Патернальная депривация это: НОУ ИНТУИТ | Лекция | Семья и родители как агенты социализации

Содержание

3.4. Патернальная депривация и ее последствия

Современные реалии отцовства во всем мире имеют две тенден­ции. С одной стороны в патриархальных культурах ценность отцовства традиционно высока, при этом отец имеет почти неограниченную власть в семье, таковыми, например, являются культуры некоторых стран Азии и Востока. С другой стороны, в современном западном обществе все четче проявляется тенденция к возрастанию внимания к отцовству и его роли в жизни ребенка (так называемое «ответственное отцовство»), однако даже в этих государствах вовлеченные отцы в силу различных обстоятельств не являются большинством, кроме того, в странах, проходящих через реформирование социальных и тендер­ных систем, находящихся между традиционным миропониманием и формированием более либерального общества, разрушение устоев и традиций приводит к уменьшению социального контроля и большей свободе самой личности по отношению к таким социальным явлени­ям, как, например, семья. В идеале большая свобода означает боль­шую ответственность личности по отношению к собственной жизни, своей семье и детям, что далеко не всегда происходит в реальности. В итоге — большая эмансипация и свобода женщин, включенность их в производственный процесс, приводящие в контексте семьи к проявлению конфликтов на почве лидерства; разграничение сексуаль­ности и репродукции; снижение возраста вступления в половую жизнь приводит к распространению практики воспитания ребенка одним родителем, которым в подавляющем большинстве случаев является мать. В нашей стране, поданным Е.П. Ильина, количество детей, растущих без отца, становится угрожающим (Ильин Е.П., 2002).

Различные социальные потрясения, такие, как войны и револю­ции, психогенные и природные катастрофы, межличностные кон­фликты и уголовные преступления, социально-психологическая не­зрелость родителей и болезни, лишают ребенка полноценного обще­ния и нормальных условий развития.

В первое время жизни чрезвычайно важна роль матери. Согласно К. Хорни (Хорни К., 1993), мать удовлетворяет первичные потребно­сти ребенка, ласкает его, стимулирует, общается с ним, дает ощуще­ние защищенности, эмоционального тепла и уюта. Отец выступает в качестве авторитетного социального образца, примера поведения, его наличие в семье придает ребенку уверенность и самостоятельность в принятии решений (Дружинин В.Н., 2006).

В раннем детстве мать удовлетворяет основные потребности ре­бенка, поэтому ее смерть или уход из семьи вызывает кризис доверия к окружающему миру, ощущение заброшенности, состояние тревоги. Однако огромная роль матери в развитии ребенка не уменьшает зна­чения влияния отца на развитие ребенка. Ранее психологи считали, что отсутствие отца в раннем детстве не так сильно сказывается на развитии ребенка, как отсутствие матери. На первый взгляд, послед­ствия, действительно, не столь трагичны, ведь эмоциональное обще­ние сохраняется. Однако без уравновешивающего влияния отца, без его общения с ребенком роль матери гипертрофируется. Ее влияние на психическое развитие ребенка становится непомерно большим, ребенок не видит другого варианта поведения, у него нет выбора приобщении.

Известно, что дети, лишившиеся одного или обоих родителей в результате распада семьи, медленнее развиваются, чаще болеют сома­тическими и психическими заболеваниями.

Считается, что дети разведенных родителей находятся в более благоприятной социально-психологической ситуации, чем дети ма­терей-одиночек или дети из тех семей, где умер один из родителей.

Хотя и в этом случае все определяется тем, когда произошел развод и сколько было при этом лет ребенку, а также тем, продолжают ли отец или мать участвовать в воспитании ребенка.

Дети из разведенных семей чаще оказываются нелюдимыми, боязливыми, они агрессивны и склонны к ссорам, неаккуратны и не­дисциплинированны, склонны «витать в облаках» и плохо учатся, они часто испытывают недоверие и страх по отношению к окружающим, поскольку у них нет психологической поддержки со стороны отца. От­мечаемая исследователями (Doherty W.J., 1993) склонность этих детей к дракам может быть компенсацией чувства неполноценности, а не­дисциплинированность выступает следствием потери авторитета, т.к. ребенок чаще всего остается с матерью после ухода отца из семьи.

Однако большинство исследователей проблем развода (Гурко Т.А., 2000; Дружинин В.Н., 2006; ОоЬеггуШ., 1993) отмечают, что решаю­щим является не факт юридического развода, а отчуждение родителей в семье друг от друга — аффективный развод, конфликты, ссоры ро­дителей, взаимные оскорбления и попытки привлечь ребенка на свою сторону. Психологические исследования убедительно показали, что семьи, где сохраняются лишь формальные, юридические атрибуты брака, так же влияют на психику ребенка, как и условия в семье, где произошел юридический развод (Дружинин В.Н., 2006).

Более того, в случае аффективного развода ребенок оказывается в более неблагоприятной ситуации. Следствием являются побеги детей из семьи, бродяжничество, правонарушения, неврозы, самоубий­ства. В семьях, где есть отец-алкоголик, психологическая ситуация, в которой оказывается ребенок, не отличается от семьи, где отца нет: воспитательной функции отец не выполняет, добавляются лишь скан­далы, побои, экономические трудности. Но самой худшей ситуацией является семья, состоящая из матери-одиночки и ребенка, если он не­желанный. В этом случае, как отмечает В.Н. Дружинин, мать испыты­вает к такому ребенку двойственные чувства: с одной стороны, это ее ребенок и она — мать, с другой стороны, ребенок — помеха в ее жизни. Дети из таких семей хуже общаются со сверстниками, хуже успевают, они чаще имеют низкий статус в группе, не умеют преодолевать стрес­совые ситуации.

Таким образом, по мнению И. Лангмейера и 3. Матейчека (Лангмейер Й., Матейчек З., 1984), изучавших проблему психической депривации, отсутствие отца («патернальная депривация») является в такой же мере сложным по своим последствиям и влиянию на разви­тие неврозов и других отклонений в психическом и особенно социаль­ном развитии ребенка феноменом, как и внешне не более трагичное отсутствие матери.

Это касается многих детей, живущих со своими незамужними или по иным причинам одинокими матерями. Если нет ни вспомо­гательного, ни уравновешивающего влияния отца, то естественно, что значение личности матери становится намного большим, чем при нормальных обстоятельствах. А т.к. именно в случае одиноких матерей можно с достаточной степенью достоверности предположить боль­шее участие недостаточно уравновешенных личностей в воспитании ребенка, следует предполагать также угрозу повышенной опасности из-за скопления неблагоприятных факторов. Мать сильно зависит от ребенка, который заменяет для нее всех других, кто мог бы удовлет­ворять ее эмоциональную привязанность, таким образом, возникают условия для формирования невротического симбиоза матери и ребен­ка. По мере взросления ребенка отсутствие отца становится еще более заметным. Мальчик лишается образца мужского поведения, которое должен воспроизводить, а девочка не имеет перед собой образа пред­ставителя противоположного пола, поэтому ее контакты с мужчинами будут затруднены: она просто не будет знать, какого поведения можно ожидать от мужчины.

К этому следует добавить еще несколько важных обстоятельств: как показывает обычный опыт и как это было также доказано соци­ологическими исследованиями, функции отца в семье претерпевают сравнительно быстрые и серьезные изменения. В современном обще­стве — правда, неравномерно во всех слоях населения, однако все же заметно — отцы значительно больше, чем ранее, принимают участие в уходе за грудными детьми и их воспитании, причем часто возникает, сотрудничество между мужчиной и женщиной, что было несвойствен­но предыдущим поколениям. На фоне данной тенденции отсутствие отца проявляется более тяжело, чем в прошлом, когда забота о ребенке целиком сосредоточивалась на матери. Речь идет не только о физиче­ском труде и времени, которое затрачивается (в данном отношении помощь ныне оказывает современная техника), но, прежде всего, о психической нагрузке, если одинокая мать сравнивает свое рабочее положение с положением других женщин. Помощь, предоставляемая в данном отношении совместными интернатами для одиноких матерей с детьми, также не является вполне совершенной. Во-первых, здесь продолжает отсутствовать мужской элемент в воспитании, а во-вторых, взаимопомощь матерей в домашних работах и в воспитании приводит к ситуации «разделяющейся материнской заботы» со всеми трудностями и неясностями.

Еще одним важным моментом является отсутствие уверенности и устойчивости в социальном включении, т.к. профессия отца пред­ставляет обычно реальную и символическую базу экономическог обеспечения семьи, а ее основательность является порукой уверенности. В то время как мать предоставляет ребенку возможность ощутить интимность человеческой любви, отец проторяет ребенку путь и от­ношение к человеческому обществу. У матери-одиночки, загруженной экономическими заботами, не остается времени на то, чтобы общаться с ребенком, она теряет первоначальный интерес к ребенку, возникает отчуждение матери и ребенка, приходящие на смену первичному сим­биозу. По словам М.О. Шварца, мать нас приводит к человеку, а отец — к людям (Лангмейер И., Матейчек 3., 1984). Иным образом это вы­ражает А. Гремс (Grams А., 1970): «Материнская забота обеспечивает возможность принимания, отцовская же забота побуждает к отдаче. И то, и другое необходимо для развития личности, и то, и другое долж­но здесь присутствовать, если мы хотим когда-нибудь приблизиться к границе человеческих возможностей». Кроме того, отец представляет для детей наиболее естественный источник познаний о мире, труде, технике, способствуя как их ориентировке на будущую профессию, так и созданию социально полезных целей и идеалов.

Если место отца занимает в семье отчим, а иногда дедушка, де-привационные влияния подавляются, зато здесь более благоприятная почва для развития различных конфликтов, причем невротические расстройства, возникающие на данной основе, являются, по мнению И. Лангмейера и 3. Матейчека, весьма частыми.

Между тем исследования детей, растущих без отца (Cherlin A.J., 1992; Furstenberg F.S., Cherlin A.J., 1991; Ноrst P., 1999; Vogt G.М.; Sirridge S.T., 1993), показали, что такие дети менее успешны в решении конфликтных ситуаций, в решении когнитивных задач, мальчики имеют определенные сложности с половой идентификацией, вызван­ные сложностью разграничения тендерных ролей. Изучение репрезен­тативной выборки взрослых из крупных городов США показало, что люди, выросшие в полных семьях, чаще получают высшее образование, более независимы и ведут более здоровый образ жизни (Nord C.W., Brimhaii D.A., West J., 1997).

Ребенок, растущий без отца, лишен таким образом важного муж­ского примера, который особенно значителен для мальчиков старше­го возраста в регуляции их поведения, но важен также и для девочек в качестве модели их будущего партнера. Ребенок без отца страдает также, как правило, от недостатка авторитета, дисциплины и порядка, которые в нормальных условиях олицетворяются отцом.

Кроме того, ребенок, растущий главным образом без отцовского авторитета, бывает часто недисциплинированным, несоциальньм, агрессивным в отношении взрослых и детей. В обследовании, прове­денном И. Лангмейером и 3. Матейчеком, 163 мальчиков из детских учреждений с повышенной воспитательной заботой в среднечешской области за 1960-1961 гг., было установлено, что 41% из них росли без отца (Лангмейер И., Матейчек 3., 1984).

Если отца нет, то это имеет еще другое косвенное депривационное влияние. Дело в том, что если матери одной приходится нести все экономические и воспитательные заботы о семье, то она, как правило, бывает настолько занятой, что у нее не остается для ребенка времени и у нее ослабевает даже интерес к нему. Ребенок в таком случае предо­ставлен сам себе большую часть дня, может начать бродяжничать, у него больше возможностей для правонарушения. Помимо физическо­го отсутствия, значительным фактором в развитии ребенка по направлению к асоциальности может явиться также несоответствующая роль, которую играет отец в семейном сообществе.

Отец предоставляет модель мужественности ребенку, особенно мальчику. П.П. Блонский полагал, что без такой модели демонстри­ровать «мужское поведение» достаточно сложно, ведь, начиная с детского сада, где все воспитатели — женщины, потом в школе и вузе, мальчик (юноша) встречает модель женского поведения в десятки раз чаще, чем мужского. Если у него нет примера такого поведения перед глазами, для того чтобы выстроить собственное поведение, он либо берет за образец поведение женщины — матери, бабушки, учительни­цы — и вырастает мягким и чувствительным, что считается «немужественным». Или считает, что поведение мужчины противоположно поведению женщины: если женщина выполняет социальные нормы, вежлива, внимательна, избегает вредных привычек, то мужчина должен поступать наоборот. Такое понимание «мужского поведения» может привести к злоупотреблению алкоголем и наркотиками, и даже к правонарушениям. В.Н. Дружинин (Дружинин В.Н., 2006) отмечает, что полоролевая социализация мальчиков более сложная, чем социализация девочек, социальных требований к мужчине в два раза больше, чем женщине, следовательно, стандарты мужского поведения значительно жестче стандартов поведения женского. То есть значимость образца мужского поведения — будь то отец, дедушка или тренер спортивной секции — неоспорима.

Статистические данные США (U.S. Bureau of the Census 1994, 1995,1996) подтверждают, что проблема безотцовщины все возрастает и среди молодого поколения эта проблема стоит острее, чем раньше. Безотцовщина больше всего связана с рождением детей вне брака и с разводами. Эти причины ведут к физическому отсутствию отца в семье. До 39% детей младше 18 лет живут отдельно от своих отцов. Влияние разведенных отцов на своих детей невелико. Исследование 1991 г. показало, что половина детей после развода родителей за последний год ни разу не встречались со своими отцами, каждый пятый не виделся с отцом уже пять лет. Ф. Фестенберг обнаружил, что более половины детей, чьи родители развелись, никогда не бывали в доме отца. Отцы могут отсутствовать, если находятся в местах лишения свободы. Бы­вает и так, что отцы живут с семьей, но эмоционально и физически отсутствуют. В полной семье 25% детей напрямую взаимодействуют со своими отцами хотя бы час в день. Остальные проводят со свои­ми отцами менее 30 минут в день. Почти 20% старшеклассников не разговаривают со своими родителями больше 10 минут подряд уже в течение месяца (ЬатЬ М.Е., Ьеуепйескег В., 8спо1тепсп А., 1998). Это не может не сказаться на их развитии.

Множество качественных исследований констатировало, что матери и бабушки часто препятствуют присутствию отца в жизни ребенка, и что современная практика социальных институтов создает барьеры в этом, особенно для молодых отцов (Кон И.С., 1989). Многие из этих отцов прекращают участвовать в жизни ребенка, и многие, кто пробует остаться вовлеченными в жизнь своего ребенка, сталкиваются с сильным социальным противодействием.

Между тем существование сильного отрицательного влияния внебрачного отцовства на отношения отца и ребенка доказано много­численными исследованиями. В случае, когда родители неженаты, но сожительствуют, отцы намного больше присутствуют в жизни своих детей. Однако исследования указывают, что сожительствующие пары имеют высокий процент разрыва, и те, кто впоследствии женятся, имеют более высокие проценты разводов (Bumpass L.L., Sweet J.А., Cherlin A.,1991).

Отрицательное влияние развода на качество отношений отца и ребенка также весьма сильное. Большая часть исследования вовлечен­ности отцов в жизнь их детей после развода сосредоточилась на вы­явлении ее влияния на состояние ребенка. Множество ученых обнару­жили, что, хотя, в принципе, контакт с обоими родителями желателен, польза вовлеченности отца для ребенка может быть уменьшена, если существует существенный конфликт между родителями. Таким обра­зом, когда между родителями серьезный конфликт, частые контакты с отцом могут создать дополнительное напряжение для ребенка, кото­рое нивелирует преимущества более частых встреч с отцом.

Вообще, в то время как более частые контакты с нерезидентным отцом коррелировали с лучшими показателями здоровья, судебные соглашения по посещениям были важным фактором уменьшения этих показателей.

В целом, по мнению Doherty (Doherty W.J., 1993), существует множество барьеров для присутствия отца в жизни ребенка, если он не живет с ним в одной семье. Однако один только статус живущего в семье отца, конечно, не может изменить ситуацию. Хотя существует недостаток исследований в этой области, по данным американских ис­следователей, матери, не живущие со своими детьми, более включены в жизнь своих детей. Например, больше таких матерей, чем отцов, жи­вут в том же городе, что и их дети, и имеют больше контактов с детьми, чем отцы в подобной ситуации (Amato,Rezac, 1994).

Таким образом, для того, чтобы ответственное, включенное от­цовство стало возможным массово, необходимы некоторые изменения общественного мнения, а также условия социально-политического характера, которые возможны только при сформированном пред­ставлении о незаменимости отцовской роли, важности отцовства для развития самого мужчины в общественном сознании, которое может быть обеспечено только своевременными и достоверными научными исследованиями феномена отцовства и его влияния на развитие лич­ности.

Социальная работа — тест 4

Главная / Гуманитарные и социальные науки / Социальная работа / Тест 4 Упражнение 1:
Номер 1
Причиной возникновения материнства у высших животных послужило

Ответ:

&nbsp(1) сокращение численности потомства&nbsp

&nbsp(2) появление орудий труда&nbsp

&nbsp(3) увеличение ареала обитания&nbsp

&nbsp(4) все перечисленное верно&nbsp


Номер 2
В какой из перечисленных ниже стран число внебрачных детей равно 1,1%?

Ответ:

&nbsp(1) в Японии&nbsp

&nbsp(2) в России&nbsp

&nbsp(3) в США&nbsp

&nbsp(4) в Великобритании&nbsp


Номер 3
Укажите показатель успешного воздействия родителей на детей

Ответ:

&nbsp(1) степень совпадения интересов родителей и детей&nbsp

&nbsp(2) степень безразличия родителей по отношению к детям&nbsp

&nbsp(3) уровень благосостояния семьи&nbsp

&nbsp(4) количество родителей, влияющих на воспитание и развитие детей (мать, отец, бабушка, дедушка, дяди, тети и т. д.)&nbsp


Упражнение 2:
Номер 1
Как называется семья, в которой родители живут в постоянной погоне за работой, зарплатой, экономическим и социальным престижем?

Ответ:

&nbsp(1) индивидуально-эгоистичной&nbsp

&nbsp(2) целеустремленной&nbsp

&nbsp(3) карьерной&nbsp

&nbsp(4) рабочей&nbsp


Номер 2
Каким фактором повторная детская социализация родителей в процессе воспитания своих детей отличается от исходной социализации?

Ответ:

&nbsp(1) контролем за поведением&nbsp

&nbsp(2) духовной ценностью&nbsp

&nbsp(3) своей осмысленностью&nbsp

&nbsp(4) все перечисленное верно&nbsp


Номер 3
К формам жестокого обращения с детьми относят

Ответ:

&nbsp(1) физическое насилие&nbsp

&nbsp(2) сексуальное насилие (развращение)&nbsp

&nbsp(3) психическое (эмоциональное) насилие&nbsp

&nbsp(4) все перечисленное верно&nbsp


Упражнение 3:
Номер 1
Родители-делинквенты — это

Ответ:

&nbsp(1) родители, уклоняющиеся от своих обязанностей по воспитанию и социализации детей&nbsp

&nbsp(2) авторитарные родители&nbsp

&nbsp(3) родители из неполных семей&nbsp

&nbsp(4) бабушки и дедушки, воспитывающие детей&nbsp


Номер 2
Патернальная депривация — это

Ответ:

&nbsp(1) отсутствие в семье одного из родителей&nbsp

&nbsp(2) отсутствие в семье детей&nbsp

&nbsp(3) отсутствие в семье бабушек и дедушек&nbsp

&nbsp(4) отсутствие в семье других родственников&nbsp


Упражнение 4:
Номер 1
Какое качество характера присуще детям, которые воспитывались при мужской депривации?

Ответ:

&nbsp(1) грубость&nbsp

&nbsp(2) невысокий уровень притязаний и мотивации достижения&nbsp

&nbsp(3) повышенная возбудимость и выше вредной нормы уровень тревожности&nbsp

&nbsp(4) все перечисленное верно&nbsp


Номер 2
Что такое "патернальная депривация"?

Ответ:

&nbsp(1) случай проживания родителей в гражданском браке&nbsp

&nbsp(2) многодетная семья&nbsp

&nbsp(3) отсутствие в семье одного из родителей&nbsp

&nbsp(4) полная семья&nbsp


Номер 3
Патернальная депривация

Ответ:

&nbsp(1) передается из поколения в поколение&nbsp

&nbsp(2) возникает случайно&nbsp

&nbsp(3) возникает в результате социальных потрясений&nbsp


Упражнение 5:
Номер 1
В каких ситуациях возникает родительская делинквентность?

Ответ:

&nbsp(1) ситуация, в которой родители исповедуют попустительский стиль воспитания, практически никак не вмешиваясь в жизнь своих детей&nbsp

&nbsp(2) ситуация, в которой родители ведут чрезмерную опеку над своими детьми, контролируют каждый шаг и действие ребенка&nbsp

&nbsp(3) ситуация, в которой родители ограничивают ребенка в выборе круга общения&nbsp

&nbsp(4) ситуация, в которой родители не могут достаточно обеспечить ребенка общением со сверстниками&nbsp


Номер 2
Детский сексуальный абьюз — это

Ответ:

&nbsp(1) использование родителем ребенка в качестве сексуального объекта&nbsp

&nbsp(2) гиперсексуальность современных подростков&nbsp

&nbsp(3) беспорядочные половые отношения в подростковой среде&nbsp

&nbsp(4) сексуальное влечение ребенка к одному из родителей&nbsp


Номер 3
К эмоциональному насилию относят

Ответ:

&nbsp(1) постоянную критику ребенка&nbsp

&nbsp(2) преднамеренную социальную изоляцию ребенка&nbsp

&nbsp(3) предъявление к ребенку чрезмерных требований&nbsp

&nbsp(4) все перечисленное верно&nbsp


Упражнение 6:
Номер 1
Переход от одного этапа жизненного цикла к другому нередко переживается как

Ответ:

&nbsp(1) экономический кризис&nbsp

&nbsp(2) психологический кризис&nbsp

&nbsp(3) социальный кризис&nbsp

&nbsp(4) кризис отношений&nbsp


Номер 2
Каким фактором повторная детская социализация родителей в процессе воспитания своих детей отличается от исходной социализации?

Ответ:

&nbsp(1) ценностями&nbsp

&nbsp(2) другим распределением ролей&nbsp

&nbsp(3) эмоциями&nbsp

&nbsp(4) все перечисленное верно&nbsp


Номер 3
Жертвами неудачных социализаторов становятся прежде всего

Ответ:

&nbsp(1) собственные дети&nbsp

&nbsp(2) сами социолизаторы&nbsp

&nbsp(3) общественные организации&nbsp

&nbsp(4) социальные институты&nbsp


Упражнение 7:
Номер 1
В нестабильных парах супруги характеризуются

Ответ:

&nbsp(1) высоким уровнем социальной адаптации&nbsp

&nbsp(2) острым ощущением своей неудачливости&nbsp

&nbsp(3) открытостью в общении&nbsp

&nbsp(4) успешностью в карьере&nbsp


Номер 2
В благополучных семьях родители передают детям

Ответ:

&nbsp(1) духовные ценности&nbsp

&nbsp(2) материальные блага&nbsp

&nbsp(3) особенности темперамента&nbsp

&nbsp(4) все перечисленное верно&nbsp


Номер 3
Что такое радикальный гедонизм?

Ответ:

&nbsp(1) стремление к достижению высокого социального статуса&nbsp

&nbsp(2) родительская агрессия по отношению к детям&nbsp

&nbsp(3) отрицание семейных ценностей&nbsp

&nbsp(4) стремление к удовольствиям и наслаждениям как высшей цели жизни&nbsp


Упражнение 8:
Номер 1
Какой критерий является показателем успешной семейной жизни и эффективного выполнения функций социализации?

Ответ:

&nbsp(1) родители стараются сохранить прочный брак до момента взросления детей&nbsp

&nbsp(2) родители не передают детям негативные модели поведения&nbsp

&nbsp(3) родители стремятся дать детям наилучшее воспитание и образование&nbsp

&nbsp(4) все перечисленное верно&nbsp


Номер 2
Укажите высказывание, относящееся к понятию "авторитарная личность"

Ответ:

&nbsp(1) результат воспитания и развития в условиях любви, заботы, в тихой и спокойной атмосфере&nbsp

&nbsp(2) результат неудачного воспитания и взросления в ненормальной социальной среде&nbsp

&nbsp(3) результат воспитания в неполной семье&nbsp

&nbsp(4) результат воспитания с излишней опекой&nbsp


Номер 3
Как показывают результаты опросов, проведенных в разных странах, подростки мечтают о таких родителях, которые

Ответ:

&nbsp(1) готовы помочь, когда нужно&nbsp

&nbsp(2) выказывают свое одобрение&nbsp

&nbsp(3) стараются понять&nbsp

&nbsp(4) все перечисленное верно&nbsp


Упражнение 9:
Номер 1
Какова продолжительность родительско-детской социализации?

