительность жизни in

    Мутанты с дефицитом серотонина C.elegans.FoodFunct.2021, doi: 10.1039 / d0fo02208j.

    43. Naß, J.; Efferth, T.Ursolic кислотымелиоратыстрессовыеиреактивныевиды кислорода вCelegansкокаутмутанты дофамином

    рецепторами Dop1 и Dop3.Phytomedicine2021, 81, 153439, doi: 10.1016 / j.phymed.2020.153439.

    44.Stiernagle, «T.MainitingofC.elegans.WormBook2006, 1–11, doi: 10.1895 / wormbook.1.101.1.

    45. Yoon, DS; Lee,. M.-H.; Cha, DSИзмерение внутриклеточныхROSinCaenorhabditiselegans с использованием 2 ′, 7′‐

    дихлордигидрофлуоресцеиндиацетата. Bio ‐ Protocol2018, 8, doi: 10.21769 / BioProtoc.2774.

    46. Соломон, A.; Bandhakavi, S.; Jabbar, S.; Shah, R.; Beitel, GJ; Morimoto, RICaenorhabditiselegansOSR-1 регулирует поведенческие

    и физиологические реакции на гиперосмотическую среду.«Генетика», 2004, №167, №161–170, «doi: 10.1534 / genetics.167.1.161.»

    47. Зевиан, «СК; of nematodeCaenorhabditiselegans.Methods2014, 

    68, 450–457, doi: 10.1016 / j.ymeth.2014.04.015.

    48. Sutphin, GL; Kaeberlein , M.MeasuringCaenorhabditiseleganslifespanonsolidmedia.J.Vis.Exp.2009, 27, 1152, 

    doi: 10.3791 / 1152.

    49. Лу, X.; Saeed, MEM; Hegazy, M.-EF; Kampf, C.J.; «Эфферт», «Т. 10, 1000, doi: 10.3390 / biom10071000.

    50. Chen, N.; Chen, J.; Yao, B.; Li, Z.QSARStudyon антиоксидантные трипептиды и антиоксидантная активность разработанных трипептидов

    в свободных радикальных системах.

    51. Набави, SM; Набави, SF; Sureda, A.; Caprioli, G.; Iannarelli, R.; Sokeng, AJT; Braidy, N.; Khanjani, S.; Moghaddam, AH; 

    Атанасов, AG; etal. Водный экстрактtutsan (HypericumandrosaemumL.) Redberryexpertsantidepressive-likeeffectsand

    invivo «Антиоксидантная» активность в модели мыши после инсульта. «Биомед. .073.

    52. DiLorenzo, A.; Nabavi, SF; Sureda, A.; Moghaddam, AH; Khanjani, S.; Arcidiaco, P.; Nabavi, SM; Daglia, M.Антидепрессивный-

    , как «эффекты» и «антиоксидантная» активность »зеленого чая и ГАМК в зеленом чае. «Мышиная модель» депрессии после инсульта. Мол.

    53. Wu, A.-G.; Teng, J.-F.; Wong, VK-W.; Zhou, X.-G.; Qiu, W.-Q. ; Tang, Y.; Wu, J.-M.; Xiong, R.; Pan, R.; Wang, Y.-L.; Etal.Novel

    стероидный сапонин, выделенный из TrilliumtschonoskiiMaxim., Проявляет антиоксидантный эффект за счет индукции аутофагии в клетках и

    Caenorhabditiselegans.Phytomedicine2019, 65, 153088, doi: 10.1016 / j.phymed.2019.153088.

    54. Chandler-Brown, D .; Choi, H.; Park, S.;  Окампо, BR; Chen, S.; Le, A .; Sutphin, GL; Shamieh, LS; Smith, ED; продлевает «продолжительность жизни» и индуцирует «осмотический» стресс-реакцию у людей с заболеванием Caenorhabditis.