Ответ:

&nbsp(1) с момента рождения ребенка до достижения его совершеннолетия&nbsp

&nbsp(2) с момента рождения первого ребенка до момента смерти последнего родителя&nbsp

&nbsp(3) с момента рождения ребенка до рождения у него своих детей&nbsp

&nbsp(4) с момента рождения ребенка до его вступления в брак&nbsp


Номер 2
Сколько типов агентов социализации выделяют в современной семье?

Ответ:

&nbsp(1) три&nbsp

&nbsp(2) пять&nbsp

&nbsp(3) два&nbsp

&nbsp(4) семь&nbsp


Номер 3
Социализация сиблингов — это

Ответ:

&nbsp(1) супружеская социализация&nbsp

&nbsp(2) родительско-детская социализация&nbsp

&nbsp(3) детско-родительская социализация&nbsp

&nbsp(4) отношения между братьями и сестрами&nbsp


Упражнение 10:
Номер 1
Что такое отцовство?

Ответ:

&nbsp(1) инстинктивно приобретенное качество&nbsp

&nbsp(2) биологически приобретенное качество&nbsp

&nbsp(3) социально приобретенное качество&nbsp

&nbsp(4) все перечисленное верно&nbsp


Номер 2
Чем беднее живут люди и чем ниже экономическая ступенька, на которой стоит общество, тем

Ответ:

&nbsp(1) больше рождается детей и слабее за ними уход&nbsp

&nbsp(2) меньше рождается детей и слабее за ними уход&nbsp

&nbsp(3) больше рождается детей и сильнее за ними уход&nbsp

&nbsp(4) меньше рождается детей и сильнее за ними уход&nbsp


Номер 3
Низшие животные выживают за счет

Ответ:

&nbsp(1) короткого периода детства&nbsp

&nbsp(2) быстрого размножения&nbsp

&nbsp(3) отсутствия материнского инстинкта&nbsp

&nbsp(4) отсутствия ухода за потомством&nbsp


«Патернальная депривация и ее последствия», Разное

По мнению И. Лангмейера и 3. Матейчека, феномен «патернальной депривации» (отсутствие отца) в такой же мере сложен, но своим последствиям, как и внешне более трагичное отсутствие матери[1]. Исследования детей, растущих без отца, показали, что они менее успешны в разрешении конфликтных ситуаций, в решении когнитивных задач, имеют сложности с полоролевой идентификацией, дисциплиной (Cherlin, 1992; Furstenberg, Cherlin, 1991; Horst, 1999). Если матери приходится выполнять все экономические и воспитательные функции в семье одной, у нее не остается свободного времени и даже ослабевает интерес к ребенку, который оказывается предоставлен сам себе. Без уравновешивающего влияния отца, его общения с ребенком роль матери часто гипертрофируется. Однако появившиеся во второй половине XX в. исследования последствий патернальной депривации при всей их ценности и необходимости не были уравновешены исследованиями детей, растущих без отца, но не проявляющих каких-либо трудностей развития (такие случаи также многочисленны).

Последствия и механизмы патернальной депривации могут быть рассмотрены с точки зрения разных теоретических моделей и различного понимания роли отца в культуре. Для патриархального или гендерно ориентированного общества отсутствие отца в семье как носителя силы и «мужской» модели поведения однозначно патологизирует ребенка. Особенно уязвимы к патернальной депривации, рассматриваемой в таком контексте, мальчики. Также в условиях ценностей социальных достижений и материального достатка отсутствие отца рассматривается как существенное условие снижения социально-экономического уровня, престижа семьи и, в частности, возможностей ребенка.

В условиях современного общества и семьи последствия патернальной депривации все больше рассматриваются исследователями в контексте семейной динамики и осмысливаются с точки зрения роли отца в базовом эмоциональном треугольнике (М. Боуэн). Речь идет о развивающей функции триады и отца как ее необходимой составляющей на определенных этапах взросления ребенка. Невозможность для ребенка быть включенным в отношения родителей, необходимость справляться со своей исключенностыо из них, наблюдать и моделировать их, снижение абсолюта привязанности к одному объекту (чаще к матери), знакомство с различиями в поведении и коммуникации разных людей, с относительностью как когнитивным феноменом — все это часто связывается с присутствием в семейной системе отца.

При этом стоит понимать, что данную функцию выполняет не столько физическое присутствие отца независимо от его характеристик в восприятии ребенка, сколько позитивные черты образа отца в восприятии матери, транслируемого ребенку. Например, если в образе отца есть позитивная составляющая, то независимо от его наличия в семье характеристики маскулинности иодроегка-мальчика не меняются. Снижению уровня маскулинности у мальчиков способствует как негативный, так и недостаточно дифференцированный образ отца[2].

  • [1] Лангмейер ИМатейчек 3. Психическая депривация в детском возрасте.
  • [2] Калина О. Г., Холмогорова Л. Б. Роль отца в психическом развитии ребенка.

Депривация — что это такое? Определение, виды, последствия

Психологические проблемы часто вызывают соматические заболевания. Одна из таких проблем называется «депривация». Депривация — что это простыми словами, объясняет перевод термина с латыни.

Депривация в психологии имеет множество видов и проявлений, но всё это объединяет один признак, который вызвал проблему.

Краткое содержание:

Что такое депривация

Термин «deprivatio» – означает лишение. Лишившись чего-либо, человек начинает страдать, испытывать нехватку утраченного. В психологии это состояние имеет множество проявлений. Объяснить состояние депривация — что это простыми словами, несложно. Каждый человек в течение свой жизни сталкивается с таким самочувствием. Некоторые со временем справляются с душевным разладом, иным необходима помощь.

Депривация — это в психологии означает состояние человека, который длительное время не может удовлетворить свои базовые жизненные потребности, и его психо-эмоциональную реакцию на это.

Депривационное состояние может привести к ряду соматических заболеваний и разрушению личности. Важно разобрать, насколько сильно депривация влияет на личность, и вовремя начать лечение.

Виды депривации в психологии

Депривация и её виды имеют множество обличий. Острая реакция на лишение в каждой конкретной ситуации проявляется по-своему. В отличие от фрустрации, выявить депривацию не всегда просто. Иногда человек не осознаёт, что именно вызвало его страдания, но эти страдания настолько сильны, что вызывают суицидальные мысли.

Понятие и виды депривации можно разделить на несколько групп. Каждый вид депривации по-своему влияет на человека, и сложнее всего дело обстоит с детьми. Дети уязвимы и потребностей у них много. Именно в детстве закладываются жизненные установки, и неправильные ориентиры непременно проявятся во взрослой жизни.

Гендерная депривация

В каждом обществе существуют свои правила и гендерные стереотипы, с которыми был знаком каждый. Мужчины должны быть высокими, сильными, ответственными и успешными. Женщины обязаны быть красивыми, с хорошей фигурой. Социальные сети, кинематограф и модные журналы установили стандарты, что считается красивым. Соответствовать этим стандартам невозможно, и люди с низкой самооценкой испытывают депривацию из-за собственной «неполноценности».

Второй подвид относится к социальной роли людей. Есть типично мужские профессии, и типично женские. Женщина-дальнобойщик или мужчина-воспитатель детского сада, вызывают недоумение в обществе, или даже осуждение.

Правила гендерных стереотипов распространяются на многие сферы жизни, и оказывают давление на индивидуумов. Некоторые легко перешагивают через стереотипы и даже наслаждаются своей непохожестью на большинство. Других же очень тяготит невозможность соответствовать тем устоям, которые сформировались в обществе.

У детей гендерная депривация несколько иная. Нередко родители хотят ребёнка определённого пола, и разочаровываются, если их ожидания не оправдываются. В стремлениях исправить этот «недостаток», родители всё же воспитывают ребёнка так, как бы они воспитывали малыша противоположного пола. Это приводит к нарушению гендерной самоидентификации, и в более взрослом возрасте может стать причиной смены ориентации.


Яркий пример: британская актриса и продюсер Наоми Уоттс со свои сыном

Двигательная депривация

Двигательная депривация — это невозможность осуществлять какие-либо движения. Причиной, может быть, болезнь или травмы, повлёкшие инвалидность. Люди, лишённые возможности выполнять привычные движения, вскоре впадают в депрессию или становятся агрессивными.

Самая тяжёлая депривация бывает у детей. Двигательная депривация у детей может привести к умственной отсталости, и ко многим соматическим недугам.

Чаще всего двигательная депривация возникает у детей из приютов, которых оставили сразу после рождения. Детей нередко туго пеленают, не дают развивающих игрушек, и никак не поощряют желание у детей переворачиваться, сидеть, стоять или бегать. В нормальных условиях тренировка мышц стимулирует развитие всех органов чувств и эмоций. При ограничении движений страдает развитие речевого аппарата и система познавания мира. Даже если ребёнка усыновили в годовалом возрасте заботливые родители, исправить ущерб, который был нанесён на первом году жизни очень сложно.

Порой родители в стремлении уберечь своё чадо, запрещают ему бегать, прыгать, лазить по деревьям и гневные окрики со временем вызывают у ребёнка чувство тревожности. Эта тревожность может привести к заиканию, энурезу или замкнутости.

Депривация сна

Депривация сна — что это простыми словами, и чем она опасна? Во сне эндокринная система человека вырабатывает особые гормоны – катехоламины, которые отвечают за эмоциональное состояние человека. У большинства людей в жизни бывали случаи, когда приходилось не спать сутки, или больше. Если это единичный случай, большой беды не будет.

Настроение поднимется тут же, как только человек хорошенько выспится. Гораздо опасней хроническая депривация сна. Постоянный недосып нарушает работу эндокринной системы, обмен веществ замедляется, и возникают головные боли. Появляется рассеянность, заторможенность и хроническая усталость.В тяжёлых случаях могут возникнуть галлюцинации и помутнение рассудка.

Когнитивная депривация

Когнитивная депривация — это невозможность получать правдивую информацию о чём-либо. Отсутствие этой информации приводит к придумыванию собственных версий событий, которые одна другой страшнее.

Примером когнитивной депривации может стать человек, на длительный срок, уехавший из дома. Вахтовики, дальнобойщики и им подобные не уверенны, что дома всё хорошо.

Родители могут серьёзно болеть, но скрыть это. Жена может изменять с соседом, и эти мысли вызывают тревожное расстройство. Неуместные шутки друзей могут вызвать панику или агрессию. При длительной когнитивной депривации человек всё больше начинает верить в собственную придуманную версию, и переубедить его в обратном, возможности нет.

Профессиональная депривация

Профессиональная депривация часто встречается у студентов. Нередко родители сами выбирают профессию для своего ребёнка, абсолютно не учитывая его собственные пожелания. Невозможность работать в той сфере, в которой хочется, приводит к профессиональной депривации. Студенты теряют интерес к учёбе, и чаще всего бросают вуз.

Нередко от профессиональной депривации страдают люди, которые не могут взобраться по карьерной лестнице вверх. Впрочем, они ничего не делают для этого, считая для себя невозможным получить желаемую должность.

Психологическая депривация

Психологическая депривация — это общий термин, и он охватывает многие сферы. Простыми словами – это невозможность получить то, что жизненно необходимо. Отсутствие ласки родителей, любовь партнёра, и неспособность изменить это, называется психологической депривацией.

Пережив смерть близкого человека, человек испытывает горе, отчаяние и остро переживает событие, но вскоре боль притупляется. При психологической депривации человек постоянно испытывает это чувство безысходности и страдания.

Патернальная депривация

Патернальная депривация возникает у детей из неполных семей. При разводе ребёнок чаще всего остаётся с матерью, и это несколько помогает малышу пережить стресс. Однако, для полноценного развития, ребёнку нужен и отцовский пример и отцовское влияние. Нередко отцы в полных семьях самоустраняются от воспитания детей, считая это исключительно женской обязанностью.

Особенно остро переживают отсутствие отца мальчики. Для них отец всегда является примером для подражания, и отсутствие этого примера не позволяет парням сформировать представление о роли отца в семье. Во взрослой жизни такой мальчик станет либо зависимым от жены, либо по примеру отца, самоустранится от собственных детей.

Можно сгладить патернальную депривацию, если роль отца исполняет другой мужчина. Дедушка, брат или дядя, вполне могут стать для ребёнка тем самым отцом, который им необходим.

Пищевая депривация

Пищевая депривация — это по сути, голодание. В случаях, когда люди сознательно практикуют лечебное голодание – особых проблем не наблюдается. Насильственная пищевая депривация возникает в случаях, когда человек по не зависящим от него причинам не может получать пищу. Примером можно назвать людей, оказавшихся на необитаемом острове в результате катастрофы.

Все мысли человека направлены на поиск пропитания, все другие чувства притупляются. С маниакальным упорством человек начинает искать пропитание, и со временем, голод может привести к жестокости, к помутнению рассудка и смерти от истощения.

Сенсорная депривация

Сенсорная депривация — это отсутствие слуховых, зрительных или тактильных ощущений. Объятия, рукопожатия, нежные слова и острый дефицит этих чувств, могут привести к затяжной депрессии. Примером может послужить девушка, которую в детстве недолюбили, и она ищет эту любовь, прыгая из койки в койку. Такая замена не помогает, но человеку нужно хоть немного ласки и внимания.

Зрительная депривация встречается у людей, внезапно потерявших зрение. Отсутствие зрения активирует все остальные чувства и вызывает нервное возбуждение. Некоторые нетрадиционные практики используют методики зрительной депривации для лечения или расслабления. В этом случае временная «слепота» действительно оказывает благое действие на организм, но при потере зрения, наблюдается обратный эффект.

Социальная депривация

Социальная депривация — это невозможность находится в обществе и причин на то множество. Ярким примером могут стать люди, находящиеся в местах лишения свободы. Вырванные из социума заключённые нередко проявляют агрессию, что приводит лишь к увеличению срока. Длительное заключение в одиночной камере часто приводит к суициду.

Депривация социальная бывает и вполне мирная. Выйдя на пенсию, люди нередко оказываются в вакууме. Они не могут выполнять в социуме ту роль, что прежде, и это вызывает у них страдания. Чувство ненужности и отчаяние гложет их, обостряя все хронические заболевания.

Эмоциональная депривация

Эмоциональная депривация — это одна из разновидностей депривации психологической. Часто она идёт в ногу с материнской, сенсорной, когнитивной, и другими видами депривации. Каждому человеку нужно видеть улыбки, получать похвалы, и он учится реагировать ответной улыбкой и комплиментом. Не получивший в детстве достаточно положительных эмоций человек, становится эмоционально холодным. Он не умеет проявлять своих чувств, и не умеет принимать их. Однако, под маской ледяного спокойствия бушует ураган и потребность в эмоциях.

Симптомы депривации

Не всегда можно распознать признаки депривации и точно сказать, что именно это источник проблем. Одним из основных признаков является агрессивное поведение. Испытывая длительную депривацию, человек может направить свою агрессию на себя, или на окружающих.

Направленная на себя агрессия выражается в самоповреждениях или суицидальных наклонностях. Нередко, стремясь заглушить боль, человек начинает курить, принимать алкоголь или наркотики. Это на время помогает, но на фоне такого нездорового образа жизни развиваются соматические недуги.

Вторым симптомом может стать замкнутость. Человек закрывается от мира и пытается себя убедить, что ему и так хорошо. В зависимости от характера самого человека, его симптомы могут быть в разной степени выражены.

У детей может наблюдаться агрессивное поведение, бессонница, или отсутствие аппетита. Нередко встречается энурез, неспособность усвоить нужную информацию или гиперактивность.

Причины возникновения депривации

Большинство психологических проблем уходят корнями в детство. Депривация, причины её возникновения, также, чаще всего возникают в детстве. Каждому ребёнку необходима любовь родителей, дружба с ровесниками, и возможность удовлетворять свои базовые потребности. Невозможность удовлетворить жизненно необходимые потребности приводит к внутреннему опустошению и страданиям. Ребёнок крайне уязвим и зависим от взрослых, что делает его крайне уязвимым.

Возможные последствия депривации

Последствия депривации у детей порой несут угрозу для самого человека и для общества. Согласно исследованиям, абсолютно все убийцы-маньяки, педофилы, садисты и т. д., в детстве испытывали депривацию.

Это не означает, что все недолюбленные дети станут маньяками, но у таких детей часто наблюдается искажение нравственности, отсутствие эмпатии и банальная неспособность влиться в социум. У детей множество потребностей, и невозможность удовлетворить какую-либо из них, может вызвать отставание в физическом и умственном развитии. Исправить последствия детской депривации крайне сложно, и человек всю свою жизнь несёт этот груз.

Последствия депривации у взрослых порой исправить легче. Утратив что-то нужное, взрослый человек может самостоятельно попытаться найти выход и вернуть себе душевную гармонию. При профессиональной депривации человек способен сменить свой род деятельности на желаемый, и тут нужно только сила воли и твёрдые убеждения.

Пенсионеры, оказавшись вне социума, всегда могут найти сообщества по интересам и выйти из вакуума. Взрослые способны мириться с отсутствием определённых возможностей, и они могут заменять их другими. Лежачий инвалид вполне может заняться писательством, а недостаток сенсорных ощущений лечится новыми романтическими отношениями.

На сегодняшний день разработано множество методик, позволяющих выявить и исправить депривацию. Техника реабилитации зависит от разновидности депривации и степени её запущенности. Очень важно вовремя осознать проблему и не затягивать с её решением.

По мере взросления негативные эмоции закрепляются и становятся частью характера, который исправить сложно. Сейчас в детском саду и в каждой школе работает психолог. В случае выявления депривации у ребёнка родителям необходимо прислушаться к рекомендациям специалиста и начать лечение. Это поможет избавить ребёнка от многих проблем во взрослой жизни.

Об авторе: Привет! Я — Каролина Кораблёва. Живу в Подмосковье, в городе Одинцово. Люблю жизнь и людей. Стараюсь быть реалистом и оптимистом по жизни.
В людях ценю умение себя вести. Увлекаюсь психологией, в частности — конфликтологией. Закончила РГСУ, факультет «Психология труда и специальная психология».

Лангмейер К., Матейчик З. Психическая депривация в детском возрасте.

«Психическая депривация является психическим состоянием, возникшим в результате таких жизненных ситуаций, где субъекту не предоставляется возможности для удовлетворения некоторых его основных (жизненных) психических потребностей в достаточной мере и в течение достаточно длительного времени».

Причины появления депривации:

-изоляция («волчьи» дети — крайняя форма)

-сепарация (прекращение уже создавшейся связи между ребенком и его социальной средой. Пр: помещение ребенка в дет дом)

-госпитализация (это является наиболее частой ситуацией, при которой развивается дальнейшая сепарация ребенка от семьи, может представить опасность для здорового психического развития ребенка )

-депривация в семье (две группы:

во-первых, когда по внешним причинам в семье царит недостаток социально-эмоциональных стимулов. Пр: неполные семьи, семьи где родители подавляющую часть времени проводят вне дома, или же экономическое и культурное состояние семьи настолько низко что у ребенка отсутствует стимуляция к развитию.

Во-вторых: данные стимулы в семье объективно и имеются, но для ребенка они недоступны, т. к. у лиц воспитывающих его имеется внутренний психический барьер. Такое возможно в полных семьях, с хорошим социальным и культурным положением, однако родители совершенно безразличны к ребенку, у них нет с ним эмоциональной связи, присутствует только механическое обращение с ребенком, т. е. основной уход, без дополнительного внимания)

-депривация в семье по внешним причинам (пр: смерть одного из родителей или уход из семьи, наиболее опасная форма, если уходит или погибает мать «материнская депривация», уход или смерть отца менее болезненно воспринимается ребенком — «патернальная депривация», еще одной причиной депривации может служить алкоголизм одного из взрослых (или обоих сразу), т. е. физически родитель присутствует в семье, но участия в жизни ребенка не принимает, или принимает искаженно, наиболее распространена «патернальная депривация» по причине алкоголизма)

-депривация в семье по психологическим причинам (а)эмоциональная незрелость характера — неспособность установить с ребенком тесную эмоциональную связь имеет нередко причину в незрелости чувств и характера матери, в неуравновешенности матери или любого лица на ее месте.

б)невротические и психические расстройства — С точки зрения депривации наиболее серьезными являются депрессивные состояния, при которых мать совершенно отходит от ребенка, оставляя его проявления без отклика Однако опасны и патологически неуравновешенные позиции родителей, колеблющиеся между равнодушием и проявлениями враждебности, т. е. родителей, у которых отвержение ребенка переходит прямо в жестокость.

в) умственная ретардация и дефекты органов чувств у родителей — односторонне неудовлетворительной стимуляции представляет ситуация матери с хорошим эмоциональным отношением к ребенку, но лишенной способности обеспечивать его стимулами интеллектуального характера. Здесь могла бы идти речь о слабоумной матери, о глухонемой или всего лишь просто неграмотной.

г) нежеланные дети — менее успешны в учебе, менее адаптированны к социальной среде)

 депривация в широкой общественной среде (из-за недостатков внешних стимулов, но при наличии благоприятной обстановки в семье, пр: недостаток общения со сверстниками а) Сам ребенок из-за какого-либо тяжелого дефекта органа чувств, двигательного или психического дефекта не может полностью включиться в общество вне собственной семьи б) семья сама изолирует ребенка от окружающей среды (пр: семьи попавшие под влияние сект) в) семья социально-изолирована как целое (проживание в отдаленных районах, или эмигранты)

 экстремальные жизненные ситуации (Помимо депривационных факторов, каковыми являются временная изоляция, а также сепарация ребенка от семьи, здесь, конечно, находят свое проявление и фрустрация, конфликты, травматические переживания и т. п., которые контролировать полностью не удается. )

Следующие четыре формы психической депривации, выведенные из предшествующего рассмотрения, могут быть, следовательно, обозначены так:

 I. Депривация стимульная (сенсорная): пониженное количество сенсорных стимулов или их ограниченная изменчивость и модальность.

 II. Депривация значений (когнитивная): слишком изменчивая, хаотичная структура внешнего мира без четкого упорядочения и смысла, которая не дает возможности понимать, предвосхищать и регулировать происходящее извне.

 III. Депривация эмоционального отношения (эмоциональная): недостаточная возможность для установления интимного эмоционального отношения к какому-либо лицу или разрыв подобной эмоциональной связи, если таковая уже была создана.

 IV. Депривация идентичности (социальная): ограниченная возможность для усвоения автономной социальной роли.

 

36. Лисина М.И. Проблемы онтогенеза общения
Общение – это взаимодействие двух (или более) людей, направленное на согласование и объединение их усилий с целью налаживания отношений и достижения будущего.

С точки зрения деятельности общение является коммуникативной деятельностью.

В теории деятельности А.Н. Леонтьева выделяются следующие структурные компоненты коммуникативной деятельности: предмет, потребность в общении, коммуникативные мотивы, действие общения, задачи, средства, продукты.

Возникновение общения у ребенка: Первые 2 недели- Нет реакции.

С 3-ей недели- Ориентировочно – исследовательская активность, направленная на ознакомление с взрослым.

С 4-ой недели- Эмоциональные реакции: улыбка в ответ на улыбку; улыбка по собственной инициативе.

На 2-ом месяце- «комплекс оживления»:двигательные акты, улыбки, вокализация


Итог: сразу после рождения ребенок никак не общается с взрослым; лишь после двух месяцев младенцы вступают во взаимодействие со взрослыми, которое можно считать общением.

Общение появляется у ребенка в возрасте 2 месяцев

4 критерия возникновения потребности общения у ребенка: Внимание и интерес ребенка к взрослому, Эмоциональные проявления ребенка к взрослому, Инициативные действия ребенка, направленные на взрослого, Чувствительность ребенка к отношению взрослого

 

Форма общения – коммуникативная деятельность на определенном этапе ее развития, взятая в целостной совокупности черт и характеризуемая по нескольким параметрам.

Параметры выделения форм общения: время, место, содержание потребности, ведущие мотивы, средства общения.
Механизм смены форм общения: обогащение содержания деятельности детей и их взаимоотношений с окружающими приводит к смене устаревших форм общения новыми, а последние дают простор для дальнейшего психического прогресса ребенка.