    55. Wang, J.; Liu, Y.; Shen, H.; Li, H.; Wang, Z.; Chen, G.Nox2 иNox4 участвуют в индуцированном АФК нейронном апоптозе и мозге

    травмы во время реперфузии ишемии у крыс.ActaNeurochir.Suppl.2020, 127, 47–54, doi: 10.1007 / 978‐3‐030‐04615‐6_8.

    56. Fang, EF; Waltz, TB; Kassahun, H.; Lu, Q.; Kerr, JS; Morevati, M.; Fivenson, EM; Wollman, BN; Marosi, K.; Wilson, MA;

    et al.Tomatidine увеличивает продолжительность жизни и здоровье людей C. через индукцию митофагии через SKN-1 / Nrf2 pathway.Sci.

    Rep. 2017, 7, 46208, doi: 10.1038 / srep46208.

    57. Yu, H.-C.; Wu, J.; Zhang, H.-X .; Zhang, H.-S.; Qiao, T.-T.; Zhang, J.-X.; Zhang, G.-L.; Sui, J.; Li, L.-W.; Zhang, L.-R.; Etal.

    Антидепрессант «Подобная» и «антиоксидантная» эффективность «Campis» grandiflora »flower.J.Pharm.Pharmacol.2015, 67, 1705–1715, 

    doi: 10.1111 / jphp.12466. 

    58. Kim, D.-H.; Han, K.-M.; Chung, I.-S.; Kim, D.-K.; Kim, S. -H .; Kwon, B.-M.; Jeong, T.-S.; Park, M.-H.; Ahn, E.-M.; Baek, N. -I.

    Тритерпеноиды изцветкаCampisgrandifloraK.Schum. В качествеацил-КоА человека: ингибиторы холестерина ацилтрансферазы.Arch.

    Pharm.Res.2005, 28, 550–556, doi: 10.1007 / BF02977757.

    59. Jiang, H.; Zheng, G.; Lv, — J.; Для

    , индуцирующего нейронную дифференциацию.Evid.BasedComplement.Altern.Med.2016, 2016, 9634750, doi: 10.1155 / 2016 / 9634750.

    60. Bauer, R.; Pröbstle, A.; Lotter, H.; Wagner-Redecker, W.;Phytomedicine1996, 2, 305–308, doi: 10.1016 / S0944-7113 (96) 80073-0.

    61. Koul, B.; Taak, P.; Kumar, A.; Kumar, A.; Sanyal, I. GenusPsoralea: Areview oftraditionaland modernuse,

    phytochemistryandpharmacology.J. Ethnopharmacol.2019, 232, 201–226, doi: 10.1016 / j.jep.2018.11.036.

    62. Ruan, B.; Kong, L.-Y.; Takaya , Y.; Niwa, M.Studies onchemicalsconsplities ofPsoraleacorylifoliaL.J.AsianNat.Prod.Res.

    2007, 9, 41–44, doi: 10.1080 / 10286020500289618.

    63. Rosa, A.; Maccioni, D.; Maxia, A., Жирная кислота и триацилглицерин в составе семян семян и масел перикарпия. «Лечебный» урожай

    Withania «somnifera» (L.) «Дунал» выращивается на «Сардинии» (Италия). .

    64. Triantaphyllou, K.; Blekas, G.; Boskou, D. Антиоксидантные свойства водных экстрактов, полученных из трав этого вида

    Lamiaceae.Int.J.FoodSci.Nutr.2001, 52, 313–317, doi: 10.1080 / 09637480120057512.

    65. González ‐ Burgos, E.; Liaudanskas, M.; Viškelis, J.; Vikas, V.; Janulis, V.; Gólosmez ‐ Serranil. MPAntioxidantactivity,

    нейропротективных свойствиbioactiveconstoriesanalysis ofpolarityextracts fromEucalyptusglobulusleaves.J.

    FoodDrugAnal. 2018, 26, 1293–1302, doi: 10.1016 / j.jfda.2018.05.010.

    66. Altemimi, A.; Lakhssassi, N.; Baharlouei, A.;  Watson, DG; Lightfoot, DAPhytochemicals: Extraction, isolation, and

    идентификация биоактивных соединений из экстрактов растений.Plants2017, 6, 42, doi: 10.3390 / Plants6040042.