Выводы:

1. Общение – это взаимодействие двух (или более) людей, направленное на согласование и объединение их усилий с целью налаживания отношений и достижения будущего.

2. Общение возникает у детей в возрасте 2 – 3-х месяцев.

3. Основными мотивами общения являются познавательные, деловые личностные.

4. Основными средствами общения ребенка являются: экспрессивно – мимические, предметно – действенные, речевые. Все три группы мотивов существуют и тесно связаны между собой. Но в разные периоды детства их относительная роль изменяется: то одни, то другие занимают положение ведущих.

5. Формы общения ребенка с взрослым в возрасте до 7 лет: ситуативно – личностная, ситуативное – деловая, внеситуативно – познавательная, внеситуативно – личностная.

6. Изменение социальной ситуации развития ребенка приводит к развития психических функций.

7. Основными продуктами общения являются: взаимоотношения и образ самого себя.


Таким образом, можно сказать, что в своей книге «Проблемы онтогенеза общения» М.И. Лисина рассказывает нам о том, как ребенок, появившись на свет, вступает в свои первые контакты с окружающими людьми, как все более усложняются и углубляются его связи с ними. Через общение с другими ребенок познает самого себя. Именно поэтому М.И.Лисина говорит об общении и самопознании как о неразрывно связных, обуславливающих друг друга проблемах. Ее книга полезна как и ученым – специалистам в области детского развития, так и психологам, воспитателям и педагогам. Общение — условие и важнейший фактор психического развития ребенка.

 

Психическая депривация | Презентация по коррекционной педагогике на тему:

Слайд 1

Психическая депривация МАДОУ ЦРР д / с № 111 Педагог-психолог Белоконь Анастасия Павловна

Слайд 2

Психическая депривация — психическое состояние, возникающее в результате таких жизненных ситуаций, при которых человеку не предоставляется возможности для удовлетворения его основных психических потребностей в достаточной мере и в течение длительного времени.

Слайд 3

Термин « депривация » происходит от латинского слова deprivatio – потеря, лишение.

Слайд 4

Материнская депривация — дефицит внимания и ласки со стороны родителей. Для полноценного развития ребенка важно, чтобы забота и тепло о нем были сосредоточены в одном человеке . Множественные и постоянно меняющиеся контакты со взрослыми не способствуют эффективному развитию эмоциональности малыша. Именно такая ситуация складывается в детских учреждениях для сирот.

Слайд 5

Разлука с близкими быстро приводит к глубоким изменениям психики детей. У малышей при этом нарастает задержка умственного развития, а у детей постарше – грубые нарушения поведения. Ребята становятся подозрительными, недоверчивыми, драчливыми, мстительными.

Слайд 6

Безразличие к психическому развитию ребенка, даже если он родился с неплохими задатками, с годами приводит к состоянию, не отличимому от истинной умственной отсталости.

Слайд 7

О пыт американского ученого Х. Харлоу.

Слайд 8

Патернальная депривация — отсутствие отца. Ребенок, растущий без отца, лишен важного мужского примера, который особенно значителен для мальчиков старшего возраста в регуляции их поведения, но важен также и для девочек в качестве модели их будущего партнера. Ребенок страдает от недостатка авторитета, дисциплины и порядка, которые в нормальных условиях олицетворяются отцом.

Слайд 9

Обобщению многочисленных эмпирических данных, касающихся проблемы депривации в указанном смысле, посвящена обстоятельная монография чешских авторов Й . Лангмейера и З. Матейчека «Психическая депривация в детском возрасте».

Слайд 10

Согласно Лангмейеру и Матейчеку для полноценного развития ребенка необходимы: многообразные стимулы разной модальности (зрительные, слуховые и пр .,) их недостаток вызывает сенсорную депривацию ; удовлетворительные условия для учения и приобретения различных навыков; хаотичная структура внешней среды, которая не дает возможности понимать, предвосхищать и регулировать происходящее извне, вызывает когнитивную депривацию ;

Слайд 11

социальные контакты (со взрослыми, прежде всего с матерью), обеспечивающие формирование личности, их недостаток ведет к эмоциональной депривации ; возможность осуществления общественной самореализации посредством усвоения социальных ролей, приобщения к общественным целям и ценностям; ограничение этой возможности вызывает социальную депривацию .

Слайд 12

Клиническая картина любой из форм психической депривации проявляется бедностью словарного запаса . Наблюдаются фрагментарность, разорванность семантической структуры и линейной последовательности высказываний, потеря нити изложения . Имеют место нарушения звукопроизношения. Н арушения речи, как правило, сочетаются с недостаточной сформированностью высших психических функций. Интеллектуальный потенциал детей не соответствует возрасту . Степень снижения может быть от легкой до значительной.

Слайд 13

Комплексные психолого-медико-педагогические мероприятия с депривированными детьми проводятся в детских специализированных учреждениях. Предполагается совместная работа специалистов разного профиля: логопеда, психолога, психотерапевта, психиатра .

Слайд 14

Комплексные психолого-педагогические мероприятия, включают : Проведение курса логопедических занятий (преимущественно в групповой форме). Логоритмика и психогимнастика – 20–45 занятий на курс. Занятие с психологом – 20–45 занятий на курс. Психотерапевтическое воздействие в форме индивидуальной и групповой психотерапии.

Слайд 15

Ожидаемые результаты коррекции: развитие речевой , других высших психических функций и интеллектуальных возможностей до возрастного уровня, расширение словарного запаса и способностей к связному и последовательному высказыванию, укрепление соматического и психологического статуса.

Слайд 16

Спасибо за внимание

ДЕПРИВАЦИЯ — ЧТО ЭТО ЗА ПОНЯТИЕ?… — Психология|Psychology

ДЕПРИВАЦИЯ — ЧТО ЭТО ЗА ПОНЯТИЕ?

Депривация – это психо-эмоциональное состояние, которое описывается в психологии, как возникающее из-за ограничения или продолжительного лишения возможности удовлетворения базовых потребностей личности. Есть много видов депривации в психологии, но все они имеют схожие проявления. Личность, которая не имеет возможности в полной мере удовлетворить свои потребности, становится тревожной, ее начинают беспокоить страхи. Она становится пассивной, теряет интерес к жизни. Это состояние может сопровождаться неожиданными всплесками агрессии.

Уровень депривации у каждой личности может быть разными. «Степень поражения» зависит от нескольких факторов:

1. Вариант воздействия депривационного раздражителя, степень его «жесткости».
2. Устойчивость конкретного индивида, опыт преодоления схожих состояний.
3. Частичное ограничение базовой потребности оказывает на личность не такое отрицательное влияние, как ее полное отсутствие. То, как быстро человек справиться с этим состоянием также зависит от того, в какой степени удовлетворены его остальные потребности.

Депривация и фрустрация – это 2 родственных понятия. Их главное отличие – уровень воздействия на личность. Депривация наносит ей больший вред, нередко приводит к полному разрушению.

При депривации человек лишается того, с чем он еще не был знаком: материальные ценности, опыт общения и т.д. А вот при фрустрации личность лишается того, что у нее было, с чем она хорошо знакома и в чем остро нуждается: еда, социальные блага, физического здоровья и т.д.

Причины депривации

Депривация не возникает просто так. Более того, она может появиться только у людей, которые внутренне к ней предрасположены. В первую очередь, она проявляется у людей с внутренним «вакуумом» ценностей. В психологии это описывается следующим образом. Если человек длительное время лишался чего-то, то со временем он теряет способность следовать правилам, нормам и ценностям, которые имеют место быть в обществе. Чтобы нормально существовать, индивид должен уметь подстраиваться под те условия окружающей среды, в которую он попадает. Если он этого не умеет делать, он чувствует внутренний дискомфорт. Выход из ситуации – формирование новых идеалов и ценностей.

Виды депривации

Есть несколько критериев классификации понятия «депривация». По степени поражения различают 2 вида депривации:

1. Абсолютная депривация. Это полное отсутствие доступа к различным благам и возможности удовлетворения базовых потребностей.

2. Относительная депривация. По этим понятием подразумевается субъективное переживание несовпадения ценностных возможностей и личных ожиданий.

По характеру неудовлетворенной потребности различают такие виды депривации:

1. Сенсорная депривация. При этом виде депривации человек лишается возможности удовлетворять свои потребности, связанные с органами чувств. Сенсорная депривация делится также на зрительную, слуховую, тактильную, осязательную. Ученые также выделяют сексуальную депривацию, когда у человека долго отсутствуют отношения интимного характера.

2. Патернальная. Депривация характерна для детей, которые растут в неполноценной семье.

3. Социальная. Этот вид депривации характерен для людей, которые находятся в местах лишения свободы, длительный период находятся на лечении, воспитанников интернатов и т.п.

4. Двигательная. Депривация развивается в результате ограничения движений. Это может быть связано с инвалидностью, болезнью, специфическими жизненными условиями. Двигательная депривация приводит не только к психическим, но и физическим нарушениям.

Отдельного рассмотрения требует сенсорная и социальная депривация.

Сенсорная депривация

Под этим понятием подразумевается полное или частичное лишение органов чувств возможности реагировать на внешние воздействия. Самый простой вариант — это использования повязки на глаза или затычек для ушей, которые ограничивают возможности зрительного и слухового анализатора. В сложных случаях этой депривации «отключается» сразу несколько анализаторов. Например, вкусовой, обонятельный, зрительный и осязательный. Длительное ограничение работы сенсорных анализаторов часто провоцирует тревожность, беспокойство, галлюцинации, асоциальное поведение, депрессии — такие последствия депривации.

Эксперимент с сенсорной камерой

В прошлом столетии ученые решили провести интересный эксперимент по исследованию сенсорной депривации. Они изобрели специальную камеру, которая ограждала испытуемых от воздействий внешней среды. Участники эксперимента располагались в камере горизонтально. После помещения им перекрывали доступ ко всем звукам. Это делалось с помощью своеобразного однотипного шума. Глаза закрывались темной повязкой, а руки — помещались в картонные муфты. Длительность эксперимента не была заранее определена, но проведя ряд исследований ученые выяснили, что больше трех дней человек не может находиться в таких условиях. Подобные ограничения провоцируют галлюцинации, снижают умственные способности. Но это же действие в умеренных количествах может приносить пользу. На этом основан флоатинг.

Пищевая депривация

Особый вид сенсорной депривации — пищевая депривация. В отличие от других нарушений этого рода, она не всегда вызывает отрицательные эмоции и переживания. Неприятные ощущения появляются только у тех, кто лишается пищи не по своей воли. Люди, которые практикуют лечебное голодание, с каждым днем чувствуют себя лучше, у них появляется легкость в организме, повышается жизненная активность.

Сенсорная депривация у детей

В детском возрасте сенсорная депривация проявляется в виде ограничения или лишения возможности эмоционального контактирования с близкими людьми. Если малыш оказывается в больнице или интернате, он нередко испытывает сенсорный голод. Подобные изменения отрицательно сказываются на любом ребенке, но особенно чувствительны к ним дети раннего возраста. Малыши должна получать достаточно ярких и положительных впечатлений. Это способствует формированию способности анализировать информацию, поступающую извне, тренировке соответствующих структур головного мозга, развитие в психологии.

Социальная депривация

Если личность лишается возможности полноценно контактировать с социумом, это провоцирует определенное состояние психики, которое в последствии может стать причиной развития патогенных симптомов и синдромов. Социальная депривация может быть вызвана различными факторами. В психологии выделяют несколько форм этого состояния:

— добровольная депривация;
— принудительная депривация;
— вынужденная депривация;
— добровольно-вынужденная депривация.

Вынужденная депривация наступает в случае, если человек или группа людей оказывается в условиях, оторванных от социума. Эти обстоятельства не зависят от воли или желания личности. Примером такой депривации может стать трагедия на море, после которой команда корабля оказывается на необитаемом острове.

Принудительная депривация возникает в случае изоляции человека, вопреки его желаниям. Пример такой ситуации — люди, которые находятся в местах лишения свободы, воспитанники интернатов, солдаты срочной службы. Добровольная депривация происходит в тех случаях, когда личность ограничивает удовлетворение потребности в общении по собственному желанию. К таким людям относятся сектанты, монахи. Пример добровольно-вынужденной депривации — воспитанники спортивной школы.

Для взрослого человека последствия социальной депривации не такие катастрофические, как для детей. Ограничение в общении отрицательно сказывается на эффективности жизнедеятельности ребенка и его психическом развитии.

В отдельную группу ученые выделяют эмоциональную, материнскую, отцовскую депривиацию и депривацию сна. Рассмотрим их подробнее.

Эмоциональная депривация

Эмоции и чувства играют в жизни человека немаловажную роль. Под их влиянием происходит формирование личности. Эмоциональная сфера помогает человеку приспосабливаться к различным жизненным изменениям. Благодаря эмоциям человек осознает свое место в жизни. Они оказывают влияние на познавательную сферу, формируют восприятие, мышление, память, развивают сознательность.

Если личность лишена возможности удовлетворять эмоциональную сферу, то ее познавательная область становится бедной и ограниченной в следствии депривации. Это отрицательно сказывается на нормальном психическом развитии. Благодаря психологическим исследованиям было выявлено, что существенное влияние на отношение ребенка к жизни оказывает желание родителей иметь в семье малыша.

Следующий важный этап в развитии личностной сферы — ранний детский возраст. Если в это время малыш окружен вниманием, получает достаточное количество положительных эмоций, то эмоциональная депривация у него вряд ли возникнет, в психологии не произойдет изменений. А вот если все наоборот — то ребенок склонен к депривационным нарушениями. Есть риск возникновения подобных отклонений и в том случае, если малыш постоянно находится в эмоционально изменчивой среде.

Личность, которая в детстве была обделена позитивными эмоциями, во взрослом возрасте часто переживает чувство одиночества, тоски, у нее развивается комплекс неполноценности в психологии.

Недостаток эмоций сказывается и на физическом развитии — малыш развивается с опозданием, его медицинские показатели не дотягивают до нормы. Но если ребенок попадает в нормальную среду, показатели резко меняются в положительную сторону. Яркий пример такого «исцеления» — дети из детских домов, которые попадают на воспитание в полноценные семьи.

Депривация сна

Нормальный, полноценный сон — это залог хорошего самочувствия и здоровья. Если по каким-то причинам человек лишен возможности высыпаться, это сказывается на его физическом и психическом состоянии. Когда речь идет о единичном случае, то отрицательного воздействия на здоровье он не окажет. А вот когда человек лишается полноценного сна регулярно, то у него развиваются депривационные нарушения.

Во время ночного отдыха вырабатывается гормон радости. Если человек не высыпается, нарушается работа его эндокринной системы, замедляются обменные процессы. Такой вид депривации приводит к набору массы, депрессии, головным болям.

Что еще происходит с человеком, который лишается полноценного сна?

1 день без сна — ухудшение реакции, упадок сил;
2 дня без сна — нарушение двигательной активности, снижение умственных реакций;
3 дня без сна — появление невыносимых головных болей;
4 дня без сна — подавление воли, возникновение галлюцинаций.

Помощь людям, которые перенесли социальную депривацию

Коррекционная и психотерапевтическая работа имеет несколько этапов и направлений. Только тщательная и последовательная проработка каждого этапа поможет справиться с негативными последствиями, которые возникают вследствие депривации.

Направления работы:

1. Работа с самооценкой, оздоровление отношений с людьми. Человек учится видеть положительные стороны жизненных ситуации, тщательно анализировать их и адекватно оценивать.
2. Работа с личной уязвимостью. Человек учится воспринимать ситуацию без лишних эмоций, обучается рассудительности, видеть причинно-следственные связи.
3. Работа с идентификацией чувств. Личность учится взаимодействовать с другими людьми, выражать эмоции, разбираться в чувствах других людей.

Работа с человеком, который столкнулся с депривацией, может проходить индивидуально либо в группе. Психотерапевт подбирает техники и методики работы, ориентируясь на то, какая депривация имела место быть в жизни человека, ее длительность и степень влияния на психику. Корректировать последствия самостоятельно нежелательно, чтобы ситуация еще больше не усугубилась.

Источник: https://chtoikak.ru/deprivaciya.html

ДЕПРИВАЦИЯ ОТЕЧЕСТВА ВЛИЯЕТ НА СОЦИАЛЬНОЕ ПОВЕДЕНИЕ И НЕЙРОХИМИЧЕСКИЕ СИСТЕМЫ В ОТНОШЕНИИ СОЦИАЛЬНО МОНОГАМНОЙ ПРЕРИИ

Abstract

Опыт ранней жизни, особенно опыт общения с родителями, имеет решающее значение для фенотипических результатов как у людей, так и у животных. Хотя влияние материнской депривации на благополучие потомства было изучено, отцовской депривации (PD) уделялось мало внимания, несмотря на документально подтвержденную связь между отсутствием отца и проблемами со здоровьем детей у людей.В настоящем исследовании мы использовали социально моногамную степную полевку ( Microtus ochrogaster ), которая демонстрирует связь пары самец-самка и заботу о двух родителях, чтобы изучить влияние БП на поведение взрослых и нейрохимическую экспрессию в гиппокампе. Испытуемые мужского и женского пола были случайным образом распределены в одну из двух экспериментальных групп, которые росли как с матерью, так и с отцом (MF) или только с матерью (MO, для получения опыта PD). Наши данные показывают, что субъекты MO меньше подвергались родительскому облику / уходу и ношению, и их оставляли одних в гнезде чаще, чем субъектов MF.Во взрослом возрасте (~ 75 дней) субъекты МО демонстрировали повышенную социальную принадлежность к сородичу по сравнению с субъектами МФ, но эти две группы не различались по социальному признанию и тревожному поведению. Интересно, что субъекты с МО продемонстрировали последовательное увеличение экспрессии как генов, так и белков нейротрофического фактора головного мозга (BDNF) и киназы рецептора тропомиозина B (TrkB), а также уровней общего ацетилирования гистона 3 и гистона 3 в гиппокампе по сравнению с MF. предметы.Кроме того, при PD повышается экспрессия белка рецептора глюкокортикоидов бета (GRβ) в гиппокампе женщин, а также повышается экспрессия белка рецептора 2 кортикотропина (CRHR2) в гиппокампе мужчин, но снижается мРНК CRHR2 у обоих полов. В совокупности наши данные предполагают, что БП оказывает длительное поведенческое воздействие на социальную принадлежность и изменяет нейрохимические системы гиппокампа в мозге полевок. Функциональная роль таких измененных нейрохимических систем в социальном поведении и потенциальное участие эпигенетических событий требует дальнейшего изучения.

Ключевые слова: родительское поведение, социальная принадлежность, гиппокамп, BDNF, окситоцин, CRH, эпигенетика

Введение

Вариации родительской среды во время развития могут серьезно влиять на фенотип взрослого человека (Heim et al., 2002; Repetti et al. ., 2002; O’Donnell et al., 2014; Samek et al., 2015). У людей, например, семейная среда детства, характеризующаяся высоким уровнем конфликтов и низким качеством привязанности, связана с уязвимостью к дефициту социальной и эмоциональной обработки (Repetti et al., 2002), а также повышение риска развития психопатологии во взрослом возрасте (Bifulco et al., 1991; Brown, Anderson, 1991; Felitti et al., 1998; Heim et al., 2002; Yam et al., 2015). ). Было показано, что отсутствие отца является фактором риска для множества негативных результатов, таких как развитие депрессивных симптомов и экстернализирующее поведение (Culpin et al., 2013; McLanahan et al., 2013). Напротив, повышенная материнская отзывчивость связана с ускорением развития ребенка, включая социальную, эмоциональную и когнитивную компетентность (Landry et al., 2006). Следовательно, ранняя родительская среда предсказывает восприимчивость и устойчивость к психопатологии взрослых (Smith and Prior, 1995; O’Donnell et al., 2014). Исследования с использованием функциональной магнитно-резонансной томографии (фМРТ) выявили некоторые области мозга, включая гиппокамп, а также поясную и префронтальную коры, которые подвержены неблагоприятным воздействиям в раннем детстве (Brooks et al., 2014; Elton et al., 2014 ; Sripada et al., 2014; Jensen et al., 2015). Однако нейрохимические системы, на которые влияют нарушения в раннем периоде жизни, менее известны из-за сложности, присущей исследованиям на людях.

Модели на животных, демонстрирующие влияние опыта ранней жизни на исходы у взрослых, показали высокую предсказательную ценность и достоверность, а также позволили получить представление о нейронных механизмах. Исследования на крысах и мышах показали, что пренатальный стресс или разлучение с матерью приводит к усилению тревожного и депрессивного поведения у взрослых потомков, а также к усилению нейроэндокринной реакции на стресс с множеством нейрохимических веществ, действующих в областях мозга, участвующих в стрессовых ответах. (Плоцкий, Мини, 1993; Прайс, Фелдон, 2003; Дэниэлс и др., 2004; Binder et al., 2011; Barbosa Neto et al., 2012). Примечательно, что изменения нейрохимических веществ, участвующих в пластичности и экспрессии генов, были обнаружены в гиппокампе (Suri et al., 2013; Nishi et al., 2014; Sousa et al., 2014; Shin et al., 2016) — области мозга. важны для обучения и памяти, а также для регуляции стрессовых реакций посредством взаимодействия с осью гипоталамуса и гипофиза надпочечников (HPA) (Kim et al., 2015). Например, разделение с матерью связано с изменениями в экспрессии нейротрофических факторов в гиппокампе потомства, включая нейротрофический фактор головного мозга (BDNF) и его рецепторную киназу рецептора тропомиозина B (TrkB), а также изменение производительности в когнитивных задачах, зависимых от гиппокампа. (Марко и др., 2013; Сури и др., 2013; Hill et al., 2014). Кроме того, взрослое потомство самок крыс, которое в процессе развития подвергалось большему вылизыванию / уходу со стороны матери, демонстрировало более высокие уровни материнского облизывания / ухода за своим собственным потомством, но более низкие уровни тревожного поведения, экспрессии вызванного стрессом циркулирующего кортикостерона и глюкокортикоидных рецепторов (GR). в гиппокампе, по сравнению с теми, которые подвергались меньшему вылизыванию / уходу со стороны матери во время развития (Liu et al., 1997; Francis et al., 1999).Интересно, что эпигенетические события были вовлечены в опосредование эффектов материнской среды на нейрохимическую экспрессию в гиппокампе и связанное с ним поведение у взрослого потомства (Fish et al., 2004; Champagne et al., 2006; Pan et al., 2014; Wang et al. ., 2014).

В то время как данные исследований на животных выявили новые знания о влиянии материнской среды на исход для взрослых и лежащих в основе нейрохимических механизмов, влияние отцовской депривации (PD) изучено меньше.У людей отцовский уход связан с благополучием взрослых, и было обнаружено, что БП связана с множеством отрицательных результатов (McLanahan et al., 2013). Кроме того, согласно отчетам Бюро переписи населения США и Центра по контролю за заболеваниями, число детей, живущих в семьях, где отсутствуют отцы, широко распространено и увеличивается в Соединенных Штатах, что соответствует меньшему количеству контактов между отцом и потомством (Бюро переписей США, 2012; Джонс и Мошер, 2013). Учитывая, что БП широко распространена и увеличивается в нашем обществе, крайне важно понимать нейронные механизмы, лежащие в основе негативной связи между отсутствием отца в раннем возрасте и благополучием взрослых для профилактики и лечения связанных психопатологий.В то время как обычные лабораторные крысы и мыши не могут служить подходящими моделями, поскольку они от природы не проявляют отцовского поведения, появление социально моногамной модели степной полевки ( Microtus ochrogaster ) дало возможность изучить родительское поведение самцов и его влияние на когнитивные способности потомства. и поведенческие функции, а также лежащие в основе нейрохимические механизмы.