    Как повысить стрессоустойчивость

    Мнения, выраженные предпринимателями, участниками, являются их собственными.

    Запуск стартапа или малого бизнеса сопряжен со стрессами, которые требуют вашего внимания и истощают вашу энергию. Вы не можете полностью избавиться от стресса, поэтому вместо этого стремитесь повысить свою способность справляться со стрессом, что поможет вам с уверенностью справляться с более серьезными проблемами.

    Shutterstock

    У каждого человека есть оптимальный уровень стресса, который ему действительно нравится.Это делает работу увлекательной и увлекательной. Но когда мы проходим этот уровень, стресс становится пагубным, приводя к физическим болям и неправильным решениям.

    Уровень стресса, с которым вы можете справиться, не перегружая себя, — это то, что психологи называют стрессоустойчивостью. «Это способность справиться со стрессом или невзгодами и прийти в норму», — говорит Дэвид Баллард, психолог и глава Центра организационного совершенства Американской психологической ассоциации. Чем выше ваша стрессоустойчивость, тем легче вам будет находить бодрящие ежедневные стрессы.

    Баллард рекомендует следующие три стратегии, которые помогут вам повысить стрессоустойчивость:

    1. Найдите возможность в испытании.
    Стресс делает нас целеустремленными, поэтому негативы кажутся огромными, а позитивы остаются незамеченными. «Стресс предназначен для того, чтобы сосредоточить наше внимание или энергию, чтобы мы могли преодолеть угрозу», — говорит Баллард.

    Такая интенсивность работает для срочных и важных задач, но большинство факторов стресса проявляются не так быстро. В таких случаях сосредоточение исключительно на проблеме непреодолимо и непродуктивно.Вместо этого ищите новые возможности, которые создает этот фактор стресса, например способы повысить эффективность вашей компании или улучшить коммуникацию.

    Обретение серебряной подкладки помогает сохранить надежду. «Люди, которым трудно прийти в норму, часто считают эту задачу совершенно непреодолимой», — говорит Баллард. Оптимистичный настрой поможет вам с легкостью перенести гораздо больший стресс.

    Связано: Как справиться со стрессом неопределенности

    2. Посмотрите на картину в целом.
    Когда вы сталкиваетесь с одним стрессором за другим, постоянные требования могут заглушить высшую цель. Воспоминание о том, почему вы заботитесь о своей работе, создает буфер, который не дает вам перегрузить вас. «Важно сделать шаг назад и подумать о том, чего вы пытаетесь достичь», — говорит Баллард.

    Спросите, какой функции или цели служит этот конкретный фактор стресса? Как его решение поможет мне в достижении моей цели? Помещая стресс в контекст, вы восстанавливаете волю к упорству и делаете лучший выбор в отношении того, сколько времени и энергии посвятить проблеме.Возможно, он заслуживает меньшего внимания, чем вы уделяете ему сейчас.

    3. Время восстановления.
    Наше тело эволюционировало, чтобы переносить стресс короткими скачками; направить всю нашу энергию на угрозу, а затем снова расслабиться, когда она исчезнет. Перерывы между стрессорами позволяют нам восстановиться, но сегодня мало кто их принимает. «Многие рабочие места работают в состоянии хронического стресса», — говорит Баллард, из-за чего мы истощены и разорваны.

    Курение, употребление алкоголя, переедание, вызванное стрессом, или просмотр Интернета только усугубляют проблему.Эти действия снимают стресс, но не сбрасывают вашу систему. Чтобы расслабиться эффективно, попробуйте активные хобби, такие как спорт или волонтерская работа, расслабление без технологий, например медитация, йога или чтение, и спите не менее шести часов в сутки. Чем больше вы выбираете эти занятия, тем лучше вы справляетесь со стрессом.

    Связано: 5 способов остановить стресс до его начала

    .

    Написать ответ

    Ваш адрес email не будет опубликован.