Луговая полевка — это вид грызунов, который демонстрирует поведенческие черты социальной моногамии, включая долгосрочную привязанность между партнерами противоположного пола (парная связь) (Williams et al., 1992; Гетц и Картер, 1996; Lim et al., 2004) и, таким образом, была создана в качестве животной модели для изучения нейрохимической регуляции социальной привязанности (Carter et al., 1995; Young et al., 1998). Отцы луговых полевок вносят свой вклад в уход за своими детенышами, демонстрируя полный спектр материнского поведения, за исключением кормления (Wang and Novak, 1992; Wang and Insel, 1996). Кроме того, PD влияет на поведение потомков степной полевки: уменьшая проявление аллопатического поведения подростков по отношению к своим младшим братьям и сестрам (Wang, Novak, 1994) и ослабляя их способность образовывать парные связи во взрослом возрасте (Ahern and Young, 2009; Ahern et al. al., 2011). В настоящем исследовании мы стремились охарактеризовать поведенческие и нейробиологические последствия отцовской депривации у степных полевок. Мы сравнили взрослых самцов и самок полевок, которые выросли с отцом или без него, и изучили их социальное и тревожное поведение, а также экспрессию генов нескольких нейрохимических веществ в гиппокампе, которые участвовали в регуляции стрессоустойчивости и дефицита памяти в ответ. к стрессовому жизненному опыту. Мы предположили, что в отсутствие раннего отцовского опыта полевки будут демонстрировать измененное социальное и тревожное поведение, связанное с изменениями в нейрохимических системах гиппокампа.

Экспериментальные процедуры

Экспериментальные животные

Все животные, использованные в наших экспериментах, были степными полевками ( M. ochrogaster ), выращенными в племенной колонии, расположенной в Университете штата Флорида. Животные имели доступ к пище и воде ad libitum , и клетки поддерживали в режиме 14:10 свет: темнота с включенным светом в 07:00. Субъекты были потомками взрослых самцов и самок степных полевок, которых спаривали в начале экспериментировали и проявили сексуальную наивность при объединении в пары.Пары животных содержали в больших поликарбонатных клетках (45 × 22 × 20 см), выстланных подстилкой из кедровой щепы, и два хлопковых гнезда были предоставлены для идентификации гнезда. Пятнадцать пар родили 56 потомков в течение пяти дней. При рождении помета (1-й постнатальный день: PND1) отцы оставались с партнерами-самками в домашних клетках (n = 8 пар) или были навсегда удалены из домашних клеток (n = 7 пар). Таким образом, субъекты были размещены либо с матерью и отцом (MF; n = 31), либо с матерью только для создания опыта отцовской депривации (MO; n = 25) от PND1 до PND21.Примечательно, что во время родов мы удаляли отца из каждого второго помета, чтобы группы лечения были созданы сбалансированным образом. При отлучении от груди (PND21) субъектов взвешивали и размещали до достижения зрелого возраста с представителем того же пола, который прошел такое же экспериментальное лечение. Субъектам были присвоены идентификационные номера, и половине субъектов проткнули уши, чтобы отличить их от своих товарищей по клетке. Все эксперименты проводились в соответствии с руководящими принципами Институционального комитета по уходу и использованию животных Университета штата Флорида.

Выборочные проверки

Выборочные проверки проводились утром (08:30) и вечером (19:00) ежедневно между PND2 и PND21 на основании ранее опубликованных протоколов (Hammock et al., 2005; Ahern and Young, 2009; Ahern et al. , 2011). Каждая выборочная проверка состояла из пяти поведенческих проверок с пятиминутными интервалами. Во время выборочных проверок исследователь наблюдал за поведением родителей в последовательном порядке и записывал итоговые отметки, соответствующие наблюдаемому поведению, на листе бумаги, который позже был перенесен в документ SPSS.Порядок клетки был уравновешен между проверками. На PND1 на спинах отцов в группе MF были сбриты клочки шерсти, чтобы отличить их от матерей. Оцениваемые поведенческие критерии включали уход, вылизывание / уход, сбивание в кучу и вынашивание детенышей, а также строительство гнезда, самообслуживание и случаи, когда каждый родитель находился либо в гнезде, либо вне гнезда. Хаддлинг засчитывался, когда отец парил над своими детенышами с изогнутой спиной. Поскольку кучка всегда сопровождается расположением детенышей вентральнее от родителя, сбивание матери сделало невозможным с уверенностью определить, были ли прикреплены к соску какие-либо детеныши.Таким образом, скучивание матери оценивалось как кормление / скучивание. Вынашивание щенка определялось, когда родитель носил щенка через рот.

Масса тела

Все субъекты были взвешены при отъеме от груди (PND21) и во взрослом возрасте. Два самца MF были обнаружены мертвыми в своей домашней клетке вскоре после отлучения от груди, поэтому их данные были исключены из анализа данных. Вес всех взрослых измерялся в один и тот же день, то есть как минимум за два дня до начала первого поведенческого теста для каждого испытуемого, в течение которого возраст испытуемых варьировался от 68 до 73 дней.

Поведенческие тесты

Субъекты были разделены на две когорты, каждая из которых состояла из равного числа субъектов в пометах. Субъекты в когорте 1 (M / MF; n = 6, F / MF; n = 11, M / MO; n = 6, F / MO; n = 7) прошли через родительское поведение (PB), социальную принадлежность (SOA ), социальное признание (SOR) и крестообразный лабиринт (EPM), соответственно, с одним тестом в день в течение четырехдневного периода. Благодаря количеству испытуемых и экспериментальных групп, нескольким поведенческим тестам и узкому окну для каждого поведенческого теста нам удалось начать первый день поведенческого тестирования для каждого испытуемого, когда они достигли PND74-76.Каждый поведенческий тест начинался примерно в одно и то же время каждый день, и все поведенческие тесты проводились между 09:00 и 15:00 в комнате для поведенческих тестов, контролируемой по освещенности (около 300 лк), как описано ранее (Sun et al., 2014). Поведение записывалось на видео и впоследствии оценивалось с помощью программного обеспечения JWatcher (NIH, Bethesda, MD) исследователем, не знающим экспериментального состояния испытуемых. На следующий день после последнего поведенческого теста субъектов из когорты 1 забивали.Чтобы избежать потенциального воздействия поведенческого тестирования на нейрохимическую экспрессию в головном мозге, испытуемые из когорты 2 (n = 24; по 6 испытуемых в каждой из 4 экспериментальных групп) не проходили поведенческие тесты, а оставались в домашних клетках без каких-либо нарушений до PND79. во время которого субъекты были усыплены для сбора мозгов.

Тест родительского поведения

Родительское поведение испытуемого тестировалось по отношению к сородичу в течение 10 минут с использованием установленного протокола (Lonstein and De Vries, 1999).Аппарат для испытаний состоял из поликарбонатной клетки (45 × 22 × 20 (В) см), выложенной подстилкой из кедровой стружки. Испытуемого помещали в центр клетки на 10 минут для привыкания. После этого новый двухдневный стимулирующий щенок был помещен в самый дальний от субъекта угол испытательной клетки. Стимулирующий щенок был потомком селекционеров колонии и был очищен дистиллированной водой и ватным тампоном непосредственно перед тестом. Родительское поведение оценивалось как вылизывание / уход за щенком, сбивание в кучу и ношение щенка.Также оценивались другие виды поведения, такие как строительство гнезда, уход за собой, передвижение и отдых. В тех случаях, когда субъект проявлял агрессивное поведение по отношению к щенку, исследователь немедленно вмешивался, чтобы удалить щенка, и поведенческий тест прекращался.

Тест на социальную принадлежность

Социальная принадлежность (SOA) субъекта к тому же половому сородичу также проверялась с использованием установленного метода (Pan et al., 2009). Вкратце, испытательная установка состояла из двух поликарбонатных камер (13 × 18 × 29 (В) см), соединенных полой трубкой (7.5 × 16 см). Стимулирующее животное того же пола и возраста, что и субъект, было привязано в одной камере, и субъект был помещен в пустую камеру и имел доступ ко всему устройству для тестирования в течение 1-часового теста. К полой трубке были прикреплены индивидуальные световые датчики и подключены к компьютеру для записи входа субъекта в каждую камеру. Регистрировали время, проведенное субъектом в каждой клетке и переходе клетки, а также продолжительность и частоту непосредственного контакта со стимулированным животным.

Тест на социальное признание

Социальное признание (SOR) субъекта проверялось с использованием установленного метода (Lieberwirth et al., 2012). Тест состоял из четырех попыток, каждое по пять минут и разделенных пятиминутным интервалом. Субъектам позволяли привыкнуть к испытательному устройству (поликарбонатная клетка 25 × 45 × 20 (В) см) в течение 10 минут. В начале каждого испытания молодое стимулирующее животное помещалось в испытательную клетку с субъектом. Все стимулированные животные были того же пола, что и испытуемые, и возрастом примерно 30 дней.В конце каждого испытания стимулирующее животное удаляли из испытательной клетки и помещали в отдельную клетку, в то время как субъект оставался в испытательной клетке. Во время испытаний 1-3 одно и то же животное-раздражитель помещалось в экспериментальную клетку. Во время испытания 4 использовали другое стимулирующее животное. Регистрировали продолжительность и частоту обнюхивания (включая аногенитальное обнюхивание и обнюхивание головы).

Тест приподнятого крестообразного лабиринта

Тревожное поведение субъекта было проверено в тесте EPM (Liu et al., 2014). Вкратце, испытательная установка (Columbus Instruments, Колумбус, Огайо, США) состояла из двух открытых плеч и двух закрытых плеч (35 × 6,5 × 15 (В) см), которые пересекаются посередине и подняты на 45 см от пола. В начале 5-минутного теста испытуемого помещают в центр платформы лицом к закрытой руке. Регистрировали время, которое испытуемые провели в каждой руке и в центре сцены, входы в каждую руку и задержку входа в открытую руку.

Обработка тканей

Субъекты были быстро обезглавлены.Мозги извлекали, немедленно замораживали на сухом льду и впоследствии хранили при -80 ° C. Коронковые срезы (толщиной 200 мкм) вырезали на криостате и помещали на предметные стекла для размораживания. Двусторонние тканевые штампы диаметром 1 мм из заднего медиального гиппокампа были взяты при -40 ° C, а затем сохранены при -80 ° C до дальнейшей обработки. Белок и РНК выделяли из 14 точек ткани заднего медиального гиппокампа с использованием Tri-Reagent в соответствии с инструкциями производителя (Центр молекулярных исследований, Цинциннати, Огайо).Белки хранили в буфере Laemmle при -80 ° C. РНК растворяли в воде DEPC и также хранили при -80 ° C до дальнейшей обработки.

Вестерн-блоттинг

Образцы белка по 20 мкг каждый загружали в полиакриламидные гели с 12% додецилсульфатом натрия (SDS) (Bio-Rad) для электрофореза. Белки прогоняли на гелях при 80 В (В) в течение приблизительно 20 минут, а затем при 120 В в течение 1 часа. Затем белки переносили на нитроцеллюлозные мембраны при 100 В в течение 1 часа при 4 ° C и затем блокировали либо в 5% молоке, либо в Superblock (Bio-Rad).Мембраны инкубировали при 4 ° C в течение 1-2 дней со следующими первичными антителами: киназа B кроличьего антитропомиозинового рецептора (TrkB) (1: 200, Santa Cruz), кроличий анти-мозговой нейротрофический фактор (BDNF) (1: 200, Санта-Крус), кроличий антиглюкокортикоидный рецептор (GR) (1: 1000, Санта-Крус), козий антиокситоциновый рецептор (OXTR) (1: 500, Санта-Крус), кроличий рецептор антикортикотропин-рилизинг-гормона 1 (CRHR1 ) (1: 300, Novus Biologicals) и 2 (CRFR2) (1: 500, Novus Biologicals), козий рецептор против вазопрессина (V1aR) (1: 300, Санта-Крус), кроличий антикортикотропин-рилизинг-гормон (CRH) (1: 300, Proteintech), кроличий антиглицеральдегид-3-фосфатдегидрогеназа (GAPDH) (1: 1000, Santa Cruz), мышиный антител к общему гистону 3 (h4total) (Millipore, 1: 1000), кроличий антигистон 3 ацетилирование (h4ace) (1: 1000, Millipore) или ацетилирование кроличьего антигистона 3 по лизину 9 (h4K9ace) (1: 1000, Millipore).После этого мембраны промывали фосфатно-солевым буфером (PBS) и инкубировали в течение 1 часа со следующими вторичными антителами: конъюгированные с пероксидазой хрена (HRP) антитела кролика (1: 20000, Санта-Крус), HRP-антитела коз (Санта-Крус, 1). : 20,000), DYLight 550 против кролика (1: 20,000, Thermo Fisher Scientific), DYLight 650 против мыши (1: 20,000, Thermo Fisher Scientific) или против IRDye 680 против кролика (1: 20,000 Li-Cor Biosciences). Затем мембраны снова промывали, и мембраны, которые инкубировали с конъюгированным с HRP вторичным антителом, дополнительно инкубировали в хемилюминесцентном субстрате HRP (субстрат SuperSignal West Dura Extended Duration Substrate, Thermo Fisher Scientific) в течение 10 минут.Все белки визуализировали на системе ChemiDoc MP (Bio-Rad). Специфичность первичных антител была подтверждена в предыдущих исследованиях на полевках, а также на крысах и мышах в отношении системы CRH и h4k9ace, которые имеют высокую гомологию с степными полевками (Huang et al., 2009; Greenberg et al., 2012; Gupta -Agarwal et al., 2012; Wang et al., 2013; Wu et al., 2014; Galinato et al., 2015; Duclot et al., 2016; Yadawa and Chaturvedi, 2016). Следует отметить, что было показано, что антитело OTR способно обнаруживать белок OTR в ткани мозга полевок посредством нейтрализации антител блокирующим пептидом OTR, но снижение сигнала при инкубации с блокирующим пептидом в течение ночи не было полным (Duclot et al., 2016). Следовательно, следует соблюдать осторожность при интерпретации данных. Западные полосы были количественно определены с помощью ImageJ (NIH, Bethesda Maryland). Все данные были нормализованы в пределах одной и той же мембраны до GAPDH, в то время как h4ace и h4K9ace были дополнительно нормализованы до h4total. Все данные выражены в процентах от среднего значения для групп MF.

Полуколичественная полимеразная цепная реакция в реальном времени (RT-PCR)

400 нг общей РНК было обработано на MyCycler Thermal Cycler (Bio Rad) для синтеза комплементарной ДНК с помощью набора для синтеза первой цепи кДНК Cloned AMV (Invitrogen , Thermo Fisher Scientific) в соответствии с инструкциями производителя.Все образцы праймеров и кДНК разбавляли 1/10, загружали в трех экземплярах с помощью SYBR Green Supermix (Bio Rad) в 384-луночный планшет для ПЦР и запускали в термоциклере CFX 384 (Bio Rad). Результаты были нормализованы к эталонному гену никотинамидадениндинуклеотиддегидрогеназы (НАДН). Последовательности праймеров приведены в. Специфичность праймера подтверждали анализом кривой плавления. Данные представлены как процентное изменение от контролей (группы MF).

Таблица 1

Последовательности праймеров (5 ‘- 3’)

91 900CTAG 900CTAG 9CTG 99091 ACGCGGACTTGTAC
Мишень Последовательность праймеров
GRα вперед GGTTGGTGCTTCTACCCTGA
обратная 900GTC90 900GTC 900GTC 900
GR β вперед ACAGACTTTCGGCTTCTGGA
задний ход AAAGGTGCTTTTGGTCTGTGG
CRHR190
CRHR2 вперед CAGCTTCCACAGCATCAAGC
назад CACCCAAGGGTCAGTGTAGC
BDNF CCATA вперед
обратный TTGGAGATGTGGTGGAGAGG
TrkBFL вперед TATGCTGTGGTGGTGATTGC
обратный TTGGAGATGTGGTGGAGAGG
TrkBt вперед GGCTGCTCCTAACCTCACTG
обратный TTCACGGAATCCTGGTCTTC
NADH прямой CTATTAATCCCCGCCTGACC
обратный GGAGCTCGATTGT908 IBM) и p <0.05 был признан статистически значимым. Все данные были проверены на однородность дисперсии и либо нормализованы, если необходимо, преобразованием квадратного корня, если не указано иное, либо проанализированы с помощью непараметрических тестов. Независимые выборочные T-тесты были проведены для сравнения поведения выборочной проверки между группами MF и MO, матерями и отцами в группе MF и матерями из групп MO и MF, соответственно. Для анализа данных использовались итоговые отметки по сумме утренних и вечерних выборочных проверок по каждому поведению.Все остальные данные были проанализированы с помощью двустороннего дисперсионного анализа (пол группы X), за исключением данных социального признания, которые были проанализированы с помощью двустороннего дисперсионного анализа с повторными измерениями (испытания). Значимые взаимодействия отслеживали с помощью апостериорных тестов по методу наименьшего значимого различия (LSD) Фишера. Данные представлены как среднее + SEM.

Результаты

Выборочные проверки

При условии MF () были обнаружены половые различия — матери вылизывали / ухаживали за своими щенками (t (14) = 4,426, p <0.001) и принял нависшую позу над детенышами (медсестра / группа) (t (14) = 8,216, p <0,001) больше, чем отцы. Не было обнаружено различий в другом поведении, включая ношение щенков, строительство гнезда и уход за собой. Матери в условиях MF и MO не различались ни по одному измеренному поведению (). Интересно, что щенков в состоянии MF вылизывали / ухаживали (t (13) = 2,365, p <0,05) и переносили (H (2) = 4,801, p <0.05) больше родителями и реже оставались в гнезде одних (t (13) = 3,429, p <0,01) по сравнению с детенышами в состоянии MO (). При отъеме (PND 21) самцы MF весили меньше по сравнению с самками MF, а также самцами и самками MO (F (1, 49) = 6,884, p <0,05) (). Однако в зрелом возрасте самцы весили больше, чем самки, независимо от условий выращивания (F (1, 49) = 6,596, p <0,05).

Лишение отца влияет на уход за потомством.(A) Когда присутствуют и мать, и отец (MF), матери демонстрируют больше вылизывания / ухода за щенком и занимают общую позицию (медсестра / тусовка) над щенками по сравнению с отцами, но они не различаются по уровням вынашивания щенков, гнезд построение или уход за собой. (B) Не было различий в облизывании щенков и уходе за ними, уходе за ними, ношении щенков, строительстве гнезд и самообслуживании между матерями MF и только матерями (MO) без отца. (C) Были более низкие уровни направленного облизывания и ухода за щенком, а также ношения щенка в гнездах MO по сравнению с гнездами MF.Кроме того, было больше случаев, когда потомство оставалось одного в гнезде в состоянии MO. (D) Наконец, самцы MF весили меньше при отъеме (PND21), в то время как самцы MO весили так же, как и самки. В зрелом возрасте субъекты мужского пола весят больше, чем субъекты женского пола, независимо от условий выращивания. Данные показаны как среднее + SEM. * р <0,05, ** р <0,01. Буквы алфавита указывают на результаты апостериорного теста после ANOVA. Полосы, помеченные разными буквами, значительно отличаются друг от друга.

Поведенческие тесты

Число субъектов в каждой экспериментальной группе, которые прошли следующие поведенческие тесты, включало 6 M / MF, 6 M / MO, 11 F / MF и 7 F / MO. Все испытуемые в когорте 1 прошли все поведенческие тесты, и все их данные представлены в отчете, если не указано иное.

Родительское поведение

Во время родительского поведенческого теста 33,7% (4/11) женщин и 50% (3/6) мужчин в группе MF, а также 28,6% (2/7) женщин и 33,4% (2/6) мужчин в группе МО проявили спонтанное родительское поведение.Не было обнаружено никаких групповых и половых различий в процентном отношении субъектов, проявляющих родительское поведение. Из-за ограниченного числа субъектов, демонстрирующих родительское поведение, мы не смогли провести статистический анализ конкретного поведения.

Социальная принадлежность и признание

В тесте SOA два субъекта из группы M / MO были исключены из анализа из-за низкого качества видеозаписи. Выявлены достоверные групповые и половые различия в продолжительности параллельного контакта с животным-стимулом ().Субъекты МО проводили больше времени в параллельном контакте с животным-стимулом, чем субъекты МФ (F (1, 24) = 4,511, p <0,05). Кроме того, самцы чаще контактировали со стимулирующим животным по сравнению с самками (F (1, 24) = 5,756, p <0,05). По продолжительности контакта не было обнаружено значимой группы по половому взаимодействию. Различий в частоте социальных контактов не обнаружено (). В тесте SOR не было обнаружено никаких групповых и половых различий в продолжительности и частоте социального обнюхивания ().Все субъекты продемонстрировали уменьшение продолжительности обонятельного исследования стимула животного, неоднократно предъявляемого в испытаниях 1-3, а затем увеличенного обонятельного исследования после предъявления нового стимульного животного во время испытания 4 (F 1, 75 = 19,985, p <0,001 ,). Подобная картина также была обнаружена в частоте обонятельных исследований ().

Лишение отца влияет на принадлежность взрослого, но не на признание. (A) Субъекты, лишенные отцовства, воспитываемые только матерью (МО), проводили больше времени в параллельном контакте с сородичами во время теста на социальную принадлежность (СА), чем субъекты, воспитанные отцом и матерью (МФ).Не было обнаружено различий в частоте бокового контакта (B). Не было различий между группами в тесте социального признания (SR), в том числе по продолжительности (C) и частоте (D) обнюхивания. Данные показаны как среднее + SEM. * р <0,05; #: половая разница (p <0,05).

Тревожное поведение

В тесте EPM один субъект из группы F / MF и один субъект из группы F / MO были исключены из анализа из-за плохого качества видео, и один субъект выпал из EPM более чем на половину теста.Во время теста EPM не было никаких групповых или половых различий по каким-либо показателям тревожно-подобного поведения, включая латентность открытия руки, процент входов в открытую руку или продолжительность (). Эффект лечения был обнаружен в общем количестве записей в руки (F (1, 24) = 7,367, p <0,01) с субъектами MF, которые отображали больше записей в руки, чем субъекты MO. Затем был проведен двусторонний анализ ANCOVA для определения наличия групповых или половых различий в поведенческих измерениях при контроле локомоции (общей частоты рук).При контроле общего количества скрещиваний рук был обнаружен значительный групповой эффект для латентности открытого плеча (F (1, 23) = 0,028, p <0,05): у субъектов MO (14 ± 8 секунд) были уменьшены латентности открытого плеча по сравнению с субъектам MF (40 ± 7 секунд).

Таблица 2

Группа MF MO p
Пол Мужской Женский Мужской Женский Группа Пол G × S
Задержка открытого плеча (сек) 35.6 ± 14,4 28,9 ± 8,0 16,1 ± 6,9 28,4 ± 14,7 0,23 0,92 0,53
Продолжительность открытого плеча (%) 34,8 ± 9,1 29,7 ± 6,8 36,7 ± 7,9 22,8 ± 8,2 0,76 0,26 0,60
Частота открытого плеча (%) 28,2 ± 5,9 28,5 4,9 ± 27,7 8,8 ± 24.7 ± 7,0 0,76 0,85 0,82
Кресты всего руки (#) 27,7 ± 4,0 21,7 ± 3,0 17,0 ± 2,3 15,7 ± 1,4 0,01 0,26 0,46

Нейрохимическая экспрессия белка в гиппокампе

Рецепторы окситоцина, вазопрессина и глюкокортикоидов

Значительная группа по половому взаимодействию была обнаружена для экспрессии белка OXTR в гиппокампе (F 1, 20 =.795, p <0,05; ). Самцы MF имели более высокий уровень экспрессии OXTR, чем самки MF и самцы MO. Группа по половому взаимодействию была также обнаружена для экспрессии белка GR β в гиппокампе (F 1, 20 = 8,641, p <0,05). Самки MO имели более высокий уровень экспрессии GR β , чем самцы MO и самки MF. Существенных различий в экспрессии белков V1aR и GRα в гиппокампе не обнаружено.

Таблица 3

Уровни белка в гиппокампе

× Sic гормон и его рецепторы

Не было обнаружено различий в уровнях CRH и CRHR1 в гиппокампе (). Значительная группа по половому различию была обнаружена для экспрессии CRHR2 в гиппокампе (F 1, 20 = 8.635, р <0,05). Самцы MO имели более высокий уровень экспрессии белка CRHR2, чем самки MO, а также самцы и самки MF (). Интересно, что уровни белка CRHR2 коррелировали с CRHR1 (r (24) = 0,704, p <0,05), CRH (r (24) = 0,553, p <0,05), TrkBt (r (23 ) = 0,803, p <0,05), TrkBFL (r (22) = 0,495, p <0,05) и BDNF (r (24) = 0,502, p <0.05) уровень белка.

Отцовская депривация изменяет экспрессию белка гиппокампа взрослых и ацетилирование гистонов. (A) Самцы, которые росли только с матерью (M / MO), имели повышенную экспрессию белка рецептора рилизинг-гормона кортикотропина типа 2 (CRHR2) в гиппокампе по сравнению с самцами, которые росли как с матерью, так и с отцом (M / MF). (B) По сравнению с самцами и самками, выращенными отцом и матерью (M / MF, F / MF), самцы и самки, выращенные без отца (M / MO, F / MO), имели более высокие уровни белка нейротрофического фактора головного мозга ( BDNF), а также его рецептор, киназа рецептора тропомиозина B в усеченной форме (TrkBt) и имеющая тенденцию в полноразмерной форме (TrkBFL) в гиппокампе.(C) У субъектов с МО также были более высокие уровни белка общего гистона 3 (h4total) в гиппокампе, а также более высокие уровни ацетилирования гистонов (h4ace). Наконец, по сравнению с самками MF, самки MO имели более высокое соотношение ацетилирования гистона 3 по лизину 9 (h4K9ace) к h4total. Данные показаны как среднее + SEM. * р <0,05. Буквы алфавита указывают на результаты апостериорного теста после ANOVA. Полосы, помеченные разными буквами, значительно отличаются друг от друга.

Нейротрофический фактор головного мозга и киназа рецептора тропомиозина B

Значительные групповые эффекты были обнаружены на уровнях BDNF (F 1, 20 = 4.598, p <0,05) и TrkBt (95kd) (F 1, 14,043 = 5,078, p <0,05) в гиппокампе (). Субъекты MO имели более высокие уровни BDNF и TrkBt в гиппокампе, чем субъекты MF. Аналогичная тенденция была также обнаружена в уровне экспрессии белка TrkBFL (145 кДа) в гиппокампе (F 1, 17 = 4,055, p = 0,060). Интересно, что уровни белка BDNF в гиппокампе коррелировали с TrkBt (r (21) = 0,545, p <0.05), CRH (r (22) = 0,423, p <0,05), CRHR1 (r (22) = 0,555, p <0,05) и CRHR2 (r (22) = 0,502 , p <0,05) уровней белка и тенденции с TrkBFL (r (22) = 0,411, p = 0,057). Кроме того, уровни BDNF отрицательно коррелировали с частотой облизывания и ухода за гнездом (r (22) = -0,503, p <0,05).

Гистон 3

Значительные эффекты лечения были обнаружены на уровнях h4total (F 1, 19 = 7.680, p <0,05) и отношение h4ace к h4total (F 1, 18 = 5,885, p <0,05). У субъектов с МО были более высокие уровни h4total и h4ace / h4total по сравнению с субъектами MF (). Для h4K9ace / h4total в гиппокампе было обнаружено лечение по половому взаимодействию (F 1, 18 = 10,270, p <0,05). Самки MF имели более низкий уровень h4K9ace / h4total по сравнению с самцами MF и самками MO ().

Нейрохимическая экспрессия мРНК в гиппокампе

Это было сосредоточено только на нейрохимических маркерах, где уровни белка указывали на потенциальные групповые различия в экспрессии генов.Значительные эффекты лечения были обнаружены на уровнях CRHR2 (F 1, 19 = 10,078, p <0,01), BDNF (F 1, 17 = 4,553, p <0,05) и TrkBFL (F 1, 20 = 7,620, p <0,05) экспрессия мРНК в гиппокампе (). Субъекты MO имели более низкий уровень CRHR2, но более высокие уровни BDNF и TrkBFL, по сравнению с субъектами MF. Интересно и аналогично данным по белкам, мРНК BDNF отрицательно коррелировала с общими уровнями облизывания и ухода (r (19) = -0.533, p <0,05). Уровни BDNF также сильно коррелировали как с уровнями полной длины (r (19) = 0,616, p <0,01), так и с усеченными уровнями TrkB (r (21) = 0,627, p <0,01). Никаких половых или групповых по половому признаку взаимодействий обнаружено не было. Кроме того, не было обнаружено различий в экспрессии мРНК GRα и GRβ в гиппокампе.

Отцовская депривация изменяет мРНК гиппокампа во взрослом возрасте. Количественная полимеразная цепная реакция в реальном времени показала, что у субъектов, которые росли только с матерью (МО), были снижены уровни мРНК рецептора 2 рилизинг-гормона кортикотропина (CRHR2) в гиппокампе по сравнению с субъектами, которые воспитывались как с матерью, так и с отцом (MF ).Кроме того, у субъектов с МО были более высокие уровни мРНК для нейротрофического фактора головного мозга (BDNF) и его полноразмерного рецептора, киназы B рецептора тропомиозина (TrkBFL). Данные показаны как среднее + SEM. * р <0,05.

Обсуждение

Хорошо задокументировано, что опыт ранней жизни, включая опыт общения с родителями, может формировать когнитивные и поведенческие функции взрослых (Felitti et al., 1998; Repetti et al., 2002; Nishi et al., 2014; Sripada et al., 2014; Jensen et al., 2015; Samek et al., 2015; Ям и др., 2015). У людей присутствие отца на раннем этапе развития связано со снижением риска различных психопатологий и повышением благополучия детей (Sarkadi et al., 2008; McLanahan et al., 2013; Tikotzky et al., 2015), тогда как отсутствие отца может привести к негативным результатам, включая развитие депрессивных симптомов и экстернализирующее поведение (Phares and Compas, 1992; Culpin et al., 2013; McLanahan et al., 2013). В настоящем исследовании с использованием социально моногамных степных полевок, которые естественным образом проявляют как материнское, так и отцовское поведение, мы обнаружили, что отцовская депривация (PD) во время раннего развития оказывает долгосрочное влияние на социальную принадлежность потомства, когда они становятся взрослыми, и этот эффект зависит от поведения.Кроме того, наши данные показывают, что такой опыт БП также изменяет экспрессию нескольких нейрохимических веществ и эпигенетических маркеров в гиппокампе, указывая на их потенциальную роль в опосредовании измененного социального поведения.

PD влияет на родительскую среду

Как и ожидалось, отцы степных полевок вносили свой вклад в заботу о потомстве и демонстрировали вылизывание / уход за щенками, собирались в кучу и вынашивали, а также строили гнезда, как это делали матери, за исключением кормления грудью (Wang and Novak, 1992; Ахерн и Янг, 2009 г .; Ахерн и др., 2011). Материнское поведение не различается между группами MF и MO, что позволяет предположить, что матери не компенсируют отсутствие отца, что согласуется с предыдущими исследованиями на степных полевках (Wang, Novak, 1992; Ahern and Young, 2009; Ahern et al. al., 2011) и у других би-родительских видов, таких как octodon degus (Helmeke et al., 2009). Однако PD привел к уменьшению родительской заботы, получаемой потомством, на что указывало снижение уровней вылизывания / ухода за щенками и вынашивания, а также увеличение числа детенышей, оставленных одних в гнезде.Это изменение родительской заботы было связано с увеличением массы тела мужчин при отлучении от груди, но в нашем исследовании не привело к значительному влиянию на массу тела во взрослом возрасте. Следует отметить, что в предыдущем исследовании опыт PD был связан с более низкой массой тела щенка при отъеме у степных полевок, хотя это могло быть затруднено еженедельным обращением и внутриутробными эффектами при удалении отца примерно за 6–10 дней до помета. рождения (Ахерн и Янг, 2009).

Опыт PD способствовал социальной принадлежности

Интересным открытием настоящего исследования является то, что степные полевки PD продемонстрировали значительное увеличение контактов с сородичами во время теста на социальную принадлежность во взрослом возрасте, что указывает на то, что опыт PD на раннем этапе развития имеет длительный характер. влияние на социальную принадлежность.Важно отметить, что этот эффект не был связан с изменением социального признания, и, следовательно, эффект был специфическим для поведения. Интересно отметить, что аналогичный эффект был обнаружен у взрослых самок степных полевок, которые пережили 6 недель социальной изоляции (Lieberwirth et al., 2012), и у самцов степных полевок, потерявших партнера (Sun et al., 2014). Присутствие сородича может быть анксиолитическим, уменьшая биоповеденческие реакции тревоги у животных (Smith and Wang, 2014). Поскольку у наших полевок PD не наблюдалось увеличения своего тревожного поведения, усиление социальной принадлежности, вероятно, могло быть вызвано повышенным социальным поиском, а не преодолением стресса.Было также показано, что легкие стрессоры, например, вызванные поведенческим тестом, усиливают аффилиативное поведение у крыс и степных полевок в зависимости от пола (DeVries et al., 1996; Beery and Kaufer, 2015; Muroy et al., 2016). Стоит отметить, что в нашем исследовании самцы полевок с PD, по-видимому, демонстрировали более высокий уровень социальной принадлежности, чем самки, и это, вероятно, было движущей силой различий в лечении. У самцов мандаринских полевок опыт БП также привел к усилению контакта тела с сородичами, вероятно, из-за снижения агрессивности взрослых особей (Frazier et al., 2006; Wang et al., 2012). Действительно, у самцов степных полевок повышенная социальная принадлежность, вызванная потерей партнера, была связана со снижением агрессии (Sun et al., 2014).

Стресс на раннем этапе развития может усиливать тревожное поведение (Brunton, 2013; Maccari et al., 2014) или устойчивость к стрессовым раздражителям (Faure et al., 2007; Zhang et al., 2014; Beery and Kaufer, 2015). ; Rana et al., 2015) в зрелом возрасте. Исследования, в которых материнская депривация использовалась как фактор стресса в раннем возрасте, показали, что оба фактора увеличиваются (Ishikawa et al., 2015) и снижение тревожности во взрослом возрасте у крыс (Zhang et al., 2014). Было показано, что у моногамных грызунов БП снижает тревожное поведение у степных полевок (Ahern, Young, 2009), но усиливает такое же поведение у мандаринных полевок (Jia et al., 2009). Наши данные показывают, что опыт БП не оказал значительного влияния на тревожное поведение во время тестирования наших животных. Наша парадигма PD либо оказалась неэффективной для длительного воздействия на тревожное поведение, либо эффективно повысила устойчивость к стрессовым стимулам, связанным с тестом EPM.Следует отметить снижение двигательной активности у полевок с БП, поскольку неясно, может ли это иметь вторичное влияние на тревожное поведение. В самом деле, когда локомоция контролировалась, субъекты, воспитанные без отца, попадали в объятия EPM раньше, чем субъекты, воспитанные с обоими родителями. Было показано, что родительская депривация на раннем этапе развития влияет на двигательную активность у других би-родительских видов, таких как мартышки (Dettling et al., 2002) и мандаринки (Jia et al., 2009; Cao et al., 2014). У мандаринских полевок опыт БП также снижает двигательную активность (Jia et al., 2009).

Опыт БП изменил нейрохимическую экспрессию в гиппокампе

Были исследованы несколько нейрохимических веществ и их рецепторы в гиппокампе из-за их продемонстрированной роли в обучении и памяти, стрессовых реакциях и социальном поведении (Carter et al., 1995; Kim et al. , 2015; Lieberwirth et al., 2016). Наши данные показывают, что опыт БП повлиял на некоторые из этих маркеров нейрохимическим образом.Наиболее яркое и последовательное различие между группами было обнаружено в системе BDNF в гиппокампе. MO-полевки показали повышенную экспрессию РНК и белка BDNF и его рецепторов TrkB в гиппокампе по сравнению с контрольными полевками, выращенными обоими родителями (MF). Этот эффект, по-видимому, был одинаков как у мужчин, так и у женщин. Обширные данные показали, что стрессовые стимулы на раннем этапе развития могут вызывать изменения в системе BDNF в зависимости от области мозга и стресса. Например, отделение от матери может увеличить BDNF в гиппокампе крыс после отъема, и это связано с изменениями тревожно-подобного поведения и активности оси HPA (Faure et al., 2007; Дэниэлс и др., 2009; Сури и др., 2013). Интересно, что уровни BDNF и TrkB в гиппокампе чаще всего повышаются после отъема и снижаются в более зрелом возрасте в ответ на раннее отделение от матери у грызунов (Lee et al., 2012; Suri et al., 2013; Daskalakis et al., 2015). У взрослых крыс раннее отделение от матери снижает BDNF в гиппокампе, что приводит к нарушению памяти распознавания у самок и ухудшению рабочей памяти у самцов (Marco et al., 2013; Suri et al., 2013; Hill et al., 2014). Было обнаружено, что влияние разлучения с матерью на реакцию на стресс дополнительно опосредовано возрастом опыта разлучения с матерью и продолжительностью разлучения с матерью (Levine et al., 1991; Levine, 2005). Было высказано предположение, что повышенная активность BDNF в мозге в ответ на стресс в раннем возрасте может действовать как механизм защиты от воздействия стресса в будущем (Daniels et al., 2009; Suri et al., 2013; Daskalakis et al., 2015) . Например, раннее разделение с матерью, связанное с повышенной экспрессией BDNF в гиппокампе у крыс после отлучения от груди, связано со снижением тревожного поведения и повышением производительности в когнитивно-поведенческих задачах (Daniels et al., 2009; Сури и др., 2013). Интересно, что наши данные показывают, что опыт БП увеличивал не только BDNF, но также и усеченные, и полноразмерные изоформы рецептора TrkB у степных полевок. Это было дополнительно продемонстрировано положительной корреляцией между уровнями мРНК рецептора BDNF и TrkB, а также между уровнями белков BDNF и TrkBt (тренд с белком TrkBFL). Усеченные и полноразмерные рецепторы TrkB различными путями участвуют в регуляции роста дендритов (Yacoubian and Lo, 2000; Hartmann et al., 2004). Таким образом, опыт БП может вызывать изменения адаптивной пластичности системы BDNF в ответ на эмоциональные проблемы, связанные с отцовской депривацией, и прививать полевок против будущих стрессорных факторов, во многом подобно эффектам обогащения окружающей среды и раннего обращения с ними у других видов грызунов (Meaney et al., 1993).

Также стоит упомянуть, что наши данные указывают на положительную корреляцию уровней белка между системами BDNF и CRH в гиппокампе. Взаимодействия между системами BDNF и CRH участвуют в регуляции нейральной пластичности.Например, было показано, что CRH увеличивает или снижает уровни BDNF в зависимости от области мозга и соответственно изменяет плотность позвоночника (Bayatti et al., 2005; de la Tremblaye et al., 2016). Поскольку BDNF действует на рецепторы TrkB, регулируя рост дендритных шипов (McAllister et al., 1995; An et al., 2008), система CRH может регулировать этот процесс (Bayatti et al., 2005; de la Tremblaye et al., 2016). ), эти корреляции между маркерами BDNF и CRH могут дополнительно поддерживать идею о том, что повышенная активность BDNF, связанная с БП, может изменять плотность гиппокампа.

Опыт БП изменил экспрессию эпигенетических маркеров гиппокампа

Недавние данные показали, что опыт ранней жизни может влиять на поведение взрослых через эпигенетические механизмы (Babenko et al., 2015). Например, в крысиной модели ранней жизни изменчивости полученной материнской заботы, потомство маток с высоким уровнем облизывания / ухода за телом, по сравнению с потомками из маток с низким уровнем облизывания / ухода, более устойчиво к стрессу из-за повышенной экспрессии GR в гиппокампе, который является регулируется повышенным ацетилированием h4, в частности лизином 9, и снижением метилирования в промоторной области гена GR (Fish et al., 2004; Zhang et al., 2013). У мышей отделение от матери во время развития привело к усилению ацетилирования h4 в гиппокампе, что сопровождалось увеличением плотности и сложности шипов в области CA3 (Xie et al., 2013). Кроме того, социальный стресс, скученность и новая среда во время перипубертатно-ювенильного периода увеличивают ацетилирование h4 гиппокампа и замшелые волокна при одновременном снижении депрессивно-подобного поведения и вызванного стрессом CORT в плазме (Oztan et al., 2011). Интересным открытием нашего исследования является то, что опыт БП был связан с увеличением h4total и h4ace в гиппокампе полевок.Кроме того, БП испытывает значительное повышение уровня h4K9ace в гиппокампе у самок, но не самцов полевок. Эти данные указывают на то, что ранний опыт БП может влиять на ацетилирование гистонов в гиппокампе, возможно, в зависимости от пола, хотя мы до сих пор не знаем конкретный ген (ы), на которых происходит ацетилирование гистонов, и функциональное значение таких эпигенетических событий для мозга. и поведение. Стоит отметить, что эпигенетические события участвуют в регуляции поведения социальных связей как у самцов, так и у самок степных полевок (Wang et al., 2013; Duclot et al., 2016).

Следует упомянуть несколько проблем. Во-первых, наши данные показывают, что опыт БП также влияет на другие нейрохимические маркеры в гиппокампе полевок. Например, при PD повышается GR β у женщин, но снижается OXTR и повышается уровень белка CRHR2 у мужчин, что указывает на потенциальное полоспецифическое влияние PD на экспрессию нейрохимических рецепторов. Интересно, что уровни РНК GR α и GR β положительно коррелировали с уровнями РНК TrkB, указывая на взаимодействие между обеими системами, взаимодействие, ранее участвовавшее в регуляции синаптической пластичности (Jeanneteau and Chao, 2013).Хотя основные механизмы и функциональное значение таких эффектов до сих пор неизвестны, эти интересные данные не следует игнорировать, особенно учитывая роль GR и CRHR в стрессовых реакциях и преодолении стресса (McEwen, 2007; Bosch et al., 2009, 2016; Farrell и О’Кин, 2016; Вяс и др., 2016). Во-вторых, в нашем настоящем исследовании только определенный процент сексуально наивных самцов и самок степных полевок проявлял спонтанное родительское поведение по отношению к детенышам особого вида, что согласуется с предыдущими исследованиями (Lonstein and De Vries, 2001; Ahern and Young, 2009).К сожалению, ограниченное количество субъектов не позволило нам изучить влияние PD на конкретные модели родительского поведения. Мы полагаем, что этот интересный вопрос все же следует продолжить в дальнейших исследованиях, поскольку было показано, что индивидуальные характеристики родительского поведения могут передаваться из поколения в поколение (Francis et al., 1999; Champagne and Meaney, 2007) и регулироваться эпигенетическими механизмами (Champagne et al. др., 2006). В-третьих, убедительный лечебный эффект, наблюдаемый на систему BDNF и ацетилирование h4 в гиппокампе полевок, указывает на потенциальную эпигенетическую регуляцию BNDF и TrkB и его последующее поведение — интересный вопрос, которому следует следовать.В предыдущем исследовании эпигенетическая регуляция BDNF в гиппокампе участвовала в опосредовании депрессивноподобного поведения у мышей (Tsankova et al., 2006). Наконец, следует упомянуть одну оговорку в настоящем исследовании. Наши эксперименты изначально были предназначены для оценки влияния БП на тревожное и социальное поведение, включая социальное признание, которое отражает процессы социальной памяти. В будущих исследованиях будет интересно изучить влияние PD на задачи обучения и запоминания с помощью поведенческих тестов, таких как водный лабиринт Морриса, лабиринт Барнса и лабиринт с радиальной рукой (Lieberwirth et al., 2016).

Заключение

Данные нашего настоящего исследования показывают, что опыт БП на раннем этапе развития повлиял на социальную принадлежность потомства, когда они стали взрослыми, в зависимости от поведения. Кроме того, такой опыт PD был связан с повышенной экспрессией гена и белка BDNF и его киназы B рецептора тропомиозина, а также с уровнями общего ацетилирования гистона 3 и гистона 3 в гиппокампе. Вместе эти данные указывают на то, что отцовский опыт во время развития может изменять транскрипцию генов и синаптическую пластичность во взрослом гиппокампе потомства посредством эпигенетических механизмов.Это, в свою очередь, может служить для изменения социального аффилированного поведения во взрослом возрасте. В самом деле, было обнаружено, что PD влияет на синаптическую пластичность в зависимости от типа нейронов и областей мозга у др. Видов двупародительских грызунов, Octodon degus (Pinkernelle et al., 2009). У наших степных полевок уровни облизывания и ухода, получаемые потомством, отрицательно коррелировали с мРНК BDNF и экспрессией белка в гиппокампе. Изменения в системе BDNF гиппокампа (и ее опосредованные изменения в синаптической пластичности) у полевок с PD могут отражать компенсаторные механизмы дефицита нейрохимической и синаптической пластичности из-за снижения родительского контакта во время раннего развития.Кроме того, это может отражать адаптацию развития, служащую прививкой субъектов против будущих жизненных стрессоров (Helmeke et al., 2001).

Наконец, учитывая негативную связь между отсутствием отца в раннем возрасте и благополучием взрослых, о которой в основном сообщается в человеческой литературе (McLanahan et al., 2013), удивительно, что мы не смогли найти явных недостатков в социальном поведении прерий PD. полевки в настоящем исследовании. Это может быть связано с множеством факторов, включая неоптимальное время экспериментальных манипуляций (например,g., удаление отца) и / или поведенческое тестирование (например, подростковый возраст по сравнению с взрослой жизнью), как намекают исследования на людях (McLanahan et al., 2013). Кроме того, отсутствие отца во время развития у людей может быть связано с социальной стигмой, которая может усугублять влияние отсутствия отца на исход для взрослых, и этот фактор не будет применяться в контексте нашего исследования. Тем не менее, необходимы дальнейшие исследования для лучшего понимания последствий, а также основных нейронных и нейрохимических механизмов лишения отца на раннем этапе развития.

ОТЕЧЕСТВЕННАЯ ДЕПРИВАЦИЯ ВЛИЯЕТ НА СОЦИАЛЬНОЕ ПОВЕДЕНИЕ И НЕЙРОХИМИЧЕСКИЕ СИСТЕМЫ В ОТНОШЕНИИ СОЦИАЛЬНО МОНОГАМНОЙ ПРЕРИИ

Abstract

Ранний жизненный опыт, особенно опыт общения с родителями, имеет решающее значение для фенотипических результатов как у людей, так и у животных. Хотя влияние материнской депривации на благополучие потомства было изучено, отцовской депривации (PD) уделялось мало внимания, несмотря на документально подтвержденную связь между отсутствием отца и проблемами со здоровьем детей у людей.В настоящем исследовании мы использовали социально моногамную степную полевку ( Microtus ochrogaster ), которая демонстрирует связь пары самец-самка и заботу о двух родителях, чтобы изучить влияние БП на поведение взрослых и нейрохимическую экспрессию в гиппокампе. Испытуемые мужского и женского пола были случайным образом распределены в одну из двух экспериментальных групп, которые росли как с матерью, так и с отцом (MF) или только с матерью (MO, для получения опыта PD). Наши данные показывают, что субъекты MO меньше подвергались родительскому облику / уходу и ношению, и их оставляли одних в гнезде чаще, чем субъектов MF.Во взрослом возрасте (~ 75 дней) субъекты МО демонстрировали повышенную социальную принадлежность к сородичу по сравнению с субъектами МФ, но эти две группы не различались по социальному признанию и тревожному поведению. Интересно, что субъекты с МО продемонстрировали последовательное увеличение экспрессии как генов, так и белков нейротрофического фактора головного мозга (BDNF) и киназы рецептора тропомиозина B (TrkB), а также уровней общего ацетилирования гистона 3 и гистона 3 в гиппокампе по сравнению с MF. предметы.Кроме того, при PD повышается экспрессия белка рецептора глюкокортикоидов бета (GRβ) в гиппокампе женщин, а также повышается экспрессия белка рецептора 2 кортикотропина (CRHR2) в гиппокампе мужчин, но снижается мРНК CRHR2 у обоих полов. В совокупности наши данные предполагают, что БП оказывает длительное поведенческое воздействие на социальную принадлежность и изменяет нейрохимические системы гиппокампа в мозге полевок. Функциональная роль таких измененных нейрохимических систем в социальном поведении и потенциальное участие эпигенетических событий требует дальнейшего изучения.

Ключевые слова: родительское поведение, социальная принадлежность, гиппокамп, BDNF, окситоцин, CRH, эпигенетика

Введение

Вариации родительской среды во время развития могут серьезно влиять на фенотип взрослого человека (Heim et al., 2002; Repetti et al. ., 2002; O’Donnell et al., 2014; Samek et al., 2015). У людей, например, семейная среда детства, характеризующаяся высоким уровнем конфликтов и низким качеством привязанности, связана с уязвимостью к дефициту социальной и эмоциональной обработки (Repetti et al., 2002), а также повышение риска развития психопатологии во взрослом возрасте (Bifulco et al., 1991; Brown, Anderson, 1991; Felitti et al., 1998; Heim et al., 2002; Yam et al., 2015). ). Было показано, что отсутствие отца является фактором риска для множества негативных результатов, таких как развитие депрессивных симптомов и экстернализирующее поведение (Culpin et al., 2013; McLanahan et al., 2013). Напротив, повышенная материнская отзывчивость связана с ускорением развития ребенка, включая социальную, эмоциональную и когнитивную компетентность (Landry et al., 2006). Следовательно, ранняя родительская среда предсказывает восприимчивость и устойчивость к психопатологии взрослых (Smith and Prior, 1995; O’Donnell et al., 2014). Исследования с использованием функциональной магнитно-резонансной томографии (фМРТ) выявили некоторые области мозга, включая гиппокамп, а также поясную и префронтальную коры, которые подвержены неблагоприятным воздействиям в раннем детстве (Brooks et al., 2014; Elton et al., 2014 ; Sripada et al., 2014; Jensen et al., 2015). Однако нейрохимические системы, на которые влияют нарушения в раннем периоде жизни, менее известны из-за сложности, присущей исследованиям на людях.

Модели на животных, демонстрирующие влияние опыта ранней жизни на исходы у взрослых, показали высокую предсказательную ценность и достоверность, а также позволили получить представление о нейронных механизмах. Исследования на крысах и мышах показали, что пренатальный стресс или разлучение с матерью приводит к усилению тревожного и депрессивного поведения у взрослых потомков, а также к усилению нейроэндокринной реакции на стресс с множеством нейрохимических веществ, действующих в областях мозга, участвующих в стрессовых ответах. (Плоцкий, Мини, 1993; Прайс, Фелдон, 2003; Дэниэлс и др., 2004; Binder et al., 2011; Barbosa Neto et al., 2012). Примечательно, что изменения нейрохимических веществ, участвующих в пластичности и экспрессии генов, были обнаружены в гиппокампе (Suri et al., 2013; Nishi et al., 2014; Sousa et al., 2014; Shin et al., 2016) — области мозга. важны для обучения и памяти, а также для регуляции стрессовых реакций посредством взаимодействия с осью гипоталамуса и гипофиза надпочечников (HPA) (Kim et al., 2015). Например, разделение с матерью связано с изменениями в экспрессии нейротрофических факторов в гиппокампе потомства, включая нейротрофический фактор головного мозга (BDNF) и его рецепторную киназу рецептора тропомиозина B (TrkB), а также изменение производительности в когнитивных задачах, зависимых от гиппокампа. (Марко и др., 2013; Сури и др., 2013; Hill et al., 2014). Кроме того, взрослое потомство самок крыс, которое в процессе развития подвергалось большему вылизыванию / уходу со стороны матери, демонстрировало более высокие уровни материнского облизывания / ухода за своим собственным потомством, но более низкие уровни тревожного поведения, экспрессии вызванного стрессом циркулирующего кортикостерона и глюкокортикоидных рецепторов (GR). в гиппокампе, по сравнению с теми, которые подвергались меньшему вылизыванию / уходу со стороны матери во время развития (Liu et al., 1997; Francis et al., 1999).Интересно, что эпигенетические события были вовлечены в опосредование эффектов материнской среды на нейрохимическую экспрессию в гиппокампе и связанное с ним поведение у взрослого потомства (Fish et al., 2004; Champagne et al., 2006; Pan et al., 2014; Wang et al. ., 2014).

В то время как данные исследований на животных выявили новые знания о влиянии материнской среды на исход для взрослых и лежащих в основе нейрохимических механизмов, влияние отцовской депривации (PD) изучено меньше.У людей отцовский уход связан с благополучием взрослых, и было обнаружено, что БП связана с множеством отрицательных результатов (McLanahan et al., 2013). Кроме того, согласно отчетам Бюро переписи населения США и Центра по контролю за заболеваниями, число детей, живущих в семьях, где отсутствуют отцы, широко распространено и увеличивается в Соединенных Штатах, что соответствует меньшему количеству контактов между отцом и потомством (Бюро переписей США, 2012; Джонс и Мошер, 2013). Учитывая, что БП широко распространена и увеличивается в нашем обществе, крайне важно понимать нейронные механизмы, лежащие в основе негативной связи между отсутствием отца в раннем возрасте и благополучием взрослых для профилактики и лечения связанных психопатологий.В то время как обычные лабораторные крысы и мыши не могут служить подходящими моделями, поскольку они от природы не проявляют отцовского поведения, появление социально моногамной модели степной полевки ( Microtus ochrogaster ) дало возможность изучить родительское поведение самцов и его влияние на когнитивные способности потомства. и поведенческие функции, а также лежащие в основе нейрохимические механизмы.

Луговая полевка — это вид грызунов, который демонстрирует поведенческие черты социальной моногамии, включая долгосрочную привязанность между партнерами противоположного пола (парная связь) (Williams et al., 1992; Гетц и Картер, 1996; Lim et al., 2004) и, таким образом, была создана в качестве животной модели для изучения нейрохимической регуляции социальной привязанности (Carter et al., 1995; Young et al., 1998). Отцы луговых полевок вносят свой вклад в уход за своими детенышами, демонстрируя полный спектр материнского поведения, за исключением кормления (Wang and Novak, 1992; Wang and Insel, 1996). Кроме того, PD влияет на поведение потомков степной полевки: уменьшая проявление аллопатического поведения подростков по отношению к своим младшим братьям и сестрам (Wang, Novak, 1994) и ослабляя их способность образовывать парные связи во взрослом возрасте (Ahern and Young, 2009; Ahern et al. al., 2011). В настоящем исследовании мы стремились охарактеризовать поведенческие и нейробиологические последствия отцовской депривации у степных полевок. Мы сравнили взрослых самцов и самок полевок, которые выросли с отцом или без него, и изучили их социальное и тревожное поведение, а также экспрессию генов нескольких нейрохимических веществ в гиппокампе, которые участвовали в регуляции стрессоустойчивости и дефицита памяти в ответ. к стрессовому жизненному опыту. Мы предположили, что в отсутствие раннего отцовского опыта полевки будут демонстрировать измененное социальное и тревожное поведение, связанное с изменениями в нейрохимических системах гиппокампа.

Экспериментальные процедуры

Экспериментальные животные

Все животные, использованные в наших экспериментах, были степными полевками ( M. ochrogaster ), выращенными в племенной колонии, расположенной в Университете штата Флорида. Животные имели доступ к пище и воде ad libitum , и клетки поддерживали в режиме 14:10 свет: темнота с включенным светом в 07:00. Субъекты были потомками взрослых самцов и самок степных полевок, которых спаривали в начале экспериментировали и проявили сексуальную наивность при объединении в пары.Пары животных содержали в больших поликарбонатных клетках (45 × 22 × 20 см), выстланных подстилкой из кедровой щепы, и два хлопковых гнезда были предоставлены для идентификации гнезда. Пятнадцать пар родили 56 потомков в течение пяти дней. При рождении помета (1-й постнатальный день: PND1) отцы оставались с партнерами-самками в домашних клетках (n = 8 пар) или были навсегда удалены из домашних клеток (n = 7 пар). Таким образом, субъекты были размещены либо с матерью и отцом (MF; n = 31), либо с матерью только для создания опыта отцовской депривации (MO; n = 25) от PND1 до PND21.Примечательно, что во время родов мы удаляли отца из каждого второго помета, чтобы группы лечения были созданы сбалансированным образом. При отлучении от груди (PND21) субъектов взвешивали и размещали до достижения зрелого возраста с представителем того же пола, который прошел такое же экспериментальное лечение. Субъектам были присвоены идентификационные номера, и половине субъектов проткнули уши, чтобы отличить их от своих товарищей по клетке. Все эксперименты проводились в соответствии с руководящими принципами Институционального комитета по уходу и использованию животных Университета штата Флорида.

Выборочные проверки

Выборочные проверки проводились утром (08:30) и вечером (19:00) ежедневно между PND2 и PND21 на основании ранее опубликованных протоколов (Hammock et al., 2005; Ahern and Young, 2009; Ahern et al. , 2011). Каждая выборочная проверка состояла из пяти поведенческих проверок с пятиминутными интервалами. Во время выборочных проверок исследователь наблюдал за поведением родителей в последовательном порядке и записывал итоговые отметки, соответствующие наблюдаемому поведению, на листе бумаги, который позже был перенесен в документ SPSS.Порядок клетки был уравновешен между проверками. На PND1 на спинах отцов в группе MF были сбриты клочки шерсти, чтобы отличить их от матерей. Оцениваемые поведенческие критерии включали уход, вылизывание / уход, сбивание в кучу и вынашивание детенышей, а также строительство гнезда, самообслуживание и случаи, когда каждый родитель находился либо в гнезде, либо вне гнезда. Хаддлинг засчитывался, когда отец парил над своими детенышами с изогнутой спиной. Поскольку кучка всегда сопровождается расположением детенышей вентральнее от родителя, сбивание матери сделало невозможным с уверенностью определить, были ли прикреплены к соску какие-либо детеныши.Таким образом, скучивание матери оценивалось как кормление / скучивание. Вынашивание щенка определялось, когда родитель носил щенка через рот.

Масса тела

Все субъекты были взвешены при отъеме от груди (PND21) и во взрослом возрасте. Два самца MF были обнаружены мертвыми в своей домашней клетке вскоре после отлучения от груди, поэтому их данные были исключены из анализа данных. Вес всех взрослых измерялся в один и тот же день, то есть как минимум за два дня до начала первого поведенческого теста для каждого испытуемого, в течение которого возраст испытуемых варьировался от 68 до 73 дней.

Поведенческие тесты

Субъекты были разделены на две когорты, каждая из которых состояла из равного числа субъектов в пометах. Субъекты в когорте 1 (M / MF; n = 6, F / MF; n = 11, M / MO; n = 6, F / MO; n = 7) прошли через родительское поведение (PB), социальную принадлежность (SOA ), социальное признание (SOR) и крестообразный лабиринт (EPM), соответственно, с одним тестом в день в течение четырехдневного периода. Благодаря количеству испытуемых и экспериментальных групп, нескольким поведенческим тестам и узкому окну для каждого поведенческого теста нам удалось начать первый день поведенческого тестирования для каждого испытуемого, когда они достигли PND74-76.Каждый поведенческий тест начинался примерно в одно и то же время каждый день, и все поведенческие тесты проводились между 09:00 и 15:00 в комнате для поведенческих тестов, контролируемой по освещенности (около 300 лк), как описано ранее (Sun et al., 2014). Поведение записывалось на видео и впоследствии оценивалось с помощью программного обеспечения JWatcher (NIH, Bethesda, MD) исследователем, не знающим экспериментального состояния испытуемых. На следующий день после последнего поведенческого теста субъектов из когорты 1 забивали.Чтобы избежать потенциального воздействия поведенческого тестирования на нейрохимическую экспрессию в головном мозге, испытуемые из когорты 2 (n = 24; по 6 испытуемых в каждой из 4 экспериментальных групп) не проходили поведенческие тесты, а оставались в домашних клетках без каких-либо нарушений до PND79. во время которого субъекты были усыплены для сбора мозгов.

Тест родительского поведения

Родительское поведение испытуемого тестировалось по отношению к сородичу в течение 10 минут с использованием установленного протокола (Lonstein and De Vries, 1999).Аппарат для испытаний состоял из поликарбонатной клетки (45 × 22 × 20 (В) см), выложенной подстилкой из кедровой стружки. Испытуемого помещали в центр клетки на 10 минут для привыкания. После этого новый двухдневный стимулирующий щенок был помещен в самый дальний от субъекта угол испытательной клетки. Стимулирующий щенок был потомком селекционеров колонии и был очищен дистиллированной водой и ватным тампоном непосредственно перед тестом. Родительское поведение оценивалось как вылизывание / уход за щенком, сбивание в кучу и ношение щенка.Также оценивались другие виды поведения, такие как строительство гнезда, уход за собой, передвижение и отдых. В тех случаях, когда субъект проявлял агрессивное поведение по отношению к щенку, исследователь немедленно вмешивался, чтобы удалить щенка, и поведенческий тест прекращался.

Тест на социальную принадлежность

Социальная принадлежность (SOA) субъекта к тому же половому сородичу также проверялась с использованием установленного метода (Pan et al., 2009). Вкратце, испытательная установка состояла из двух поликарбонатных камер (13 × 18 × 29 (В) см), соединенных полой трубкой (7.5 × 16 см). Стимулирующее животное того же пола и возраста, что и субъект, было привязано в одной камере, и субъект был помещен в пустую камеру и имел доступ ко всему устройству для тестирования в течение 1-часового теста. К полой трубке были прикреплены индивидуальные световые датчики и подключены к компьютеру для записи входа субъекта в каждую камеру. Регистрировали время, проведенное субъектом в каждой клетке и переходе клетки, а также продолжительность и частоту непосредственного контакта со стимулированным животным.

Тест на социальное признание

Социальное признание (SOR) субъекта проверялось с использованием установленного метода (Lieberwirth et al., 2012). Тест состоял из четырех попыток, каждое по пять минут и разделенных пятиминутным интервалом. Субъектам позволяли привыкнуть к испытательному устройству (поликарбонатная клетка 25 × 45 × 20 (В) см) в течение 10 минут. В начале каждого испытания молодое стимулирующее животное помещалось в испытательную клетку с субъектом. Все стимулированные животные были того же пола, что и испытуемые, и возрастом примерно 30 дней.В конце каждого испытания стимулирующее животное удаляли из испытательной клетки и помещали в отдельную клетку, в то время как субъект оставался в испытательной клетке. Во время испытаний 1-3 одно и то же животное-раздражитель помещалось в экспериментальную клетку. Во время испытания 4 использовали другое стимулирующее животное. Регистрировали продолжительность и частоту обнюхивания (включая аногенитальное обнюхивание и обнюхивание головы).

Тест приподнятого крестообразного лабиринта

Тревожное поведение субъекта было проверено в тесте EPM (Liu et al., 2014). Вкратце, испытательная установка (Columbus Instruments, Колумбус, Огайо, США) состояла из двух открытых плеч и двух закрытых плеч (35 × 6,5 × 15 (В) см), которые пересекаются посередине и подняты на 45 см от пола. В начале 5-минутного теста испытуемого помещают в центр платформы лицом к закрытой руке. Регистрировали время, которое испытуемые провели в каждой руке и в центре сцены, входы в каждую руку и задержку входа в открытую руку.

Обработка тканей

Субъекты были быстро обезглавлены.Мозги извлекали, немедленно замораживали на сухом льду и впоследствии хранили при -80 ° C. Коронковые срезы (толщиной 200 мкм) вырезали на криостате и помещали на предметные стекла для размораживания. Двусторонние тканевые штампы диаметром 1 мм из заднего медиального гиппокампа были взяты при -40 ° C, а затем сохранены при -80 ° C до дальнейшей обработки. Белок и РНК выделяли из 14 точек ткани заднего медиального гиппокампа с использованием Tri-Reagent в соответствии с инструкциями производителя (Центр молекулярных исследований, Цинциннати, Огайо).Белки хранили в буфере Laemmle при -80 ° C. РНК растворяли в воде DEPC и также хранили при -80 ° C до дальнейшей обработки.

Вестерн-блоттинг

Образцы белка по 20 мкг каждый загружали в полиакриламидные гели с 12% додецилсульфатом натрия (SDS) (Bio-Rad) для электрофореза. Белки прогоняли на гелях при 80 В (В) в течение приблизительно 20 минут, а затем при 120 В в течение 1 часа. Затем белки переносили на нитроцеллюлозные мембраны при 100 В в течение 1 часа при 4 ° C и затем блокировали либо в 5% молоке, либо в Superblock (Bio-Rad).Мембраны инкубировали при 4 ° C в течение 1-2 дней со следующими первичными антителами: киназа B кроличьего антитропомиозинового рецептора (TrkB) (1: 200, Santa Cruz), кроличий анти-мозговой нейротрофический фактор (BDNF) (1: 200, Санта-Крус), кроличий антиглюкокортикоидный рецептор (GR) (1: 1000, Санта-Крус), козий антиокситоциновый рецептор (OXTR) (1: 500, Санта-Крус), кроличий рецептор антикортикотропин-рилизинг-гормона 1 (CRHR1 ) (1: 300, Novus Biologicals) и 2 (CRFR2) (1: 500, Novus Biologicals), козий рецептор против вазопрессина (V1aR) (1: 300, Санта-Крус), кроличий антикортикотропин-рилизинг-гормон (CRH) (1: 300, Proteintech), кроличий антиглицеральдегид-3-фосфатдегидрогеназа (GAPDH) (1: 1000, Santa Cruz), мышиный антител к общему гистону 3 (h4total) (Millipore, 1: 1000), кроличий антигистон 3 ацетилирование (h4ace) (1: 1000, Millipore) или ацетилирование кроличьего антигистона 3 по лизину 9 (h4K9ace) (1: 1000, Millipore).После этого мембраны промывали фосфатно-солевым буфером (PBS) и инкубировали в течение 1 часа со следующими вторичными антителами: конъюгированные с пероксидазой хрена (HRP) антитела кролика (1: 20000, Санта-Крус), HRP-антитела коз (Санта-Крус, 1). : 20,000), DYLight 550 против кролика (1: 20,000, Thermo Fisher Scientific), DYLight 650 против мыши (1: 20,000, Thermo Fisher Scientific) или против IRDye 680 против кролика (1: 20,000 Li-Cor Biosciences). Затем мембраны снова промывали, и мембраны, которые инкубировали с конъюгированным с HRP вторичным антителом, дополнительно инкубировали в хемилюминесцентном субстрате HRP (субстрат SuperSignal West Dura Extended Duration Substrate, Thermo Fisher Scientific) в течение 10 минут.Все белки визуализировали на системе ChemiDoc MP (Bio-Rad). Специфичность первичных антител была подтверждена в предыдущих исследованиях на полевках, а также на крысах и мышах в отношении системы CRH и h4k9ace, которые имеют высокую гомологию с степными полевками (Huang et al., 2009; Greenberg et al., 2012; Gupta -Agarwal et al., 2012; Wang et al., 2013; Wu et al., 2014; Galinato et al., 2015; Duclot et al., 2016; Yadawa and Chaturvedi, 2016). Следует отметить, что было показано, что антитело OTR способно обнаруживать белок OTR в ткани мозга полевок посредством нейтрализации антител блокирующим пептидом OTR, но снижение сигнала при инкубации с блокирующим пептидом в течение ночи не было полным (Duclot et al., 2016). Следовательно, следует соблюдать осторожность при интерпретации данных. Западные полосы были количественно определены с помощью ImageJ (NIH, Bethesda Maryland). Все данные были нормализованы в пределах одной и той же мембраны до GAPDH, в то время как h4ace и h4K9ace были дополнительно нормализованы до h4total. Все данные выражены в процентах от среднего значения для групп MF.

Полуколичественная полимеразная цепная реакция в реальном времени (RT-PCR)

400 нг общей РНК было обработано на MyCycler Thermal Cycler (Bio Rad) для синтеза комплементарной ДНК с помощью набора для синтеза первой цепи кДНК Cloned AMV (Invitrogen , Thermo Fisher Scientific) в соответствии с инструкциями производителя.Все образцы праймеров и кДНК разбавляли 1/10, загружали в трех экземплярах с помощью SYBR Green Supermix (Bio Rad) в 384-луночный планшет для ПЦР и запускали в термоциклере CFX 384 (Bio Rad). Результаты были нормализованы к эталонному гену никотинамидадениндинуклеотиддегидрогеназы (НАДН). Последовательности праймеров приведены в. Специфичность праймера подтверждали анализом кривой плавления. Данные представлены как процентное изменение от контролей (группы MF).

Таблица 1

Последовательности праймеров (5 ‘- 3’)

MF MO p
Мужской Женский Мужской Женский Группа Пол
OXTR 146.3 ± 35,9 53,7 ± 13,9 68,6 ± 17,6 109,4 ± 21,6 0,80 0,35 0,01
V1aR 101,7 ± 9,3 98,3 ± 7,3 98,3 115,3 111,8 ± 10,4 0,38 0,03 0,39
GRα 106,4 ± 34,2 92,3 ± 22,7 96,5 ± 35,7 208,6 ± 53,0 0.19 0,23 0,13
GRβ 116,4 ± 16,2 83,6 ± 11,7 79,1 ± 9,9 135,3 ± 20,4 0,64 0,45 0,01
91 900CTAG 900CTAG 9CTG 99091 ACGCGGACTTGTAC
Мишень Последовательность праймеров
GRα вперед GGTTGGTGCTTCTACCCTGA
обратная 900GTC90 900GTC 900GTC 900
GR β вперед ACAGACTTTCGGCTTCTGGA
задний ход AAAGGTGCTTTTGGTCTGTGG
CRHR190
CRHR2 вперед CAGCTTCCACAGCATCAAGC
назад CACCCAAGGGTCAGTGTAGC
BDNF CCATA вперед
обратный TTGGAGATGTGGTGGAGAGG
TrkBFL вперед TATGCTGTGGTGGTGATTGC
обратный TTGGAGATGTGGTGGAGAGG
TrkBt вперед GGCTGCTCCTAACCTCACTG
обратный TTCACGGAATCCTGGTCTTC
NADH прямой CTATTAATCCCCGCCTGACC
обратный GGAGCTCGATTGT908 IBM) и p <0.05 был признан статистически значимым. Все данные были проверены на однородность дисперсии и либо нормализованы, если необходимо, преобразованием квадратного корня, если не указано иное, либо проанализированы с помощью непараметрических тестов. Независимые выборочные T-тесты были проведены для сравнения поведения выборочной проверки между группами MF и MO, матерями и отцами в группе MF и матерями из групп MO и MF, соответственно. Для анализа данных использовались итоговые отметки по сумме утренних и вечерних выборочных проверок по каждому поведению.Все остальные данные были проанализированы с помощью двустороннего дисперсионного анализа (пол группы X), за исключением данных социального признания, которые были проанализированы с помощью двустороннего дисперсионного анализа с повторными измерениями (испытания). Значимые взаимодействия отслеживали с помощью апостериорных тестов по методу наименьшего значимого различия (LSD) Фишера. Данные представлены как среднее + SEM.

Результаты

Выборочные проверки

При условии MF () были обнаружены половые различия — матери вылизывали / ухаживали за своими щенками (t (14) = 4,426, p <0.001) и принял нависшую позу над детенышами (медсестра / группа) (t (14) = 8,216, p <0,001) больше, чем отцы. Не было обнаружено различий в другом поведении, включая ношение щенков, строительство гнезда и уход за собой. Матери в условиях MF и MO не различались ни по одному измеренному поведению (). Интересно, что щенков в состоянии MF вылизывали / ухаживали (t (13) = 2,365, p <0,05) и переносили (H (2) = 4,801, p <0.05) больше родителями и реже оставались в гнезде одних (t (13) = 3,429, p <0,01) по сравнению с детенышами в состоянии MO (). При отъеме (PND 21) самцы MF весили меньше по сравнению с самками MF, а также самцами и самками MO (F (1, 49) = 6,884, p <0,05) (). Однако в зрелом возрасте самцы весили больше, чем самки, независимо от условий выращивания (F (1, 49) = 6,596, p <0,05).

Лишение отца влияет на уход за потомством.(A) Когда присутствуют и мать, и отец (MF), матери демонстрируют больше вылизывания / ухода за щенком и занимают общую позицию (медсестра / тусовка) над щенками по сравнению с отцами, но они не различаются по уровням вынашивания щенков, гнезд построение или уход за собой. (B) Не было различий в облизывании щенков и уходе за ними, уходе за ними, ношении щенков, строительстве гнезд и самообслуживании между матерями MF и только матерями (MO) без отца. (C) Были более низкие уровни направленного облизывания и ухода за щенком, а также ношения щенка в гнездах MO по сравнению с гнездами MF.Кроме того, было больше случаев, когда потомство оставалось одного в гнезде в состоянии MO. (D) Наконец, самцы MF весили меньше при отъеме (PND21), в то время как самцы MO весили так же, как и самки. В зрелом возрасте субъекты мужского пола весят больше, чем субъекты женского пола, независимо от условий выращивания. Данные показаны как среднее + SEM. * р <0,05, ** р <0,01. Буквы алфавита указывают на результаты апостериорного теста после ANOVA. Полосы, помеченные разными буквами, значительно отличаются друг от друга.

Поведенческие тесты

Число субъектов в каждой экспериментальной группе, которые прошли следующие поведенческие тесты, включало 6 M / MF, 6 M / MO, 11 F / MF и 7 F / MO. Все испытуемые в когорте 1 прошли все поведенческие тесты, и все их данные представлены в отчете, если не указано иное.

Родительское поведение

Во время родительского поведенческого теста 33,7% (4/11) женщин и 50% (3/6) мужчин в группе MF, а также 28,6% (2/7) женщин и 33,4% (2/6) мужчин в группе МО проявили спонтанное родительское поведение.Не было обнаружено никаких групповых и половых различий в процентном отношении субъектов, проявляющих родительское поведение. Из-за ограниченного числа субъектов, демонстрирующих родительское поведение, мы не смогли провести статистический анализ конкретного поведения.

Социальная принадлежность и признание

В тесте SOA два субъекта из группы M / MO были исключены из анализа из-за низкого качества видеозаписи. Выявлены достоверные групповые и половые различия в продолжительности параллельного контакта с животным-стимулом ().Субъекты МО проводили больше времени в параллельном контакте с животным-стимулом, чем субъекты МФ (F (1, 24) = 4,511, p <0,05). Кроме того, самцы чаще контактировали со стимулирующим животным по сравнению с самками (F (1, 24) = 5,756, p <0,05). По продолжительности контакта не было обнаружено значимой группы по половому взаимодействию. Различий в частоте социальных контактов не обнаружено (). В тесте SOR не было обнаружено никаких групповых и половых различий в продолжительности и частоте социального обнюхивания ().Все субъекты продемонстрировали уменьшение продолжительности обонятельного исследования стимула животного, неоднократно предъявляемого в испытаниях 1-3, а затем увеличенного обонятельного исследования после предъявления нового стимульного животного во время испытания 4 (F 1, 75 = 19,985, p <0,001 ,). Подобная картина также была обнаружена в частоте обонятельных исследований ().

Лишение отца влияет на принадлежность взрослого, но не на признание. (A) Субъекты, лишенные отцовства, воспитываемые только матерью (МО), проводили больше времени в параллельном контакте с сородичами во время теста на социальную принадлежность (СА), чем субъекты, воспитанные отцом и матерью (МФ).Не было обнаружено различий в частоте бокового контакта (B). Не было различий между группами в тесте социального признания (SR), в том числе по продолжительности (C) и частоте (D) обнюхивания. Данные показаны как среднее + SEM. * р <0,05; #: половая разница (p <0,05).

Тревожное поведение

В тесте EPM один субъект из группы F / MF и один субъект из группы F / MO были исключены из анализа из-за плохого качества видео, и один субъект выпал из EPM более чем на половину теста.Во время теста EPM не было никаких групповых или половых различий по каким-либо показателям тревожно-подобного поведения, включая латентность открытия руки, процент входов в открытую руку или продолжительность (). Эффект лечения был обнаружен в общем количестве записей в руки (F (1, 24) = 7,367, p <0,01) с субъектами MF, которые отображали больше записей в руки, чем субъекты MO. Затем был проведен двусторонний анализ ANCOVA для определения наличия групповых или половых различий в поведенческих измерениях при контроле локомоции (общей частоты рук).При контроле общего количества скрещиваний рук был обнаружен значительный групповой эффект для латентности открытого плеча (F (1, 23) = 0,028, p <0,05): у субъектов MO (14 ± 8 секунд) были уменьшены латентности открытого плеча по сравнению с субъектам MF (40 ± 7 секунд).

Таблица 2

Группа MF MO p
Пол Мужской Женский Мужской Женский Группа Пол G × S
Задержка открытого плеча (сек) 35.6 ± 14,4 28,9 ± 8,0 16,1 ± 6,9 28,4 ± 14,7 0,23 0,92 0,53
Продолжительность открытого плеча (%) 34,8 ± 9,1 29,7 ± 6,8 36,7 ± 7,9 22,8 ± 8,2 0,76 0,26 0,60
Частота открытого плеча (%) 28,2 ± 5,9 28,5 4,9 ± 27,7 8,8 ± 24.7 ± 7,0 0,76 0,85 0,82
Кресты всего руки (#) 27,7 ± 4,0 21,7 ± 3,0 17,0 ± 2,3 15,7 ± 1,4 0,01 0,26 0,46

Нейрохимическая экспрессия белка в гиппокампе

Рецепторы окситоцина, вазопрессина и глюкокортикоидов

Значительная группа по половому взаимодействию была обнаружена для экспрессии белка OXTR в гиппокампе (F 1, 20 =.795, p <0,05; ). Самцы MF имели более высокий уровень экспрессии OXTR, чем самки MF и самцы MO. Группа по половому взаимодействию была также обнаружена для экспрессии белка GR β в гиппокампе (F 1, 20 = 8,641, p <0,05). Самки MO имели более высокий уровень экспрессии GR β , чем самцы MO и самки MF. Существенных различий в экспрессии белков V1aR и GRα в гиппокампе не обнаружено.

Таблица 3

Уровни белка в гиппокампе

× Sic гормон и его рецепторы

Не было обнаружено различий в уровнях CRH и CRHR1 в гиппокампе (). Значительная группа по половому различию была обнаружена для экспрессии CRHR2 в гиппокампе (F 1, 20 = 8.635, р <0,05). Самцы MO имели более высокий уровень экспрессии белка CRHR2, чем самки MO, а также самцы и самки MF (). Интересно, что уровни белка CRHR2 коррелировали с CRHR1 (r (24) = 0,704, p <0,05), CRH (r (24) = 0,553, p <0,05), TrkBt (r (23 ) = 0,803, p <0,05), TrkBFL (r (22) = 0,495, p <0,05) и BDNF (r (24) = 0,502, p <0.05) уровень белка.

Отцовская депривация изменяет экспрессию белка гиппокампа взрослых и ацетилирование гистонов. (A) Самцы, которые росли только с матерью (M / MO), имели повышенную экспрессию белка рецептора рилизинг-гормона кортикотропина типа 2 (CRHR2) в гиппокампе по сравнению с самцами, которые росли как с матерью, так и с отцом (M / MF). (B) По сравнению с самцами и самками, выращенными отцом и матерью (M / MF, F / MF), самцы и самки, выращенные без отца (M / MO, F / MO), имели более высокие уровни белка нейротрофического фактора головного мозга ( BDNF), а также его рецептор, киназа рецептора тропомиозина B в усеченной форме (TrkBt) и имеющая тенденцию в полноразмерной форме (TrkBFL) в гиппокампе.(C) У субъектов с МО также были более высокие уровни белка общего гистона 3 (h4total) в гиппокампе, а также более высокие уровни ацетилирования гистонов (h4ace). Наконец, по сравнению с самками MF, самки MO имели более высокое соотношение ацетилирования гистона 3 по лизину 9 (h4K9ace) к h4total. Данные показаны как среднее + SEM. * р <0,05. Буквы алфавита указывают на результаты апостериорного теста после ANOVA. Полосы, помеченные разными буквами, значительно отличаются друг от друга.

Нейротрофический фактор головного мозга и киназа рецептора тропомиозина B

Значительные групповые эффекты были обнаружены на уровнях BDNF (F 1, 20 = 4.598, p <0,05) и TrkBt (95kd) (F 1, 14,043 = 5,078, p <0,05) в гиппокампе (). Субъекты MO имели более высокие уровни BDNF и TrkBt в гиппокампе, чем субъекты MF. Аналогичная тенденция была также обнаружена в уровне экспрессии белка TrkBFL (145 кДа) в гиппокампе (F 1, 17 = 4,055, p = 0,060). Интересно, что уровни белка BDNF в гиппокампе коррелировали с TrkBt (r (21) = 0,545, p <0.05), CRH (r (22) = 0,423, p <0,05), CRHR1 (r (22) = 0,555, p <0,05) и CRHR2 (r (22) = 0,502 , p <0,05) уровней белка и тенденции с TrkBFL (r (22) = 0,411, p = 0,057). Кроме того, уровни BDNF отрицательно коррелировали с частотой облизывания и ухода за гнездом (r (22) = -0,503, p <0,05).

Гистон 3

Значительные эффекты лечения были обнаружены на уровнях h4total (F 1, 19 = 7.680, p <0,05) и отношение h4ace к h4total (F 1, 18 = 5,885, p <0,05). У субъектов с МО были более высокие уровни h4total и h4ace / h4total по сравнению с субъектами MF (). Для h4K9ace / h4total в гиппокампе было обнаружено лечение по половому взаимодействию (F 1, 18 = 10,270, p <0,05). Самки MF имели более низкий уровень h4K9ace / h4total по сравнению с самцами MF и самками MO ().

Нейрохимическая экспрессия мРНК в гиппокампе

Это было сосредоточено только на нейрохимических маркерах, где уровни белка указывали на потенциальные групповые различия в экспрессии генов.Значительные эффекты лечения были обнаружены на уровнях CRHR2 (F 1, 19 = 10,078, p <0,01), BDNF (F 1, 17 = 4,553, p <0,05) и TrkBFL (F 1, 20 = 7,620, p <0,05) экспрессия мРНК в гиппокампе (). Субъекты MO имели более низкий уровень CRHR2, но более высокие уровни BDNF и TrkBFL, по сравнению с субъектами MF. Интересно и аналогично данным по белкам, мРНК BDNF отрицательно коррелировала с общими уровнями облизывания и ухода (r (19) = -0.533, p <0,05). Уровни BDNF также сильно коррелировали как с уровнями полной длины (r (19) = 0,616, p <0,01), так и с усеченными уровнями TrkB (r (21) = 0,627, p <0,01). Никаких половых или групповых по половому признаку взаимодействий обнаружено не было. Кроме того, не было обнаружено различий в экспрессии мРНК GRα и GRβ в гиппокампе.

Отцовская депривация изменяет мРНК гиппокампа во взрослом возрасте. Количественная полимеразная цепная реакция в реальном времени показала, что у субъектов, которые росли только с матерью (МО), были снижены уровни мРНК рецептора 2 рилизинг-гормона кортикотропина (CRHR2) в гиппокампе по сравнению с субъектами, которые воспитывались как с матерью, так и с отцом (MF ).Кроме того, у субъектов с МО были более высокие уровни мРНК для нейротрофического фактора головного мозга (BDNF) и его полноразмерного рецептора, киназы B рецептора тропомиозина (TrkBFL). Данные показаны как среднее + SEM. * р <0,05.

Обсуждение

Хорошо задокументировано, что опыт ранней жизни, включая опыт общения с родителями, может формировать когнитивные и поведенческие функции взрослых (Felitti et al., 1998; Repetti et al., 2002; Nishi et al., 2014; Sripada et al., 2014; Jensen et al., 2015; Samek et al., 2015; Ям и др., 2015). У людей присутствие отца на раннем этапе развития связано со снижением риска различных психопатологий и повышением благополучия детей (Sarkadi et al., 2008; McLanahan et al., 2013; Tikotzky et al., 2015), тогда как отсутствие отца может привести к негативным результатам, включая развитие депрессивных симптомов и экстернализирующее поведение (Phares and Compas, 1992; Culpin et al., 2013; McLanahan et al., 2013). В настоящем исследовании с использованием социально моногамных степных полевок, которые естественным образом проявляют как материнское, так и отцовское поведение, мы обнаружили, что отцовская депривация (PD) во время раннего развития оказывает долгосрочное влияние на социальную принадлежность потомства, когда они становятся взрослыми, и этот эффект зависит от поведения.Кроме того, наши данные показывают, что такой опыт БП также изменяет экспрессию нескольких нейрохимических веществ и эпигенетических маркеров в гиппокампе, указывая на их потенциальную роль в опосредовании измененного социального поведения.

PD влияет на родительскую среду

Как и ожидалось, отцы степных полевок вносили свой вклад в заботу о потомстве и демонстрировали вылизывание / уход за щенками, собирались в кучу и вынашивали, а также строили гнезда, как это делали матери, за исключением кормления грудью (Wang and Novak, 1992; Ахерн и Янг, 2009 г .; Ахерн и др., 2011). Материнское поведение не различается между группами MF и MO, что позволяет предположить, что матери не компенсируют отсутствие отца, что согласуется с предыдущими исследованиями на степных полевках (Wang, Novak, 1992; Ahern and Young, 2009; Ahern et al. al., 2011) и у других би-родительских видов, таких как octodon degus (Helmeke et al., 2009). Однако PD привел к уменьшению родительской заботы, получаемой потомством, на что указывало снижение уровней вылизывания / ухода за щенками и вынашивания, а также увеличение числа детенышей, оставленных одних в гнезде.Это изменение родительской заботы было связано с увеличением массы тела мужчин при отлучении от груди, но в нашем исследовании не привело к значительному влиянию на массу тела во взрослом возрасте. Следует отметить, что в предыдущем исследовании опыт PD был связан с более низкой массой тела щенка при отъеме у степных полевок, хотя это могло быть затруднено еженедельным обращением и внутриутробными эффектами при удалении отца примерно за 6–10 дней до помета. рождения (Ахерн и Янг, 2009).

Опыт PD способствовал социальной принадлежности

Интересным открытием настоящего исследования является то, что степные полевки PD продемонстрировали значительное увеличение контактов с сородичами во время теста на социальную принадлежность во взрослом возрасте, что указывает на то, что опыт PD на раннем этапе развития имеет длительный характер. влияние на социальную принадлежность.Важно отметить, что этот эффект не был связан с изменением социального признания, и, следовательно, эффект был специфическим для поведения. Интересно отметить, что аналогичный эффект был обнаружен у взрослых самок степных полевок, которые пережили 6 недель социальной изоляции (Lieberwirth et al., 2012), и у самцов степных полевок, потерявших партнера (Sun et al., 2014). Присутствие сородича может быть анксиолитическим, уменьшая биоповеденческие реакции тревоги у животных (Smith and Wang, 2014). Поскольку у наших полевок PD не наблюдалось увеличения своего тревожного поведения, усиление социальной принадлежности, вероятно, могло быть вызвано повышенным социальным поиском, а не преодолением стресса.Было также показано, что легкие стрессоры, например, вызванные поведенческим тестом, усиливают аффилиативное поведение у крыс и степных полевок в зависимости от пола (DeVries et al., 1996; Beery and Kaufer, 2015; Muroy et al., 2016). Стоит отметить, что в нашем исследовании самцы полевок с PD, по-видимому, демонстрировали более высокий уровень социальной принадлежности, чем самки, и это, вероятно, было движущей силой различий в лечении. У самцов мандаринских полевок опыт БП также привел к усилению контакта тела с сородичами, вероятно, из-за снижения агрессивности взрослых особей (Frazier et al., 2006; Wang et al., 2012). Действительно, у самцов степных полевок повышенная социальная принадлежность, вызванная потерей партнера, была связана со снижением агрессии (Sun et al., 2014).

Стресс на раннем этапе развития может усиливать тревожное поведение (Brunton, 2013; Maccari et al., 2014) или устойчивость к стрессовым раздражителям (Faure et al., 2007; Zhang et al., 2014; Beery and Kaufer, 2015). ; Rana et al., 2015) в зрелом возрасте. Исследования, в которых материнская депривация использовалась как фактор стресса в раннем возрасте, показали, что оба фактора увеличиваются (Ishikawa et al., 2015) и снижение тревожности во взрослом возрасте у крыс (Zhang et al., 2014). Было показано, что у моногамных грызунов БП снижает тревожное поведение у степных полевок (Ahern, Young, 2009), но усиливает такое же поведение у мандаринных полевок (Jia et al., 2009). Наши данные показывают, что опыт БП не оказал значительного влияния на тревожное поведение во время тестирования наших животных. Наша парадигма PD либо оказалась неэффективной для длительного воздействия на тревожное поведение, либо эффективно повысила устойчивость к стрессовым стимулам, связанным с тестом EPM.Следует отметить снижение двигательной активности у полевок с БП, поскольку неясно, может ли это иметь вторичное влияние на тревожное поведение. В самом деле, когда локомоция контролировалась, субъекты, воспитанные без отца, попадали в объятия EPM раньше, чем субъекты, воспитанные с обоими родителями. Было показано, что родительская депривация на раннем этапе развития влияет на двигательную активность у других би-родительских видов, таких как мартышки (Dettling et al., 2002) и мандаринки (Jia et al., 2009; Cao et al., 2014). У мандаринских полевок опыт БП также снижает двигательную активность (Jia et al., 2009).

Опыт БП изменил нейрохимическую экспрессию в гиппокампе

Были исследованы несколько нейрохимических веществ и их рецепторы в гиппокампе из-за их продемонстрированной роли в обучении и памяти, стрессовых реакциях и социальном поведении (Carter et al., 1995; Kim et al. , 2015; Lieberwirth et al., 2016). Наши данные показывают, что опыт БП повлиял на некоторые из этих маркеров нейрохимическим образом.Наиболее яркое и последовательное различие между группами было обнаружено в системе BDNF в гиппокампе. MO-полевки показали повышенную экспрессию РНК и белка BDNF и его рецепторов TrkB в гиппокампе по сравнению с контрольными полевками, выращенными обоими родителями (MF). Этот эффект, по-видимому, был одинаков как у мужчин, так и у женщин. Обширные данные показали, что стрессовые стимулы на раннем этапе развития могут вызывать изменения в системе BDNF в зависимости от области мозга и стресса. Например, отделение от матери может увеличить BDNF в гиппокампе крыс после отъема, и это связано с изменениями тревожно-подобного поведения и активности оси HPA (Faure et al., 2007; Дэниэлс и др., 2009; Сури и др., 2013). Интересно, что уровни BDNF и TrkB в гиппокампе чаще всего повышаются после отъема и снижаются в более зрелом возрасте в ответ на раннее отделение от матери у грызунов (Lee et al., 2012; Suri et al., 2013; Daskalakis et al., 2015). У взрослых крыс раннее отделение от матери снижает BDNF в гиппокампе, что приводит к нарушению памяти распознавания у самок и ухудшению рабочей памяти у самцов (Marco et al., 2013; Suri et al., 2013; Hill et al., 2014). Было обнаружено, что влияние разлучения с матерью на реакцию на стресс дополнительно опосредовано возрастом опыта разлучения с матерью и продолжительностью разлучения с матерью (Levine et al., 1991; Levine, 2005). Было высказано предположение, что повышенная активность BDNF в мозге в ответ на стресс в раннем возрасте может действовать как механизм защиты от воздействия стресса в будущем (Daniels et al., 2009; Suri et al., 2013; Daskalakis et al., 2015) . Например, раннее разделение с матерью, связанное с повышенной экспрессией BDNF в гиппокампе у крыс после отлучения от груди, связано со снижением тревожного поведения и повышением производительности в когнитивно-поведенческих задачах (Daniels et al., 2009; Сури и др., 2013). Интересно, что наши данные показывают, что опыт БП увеличивал не только BDNF, но также и усеченные, и полноразмерные изоформы рецептора TrkB у степных полевок. Это было дополнительно продемонстрировано положительной корреляцией между уровнями мРНК рецептора BDNF и TrkB, а также между уровнями белков BDNF и TrkBt (тренд с белком TrkBFL). Усеченные и полноразмерные рецепторы TrkB различными путями участвуют в регуляции роста дендритов (Yacoubian and Lo, 2000; Hartmann et al., 2004). Таким образом, опыт БП может вызывать изменения адаптивной пластичности системы BDNF в ответ на эмоциональные проблемы, связанные с отцовской депривацией, и прививать полевок против будущих стрессорных факторов, во многом подобно эффектам обогащения окружающей среды и раннего обращения с ними у других видов грызунов (Meaney et al., 1993).

Также стоит упомянуть, что наши данные указывают на положительную корреляцию уровней белка между системами BDNF и CRH в гиппокампе. Взаимодействия между системами BDNF и CRH участвуют в регуляции нейральной пластичности.Например, было показано, что CRH увеличивает или снижает уровни BDNF в зависимости от области мозга и соответственно изменяет плотность позвоночника (Bayatti et al., 2005; de la Tremblaye et al., 2016). Поскольку BDNF действует на рецепторы TrkB, регулируя рост дендритных шипов (McAllister et al., 1995; An et al., 2008), система CRH может регулировать этот процесс (Bayatti et al., 2005; de la Tremblaye et al., 2016). ), эти корреляции между маркерами BDNF и CRH могут дополнительно поддерживать идею о том, что повышенная активность BDNF, связанная с БП, может изменять плотность гиппокампа.

Опыт БП изменил экспрессию эпигенетических маркеров гиппокампа

Недавние данные показали, что опыт ранней жизни может влиять на поведение взрослых через эпигенетические механизмы (Babenko et al., 2015). Например, в крысиной модели ранней жизни изменчивости полученной материнской заботы, потомство маток с высоким уровнем облизывания / ухода за телом, по сравнению с потомками из маток с низким уровнем облизывания / ухода, более устойчиво к стрессу из-за повышенной экспрессии GR в гиппокампе, который является регулируется повышенным ацетилированием h4, в частности лизином 9, и снижением метилирования в промоторной области гена GR (Fish et al., 2004; Zhang et al., 2013). У мышей отделение от матери во время развития привело к усилению ацетилирования h4 в гиппокампе, что сопровождалось увеличением плотности и сложности шипов в области CA3 (Xie et al., 2013). Кроме того, социальный стресс, скученность и новая среда во время перипубертатно-ювенильного периода увеличивают ацетилирование h4 гиппокампа и замшелые волокна при одновременном снижении депрессивно-подобного поведения и вызванного стрессом CORT в плазме (Oztan et al., 2011). Интересным открытием нашего исследования является то, что опыт БП был связан с увеличением h4total и h4ace в гиппокампе полевок.Кроме того, БП испытывает значительное повышение уровня h4K9ace в гиппокампе у самок, но не самцов полевок. Эти данные указывают на то, что ранний опыт БП может влиять на ацетилирование гистонов в гиппокампе, возможно, в зависимости от пола, хотя мы до сих пор не знаем конкретный ген (ы), на которых происходит ацетилирование гистонов, и функциональное значение таких эпигенетических событий для мозга. и поведение. Стоит отметить, что эпигенетические события участвуют в регуляции поведения социальных связей как у самцов, так и у самок степных полевок (Wang et al., 2013; Duclot et al., 2016).

Следует упомянуть несколько проблем. Во-первых, наши данные показывают, что опыт БП также влияет на другие нейрохимические маркеры в гиппокампе полевок. Например, при PD повышается GR β у женщин, но снижается OXTR и повышается уровень белка CRHR2 у мужчин, что указывает на потенциальное полоспецифическое влияние PD на экспрессию нейрохимических рецепторов. Интересно, что уровни РНК GR α и GR β положительно коррелировали с уровнями РНК TrkB, указывая на взаимодействие между обеими системами, взаимодействие, ранее участвовавшее в регуляции синаптической пластичности (Jeanneteau and Chao, 2013).Хотя основные механизмы и функциональное значение таких эффектов до сих пор неизвестны, эти интересные данные не следует игнорировать, особенно учитывая роль GR и CRHR в стрессовых реакциях и преодолении стресса (McEwen, 2007; Bosch et al., 2009, 2016; Farrell и О’Кин, 2016; Вяс и др., 2016). Во-вторых, в нашем настоящем исследовании только определенный процент сексуально наивных самцов и самок степных полевок проявлял спонтанное родительское поведение по отношению к детенышам особого вида, что согласуется с предыдущими исследованиями (Lonstein and De Vries, 2001; Ahern and Young, 2009).К сожалению, ограниченное количество субъектов не позволило нам изучить влияние PD на конкретные модели родительского поведения. Мы полагаем, что этот интересный вопрос все же следует продолжить в дальнейших исследованиях, поскольку было показано, что индивидуальные характеристики родительского поведения могут передаваться из поколения в поколение (Francis et al., 1999; Champagne and Meaney, 2007) и регулироваться эпигенетическими механизмами (Champagne et al. др., 2006). В-третьих, убедительный лечебный эффект, наблюдаемый на систему BDNF и ацетилирование h4 в гиппокампе полевок, указывает на потенциальную эпигенетическую регуляцию BNDF и TrkB и его последующее поведение — интересный вопрос, которому следует следовать.В предыдущем исследовании эпигенетическая регуляция BDNF в гиппокампе участвовала в опосредовании депрессивноподобного поведения у мышей (Tsankova et al., 2006). Наконец, следует упомянуть одну оговорку в настоящем исследовании. Наши эксперименты изначально были предназначены для оценки влияния БП на тревожное и социальное поведение, включая социальное признание, которое отражает процессы социальной памяти. В будущих исследованиях будет интересно изучить влияние PD на задачи обучения и запоминания с помощью поведенческих тестов, таких как водный лабиринт Морриса, лабиринт Барнса и лабиринт с радиальной рукой (Lieberwirth et al., 2016).

Заключение

Данные нашего настоящего исследования показывают, что опыт БП на раннем этапе развития повлиял на социальную принадлежность потомства, когда они стали взрослыми, в зависимости от поведения. Кроме того, такой опыт PD был связан с повышенной экспрессией гена и белка BDNF и его киназы B рецептора тропомиозина, а также с уровнями общего ацетилирования гистона 3 и гистона 3 в гиппокампе. Вместе эти данные указывают на то, что отцовский опыт во время развития может изменять транскрипцию генов и синаптическую пластичность во взрослом гиппокампе потомства посредством эпигенетических механизмов.Это, в свою очередь, может служить для изменения социального аффилированного поведения во взрослом возрасте. В самом деле, было обнаружено, что PD влияет на синаптическую пластичность в зависимости от типа нейронов и областей мозга у др. Видов двупародительских грызунов, Octodon degus (Pinkernelle et al., 2009). У наших степных полевок уровни облизывания и ухода, получаемые потомством, отрицательно коррелировали с мРНК BDNF и экспрессией белка в гиппокампе. Изменения в системе BDNF гиппокампа (и ее опосредованные изменения в синаптической пластичности) у полевок с PD могут отражать компенсаторные механизмы дефицита нейрохимической и синаптической пластичности из-за снижения родительского контакта во время раннего развития.Кроме того, это может отражать адаптацию развития, служащую прививкой субъектов против будущих жизненных стрессоров (Helmeke et al., 2001).

Наконец, учитывая негативную связь между отсутствием отца в раннем возрасте и благополучием взрослых, о которой в основном сообщается в человеческой литературе (McLanahan et al., 2013), удивительно, что мы не смогли найти явных недостатков в социальном поведении прерий PD. полевки в настоящем исследовании. Это может быть связано с множеством факторов, включая неоптимальное время экспериментальных манипуляций (например,g., удаление отца) и / или поведенческое тестирование (например, подростковый возраст по сравнению с взрослой жизнью), как намекают исследования на людях (McLanahan et al., 2013). Кроме того, отсутствие отца во время развития у людей может быть связано с социальной стигмой, которая может усугублять влияние отсутствия отца на исход для взрослых, и этот фактор не будет применяться в контексте нашего исследования. Тем не менее, необходимы дальнейшие исследования для лучшего понимания последствий, а также основных нейронных и нейрохимических механизмов лишения отца на раннем этапе развития.

ОТЕЧЕСТВЕННАЯ ДЕПРИВАЦИЯ ВЛИЯЕТ НА СОЦИАЛЬНОЕ ПОВЕДЕНИЕ И НЕЙРОХИМИЧЕСКИЕ СИСТЕМЫ В ОТНОШЕНИИ СОЦИАЛЬНО МОНОГАМНОЙ ПРЕРИИ

Abstract

Ранний жизненный опыт, особенно опыт общения с родителями, имеет решающее значение для фенотипических результатов как у людей, так и у животных. Хотя влияние материнской депривации на благополучие потомства было изучено, отцовской депривации (PD) уделялось мало внимания, несмотря на документально подтвержденную связь между отсутствием отца и проблемами со здоровьем детей у людей.В настоящем исследовании мы использовали социально моногамную степную полевку ( Microtus ochrogaster ), которая демонстрирует связь пары самец-самка и заботу о двух родителях, чтобы изучить влияние БП на поведение взрослых и нейрохимическую экспрессию в гиппокампе. Испытуемые мужского и женского пола были случайным образом распределены в одну из двух экспериментальных групп, которые росли как с матерью, так и с отцом (MF) или только с матерью (MO, для получения опыта PD). Наши данные показывают, что субъекты MO меньше подвергались родительскому облику / уходу и ношению, и их оставляли одних в гнезде чаще, чем субъектов MF.Во взрослом возрасте (~ 75 дней) субъекты МО демонстрировали повышенную социальную принадлежность к сородичу по сравнению с субъектами МФ, но эти две группы не различались по социальному признанию и тревожному поведению. Интересно, что субъекты с МО продемонстрировали последовательное увеличение экспрессии как генов, так и белков нейротрофического фактора головного мозга (BDNF) и киназы рецептора тропомиозина B (TrkB), а также уровней общего ацетилирования гистона 3 и гистона 3 в гиппокампе по сравнению с MF. предметы.Кроме того, при PD повышается экспрессия белка рецептора глюкокортикоидов бета (GRβ) в гиппокампе женщин, а также повышается экспрессия белка рецептора 2 кортикотропина (CRHR2) в гиппокампе мужчин, но снижается мРНК CRHR2 у обоих полов. В совокупности наши данные предполагают, что БП оказывает длительное поведенческое воздействие на социальную принадлежность и изменяет нейрохимические системы гиппокампа в мозге полевок. Функциональная роль таких измененных нейрохимических систем в социальном поведении и потенциальное участие эпигенетических событий требует дальнейшего изучения.

Ключевые слова: родительское поведение, социальная принадлежность, гиппокамп, BDNF, окситоцин, CRH, эпигенетика

Введение

Вариации родительской среды во время развития могут серьезно влиять на фенотип взрослого человека (Heim et al., 2002; Repetti et al. ., 2002; O’Donnell et al., 2014; Samek et al., 2015). У людей, например, семейная среда детства, характеризующаяся высоким уровнем конфликтов и низким качеством привязанности, связана с уязвимостью к дефициту социальной и эмоциональной обработки (Repetti et al., 2002), а также повышение риска развития психопатологии во взрослом возрасте (Bifulco et al., 1991; Brown, Anderson, 1991; Felitti et al., 1998; Heim et al., 2002; Yam et al., 2015). ). Было показано, что отсутствие отца является фактором риска для множества негативных результатов, таких как развитие депрессивных симптомов и экстернализирующее поведение (Culpin et al., 2013; McLanahan et al., 2013). Напротив, повышенная материнская отзывчивость связана с ускорением развития ребенка, включая социальную, эмоциональную и когнитивную компетентность (Landry et al., 2006). Следовательно, ранняя родительская среда предсказывает восприимчивость и устойчивость к психопатологии взрослых (Smith and Prior, 1995; O’Donnell et al., 2014). Исследования с использованием функциональной магнитно-резонансной томографии (фМРТ) выявили некоторые области мозга, включая гиппокамп, а также поясную и префронтальную коры, которые подвержены неблагоприятным воздействиям в раннем детстве (Brooks et al., 2014; Elton et al., 2014 ; Sripada et al., 2014; Jensen et al., 2015). Однако нейрохимические системы, на которые влияют нарушения в раннем периоде жизни, менее известны из-за сложности, присущей исследованиям на людях.

Модели на животных, демонстрирующие влияние опыта ранней жизни на исходы у взрослых, показали высокую предсказательную ценность и достоверность, а также позволили получить представление о нейронных механизмах. Исследования на крысах и мышах показали, что пренатальный стресс или разлучение с матерью приводит к усилению тревожного и депрессивного поведения у взрослых потомков, а также к усилению нейроэндокринной реакции на стресс с множеством нейрохимических веществ, действующих в областях мозга, участвующих в стрессовых ответах. (Плоцкий, Мини, 1993; Прайс, Фелдон, 2003; Дэниэлс и др., 2004; Binder et al., 2011; Barbosa Neto et al., 2012). Примечательно, что изменения нейрохимических веществ, участвующих в пластичности и экспрессии генов, были обнаружены в гиппокампе (Suri et al., 2013; Nishi et al., 2014; Sousa et al., 2014; Shin et al., 2016) — области мозга. важны для обучения и памяти, а также для регуляции стрессовых реакций посредством взаимодействия с осью гипоталамуса и гипофиза надпочечников (HPA) (Kim et al., 2015). Например, разделение с матерью связано с изменениями в экспрессии нейротрофических факторов в гиппокампе потомства, включая нейротрофический фактор головного мозга (BDNF) и его рецепторную киназу рецептора тропомиозина B (TrkB), а также изменение производительности в когнитивных задачах, зависимых от гиппокампа. (Марко и др., 2013; Сури и др., 2013; Hill et al., 2014). Кроме того, взрослое потомство самок крыс, которое в процессе развития подвергалось большему вылизыванию / уходу со стороны матери, демонстрировало более высокие уровни материнского облизывания / ухода за своим собственным потомством, но более низкие уровни тревожного поведения, экспрессии вызванного стрессом циркулирующего кортикостерона и глюкокортикоидных рецепторов (GR). в гиппокампе, по сравнению с теми, которые подвергались меньшему вылизыванию / уходу со стороны матери во время развития (Liu et al., 1997; Francis et al., 1999).Интересно, что эпигенетические события были вовлечены в опосредование эффектов материнской среды на нейрохимическую экспрессию в гиппокампе и связанное с ним поведение у взрослого потомства (Fish et al., 2004; Champagne et al., 2006; Pan et al., 2014; Wang et al. ., 2014).

В то время как данные исследований на животных выявили новые знания о влиянии материнской среды на исход для взрослых и лежащих в основе нейрохимических механизмов, влияние отцовской депривации (PD) изучено меньше.У людей отцовский уход связан с благополучием взрослых, и было обнаружено, что БП связана с множеством отрицательных результатов (McLanahan et al., 2013). Кроме того, согласно отчетам Бюро переписи населения США и Центра по контролю за заболеваниями, число детей, живущих в семьях, где отсутствуют отцы, широко распространено и увеличивается в Соединенных Штатах, что соответствует меньшему количеству контактов между отцом и потомством (Бюро переписей США, 2012; Джонс и Мошер, 2013). Учитывая, что БП широко распространена и увеличивается в нашем обществе, крайне важно понимать нейронные механизмы, лежащие в основе негативной связи между отсутствием отца в раннем возрасте и благополучием взрослых для профилактики и лечения связанных психопатологий.В то время как обычные лабораторные крысы и мыши не могут служить подходящими моделями, поскольку они от природы не проявляют отцовского поведения, появление социально моногамной модели степной полевки ( Microtus ochrogaster ) дало возможность изучить родительское поведение самцов и его влияние на когнитивные способности потомства. и поведенческие функции, а также лежащие в основе нейрохимические механизмы.

Луговая полевка — это вид грызунов, который демонстрирует поведенческие черты социальной моногамии, включая долгосрочную привязанность между партнерами противоположного пола (парная связь) (Williams et al., 1992; Гетц и Картер, 1996; Lim et al., 2004) и, таким образом, была создана в качестве животной модели для изучения нейрохимической регуляции социальной привязанности (Carter et al., 1995; Young et al., 1998). Отцы луговых полевок вносят свой вклад в уход за своими детенышами, демонстрируя полный спектр материнского поведения, за исключением кормления (Wang and Novak, 1992; Wang and Insel, 1996). Кроме того, PD влияет на поведение потомков степной полевки: уменьшая проявление аллопатического поведения подростков по отношению к своим младшим братьям и сестрам (Wang, Novak, 1994) и ослабляя их способность образовывать парные связи во взрослом возрасте (Ahern and Young, 2009; Ahern et al. al., 2011). В настоящем исследовании мы стремились охарактеризовать поведенческие и нейробиологические последствия отцовской депривации у степных полевок. Мы сравнили взрослых самцов и самок полевок, которые выросли с отцом или без него, и изучили их социальное и тревожное поведение, а также экспрессию генов нескольких нейрохимических веществ в гиппокампе, которые участвовали в регуляции стрессоустойчивости и дефицита памяти в ответ. к стрессовому жизненному опыту. Мы предположили, что в отсутствие раннего отцовского опыта полевки будут демонстрировать измененное социальное и тревожное поведение, связанное с изменениями в нейрохимических системах гиппокампа.

Экспериментальные процедуры

Экспериментальные животные

Все животные, использованные в наших экспериментах, были степными полевками ( M. ochrogaster ), выращенными в племенной колонии, расположенной в Университете штата Флорида. Животные имели доступ к пище и воде ad libitum , и клетки поддерживали в режиме 14:10 свет: темнота с включенным светом в 07:00. Субъекты были потомками взрослых самцов и самок степных полевок, которых спаривали в начале экспериментировали и проявили сексуальную наивность при объединении в пары.Пары животных содержали в больших поликарбонатных клетках (45 × 22 × 20 см), выстланных подстилкой из кедровой щепы, и два хлопковых гнезда были предоставлены для идентификации гнезда. Пятнадцать пар родили 56 потомков в течение пяти дней. При рождении помета (1-й постнатальный день: PND1) отцы оставались с партнерами-самками в домашних клетках (n = 8 пар) или были навсегда удалены из домашних клеток (n = 7 пар). Таким образом, субъекты были размещены либо с матерью и отцом (MF; n = 31), либо с матерью только для создания опыта отцовской депривации (MO; n = 25) от PND1 до PND21.Примечательно, что во время родов мы удаляли отца из каждого второго помета, чтобы группы лечения были созданы сбалансированным образом. При отлучении от груди (PND21) субъектов взвешивали и размещали до достижения зрелого возраста с представителем того же пола, который прошел такое же экспериментальное лечение. Субъектам были присвоены идентификационные номера, и половине субъектов проткнули уши, чтобы отличить их от своих товарищей по клетке. Все эксперименты проводились в соответствии с руководящими принципами Институционального комитета по уходу и использованию животных Университета штата Флорида.

Выборочные проверки

Выборочные проверки проводились утром (08:30) и вечером (19:00) ежедневно между PND2 и PND21 на основании ранее опубликованных протоколов (Hammock et al., 2005; Ahern and Young, 2009; Ahern et al. , 2011). Каждая выборочная проверка состояла из пяти поведенческих проверок с пятиминутными интервалами. Во время выборочных проверок исследователь наблюдал за поведением родителей в последовательном порядке и записывал итоговые отметки, соответствующие наблюдаемому поведению, на листе бумаги, который позже был перенесен в документ SPSS.Порядок клетки был уравновешен между проверками. На PND1 на спинах отцов в группе MF были сбриты клочки шерсти, чтобы отличить их от матерей. Оцениваемые поведенческие критерии включали уход, вылизывание / уход, сбивание в кучу и вынашивание детенышей, а также строительство гнезда, самообслуживание и случаи, когда каждый родитель находился либо в гнезде, либо вне гнезда. Хаддлинг засчитывался, когда отец парил над своими детенышами с изогнутой спиной. Поскольку кучка всегда сопровождается расположением детенышей вентральнее от родителя, сбивание матери сделало невозможным с уверенностью определить, были ли прикреплены к соску какие-либо детеныши.Таким образом, скучивание матери оценивалось как кормление / скучивание. Вынашивание щенка определялось, когда родитель носил щенка через рот.

Масса тела

Все субъекты были взвешены при отъеме от груди (PND21) и во взрослом возрасте. Два самца MF были обнаружены мертвыми в своей домашней клетке вскоре после отлучения от груди, поэтому их данные были исключены из анализа данных. Вес всех взрослых измерялся в один и тот же день, то есть как минимум за два дня до начала первого поведенческого теста для каждого испытуемого, в течение которого возраст испытуемых варьировался от 68 до 73 дней.

Поведенческие тесты

Субъекты были разделены на две когорты, каждая из которых состояла из равного числа субъектов в пометах. Субъекты в когорте 1 (M / MF; n = 6, F / MF; n = 11, M / MO; n = 6, F / MO; n = 7) прошли через родительское поведение (PB), социальную принадлежность (SOA ), социальное признание (SOR) и крестообразный лабиринт (EPM), соответственно, с одним тестом в день в течение четырехдневного периода. Благодаря количеству испытуемых и экспериментальных групп, нескольким поведенческим тестам и узкому окну для каждого поведенческого теста нам удалось начать первый день поведенческого тестирования для каждого испытуемого, когда они достигли PND74-76.Каждый поведенческий тест начинался примерно в одно и то же время каждый день, и все поведенческие тесты проводились между 09:00 и 15:00 в комнате для поведенческих тестов, контролируемой по освещенности (около 300 лк), как описано ранее (Sun et al., 2014). Поведение записывалось на видео и впоследствии оценивалось с помощью программного обеспечения JWatcher (NIH, Bethesda, MD) исследователем, не знающим экспериментального состояния испытуемых. На следующий день после последнего поведенческого теста субъектов из когорты 1 забивали.Чтобы избежать потенциального воздействия поведенческого тестирования на нейрохимическую экспрессию в головном мозге, испытуемые из когорты 2 (n = 24; по 6 испытуемых в каждой из 4 экспериментальных групп) не проходили поведенческие тесты, а оставались в домашних клетках без каких-либо нарушений до PND79. во время которого субъекты были усыплены для сбора мозгов.

Тест родительского поведения

Родительское поведение испытуемого тестировалось по отношению к сородичу в течение 10 минут с использованием установленного протокола (Lonstein and De Vries, 1999).Аппарат для испытаний состоял из поликарбонатной клетки (45 × 22 × 20 (В) см), выложенной подстилкой из кедровой стружки. Испытуемого помещали в центр клетки на 10 минут для привыкания. После этого новый двухдневный стимулирующий щенок был помещен в самый дальний от субъекта угол испытательной клетки. Стимулирующий щенок был потомком селекционеров колонии и был очищен дистиллированной водой и ватным тампоном непосредственно перед тестом. Родительское поведение оценивалось как вылизывание / уход за щенком, сбивание в кучу и ношение щенка.Также оценивались другие виды поведения, такие как строительство гнезда, уход за собой, передвижение и отдых. В тех случаях, когда субъект проявлял агрессивное поведение по отношению к щенку, исследователь немедленно вмешивался, чтобы удалить щенка, и поведенческий тест прекращался.

Тест на социальную принадлежность

Социальная принадлежность (SOA) субъекта к тому же половому сородичу также проверялась с использованием установленного метода (Pan et al., 2009). Вкратце, испытательная установка состояла из двух поликарбонатных камер (13 × 18 × 29 (В) см), соединенных полой трубкой (7.5 × 16 см). Стимулирующее животное того же пола и возраста, что и субъект, было привязано в одной камере, и субъект был помещен в пустую камеру и имел доступ ко всему устройству для тестирования в течение 1-часового теста. К полой трубке были прикреплены индивидуальные световые датчики и подключены к компьютеру для записи входа субъекта в каждую камеру. Регистрировали время, проведенное субъектом в каждой клетке и переходе клетки, а также продолжительность и частоту непосредственного контакта со стимулированным животным.

Тест на социальное признание

Социальное признание (SOR) субъекта проверялось с использованием установленного метода (Lieberwirth et al., 2012). Тест состоял из четырех попыток, каждое по пять минут и разделенных пятиминутным интервалом. Субъектам позволяли привыкнуть к испытательному устройству (поликарбонатная клетка 25 × 45 × 20 (В) см) в течение 10 минут. В начале каждого испытания молодое стимулирующее животное помещалось в испытательную клетку с субъектом. Все стимулированные животные были того же пола, что и испытуемые, и возрастом примерно 30 дней.В конце каждого испытания стимулирующее животное удаляли из испытательной клетки и помещали в отдельную клетку, в то время как субъект оставался в испытательной клетке. Во время испытаний 1-3 одно и то же животное-раздражитель помещалось в экспериментальную клетку. Во время испытания 4 использовали другое стимулирующее животное. Регистрировали продолжительность и частоту обнюхивания (включая аногенитальное обнюхивание и обнюхивание головы).

Тест приподнятого крестообразного лабиринта

Тревожное поведение субъекта было проверено в тесте EPM (Liu et al., 2014). Вкратце, испытательная установка (Columbus Instruments, Колумбус, Огайо, США) состояла из двух открытых плеч и двух закрытых плеч (35 × 6,5 × 15 (В) см), которые пересекаются посередине и подняты на 45 см от пола. В начале 5-минутного теста испытуемого помещают в центр платформы лицом к закрытой руке. Регистрировали время, которое испытуемые провели в каждой руке и в центре сцены, входы в каждую руку и задержку входа в открытую руку.

Обработка тканей

Субъекты были быстро обезглавлены.Мозги извлекали, немедленно замораживали на сухом льду и впоследствии хранили при -80 ° C. Коронковые срезы (толщиной 200 мкм) вырезали на криостате и помещали на предметные стекла для размораживания. Двусторонние тканевые штампы диаметром 1 мм из заднего медиального гиппокампа были взяты при -40 ° C, а затем сохранены при -80 ° C до дальнейшей обработки. Белок и РНК выделяли из 14 точек ткани заднего медиального гиппокампа с использованием Tri-Reagent в соответствии с инструкциями производителя (Центр молекулярных исследований, Цинциннати, Огайо).Белки хранили в буфере Laemmle при -80 ° C. РНК растворяли в воде DEPC и также хранили при -80 ° C до дальнейшей обработки.

Вестерн-блоттинг

Образцы белка по 20 мкг каждый загружали в полиакриламидные гели с 12% додецилсульфатом натрия (SDS) (Bio-Rad) для электрофореза. Белки прогоняли на гелях при 80 В (В) в течение приблизительно 20 минут, а затем при 120 В в течение 1 часа. Затем белки переносили на нитроцеллюлозные мембраны при 100 В в течение 1 часа при 4 ° C и затем блокировали либо в 5% молоке, либо в Superblock (Bio-Rad).Мембраны инкубировали при 4 ° C в течение 1-2 дней со следующими первичными антителами: киназа B кроличьего антитропомиозинового рецептора (TrkB) (1: 200, Santa Cruz), кроличий анти-мозговой нейротрофический фактор (BDNF) (1: 200, Санта-Крус), кроличий антиглюкокортикоидный рецептор (GR) (1: 1000, Санта-Крус), козий антиокситоциновый рецептор (OXTR) (1: 500, Санта-Крус), кроличий рецептор антикортикотропин-рилизинг-гормона 1 (CRHR1 ) (1: 300, Novus Biologicals) и 2 (CRFR2) (1: 500, Novus Biologicals), козий рецептор против вазопрессина (V1aR) (1: 300, Санта-Крус), кроличий антикортикотропин-рилизинг-гормон (CRH) (1: 300, Proteintech), кроличий антиглицеральдегид-3-фосфатдегидрогеназа (GAPDH) (1: 1000, Santa Cruz), мышиный антител к общему гистону 3 (h4total) (Millipore, 1: 1000), кроличий антигистон 3 ацетилирование (h4ace) (1: 1000, Millipore) или ацетилирование кроличьего антигистона 3 по лизину 9 (h4K9ace) (1: 1000, Millipore).После этого мембраны промывали фосфатно-солевым буфером (PBS) и инкубировали в течение 1 часа со следующими вторичными антителами: конъюгированные с пероксидазой хрена (HRP) антитела кролика (1: 20000, Санта-Крус), HRP-антитела коз (Санта-Крус, 1). : 20,000), DYLight 550 против кролика (1: 20,000, Thermo Fisher Scientific), DYLight 650 против мыши (1: 20,000, Thermo Fisher Scientific) или против IRDye 680 против кролика (1: 20,000 Li-Cor Biosciences). Затем мембраны снова промывали, и мембраны, которые инкубировали с конъюгированным с HRP вторичным антителом, дополнительно инкубировали в хемилюминесцентном субстрате HRP (субстрат SuperSignal West Dura Extended Duration Substrate, Thermo Fisher Scientific) в течение 10 минут.Все белки визуализировали на системе ChemiDoc MP (Bio-Rad). Специфичность первичных антител была подтверждена в предыдущих исследованиях на полевках, а также на крысах и мышах в отношении системы CRH и h4k9ace, которые имеют высокую гомологию с степными полевками (Huang et al., 2009; Greenberg et al., 2012; Gupta -Agarwal et al., 2012; Wang et al., 2013; Wu et al., 2014; Galinato et al., 2015; Duclot et al., 2016; Yadawa and Chaturvedi, 2016). Следует отметить, что было показано, что антитело OTR способно обнаруживать белок OTR в ткани мозга полевок посредством нейтрализации антител блокирующим пептидом OTR, но снижение сигнала при инкубации с блокирующим пептидом в течение ночи не было полным (Duclot et al., 2016). Следовательно, следует соблюдать осторожность при интерпретации данных. Западные полосы были количественно определены с помощью ImageJ (NIH, Bethesda Maryland). Все данные были нормализованы в пределах одной и той же мембраны до GAPDH, в то время как h4ace и h4K9ace были дополнительно нормализованы до h4total. Все данные выражены в процентах от среднего значения для групп MF.

Полуколичественная полимеразная цепная реакция в реальном времени (RT-PCR)

400 нг общей РНК было обработано на MyCycler Thermal Cycler (Bio Rad) для синтеза комплементарной ДНК с помощью набора для синтеза первой цепи кДНК Cloned AMV (Invitrogen , Thermo Fisher Scientific) в соответствии с инструкциями производителя.Все образцы праймеров и кДНК разбавляли 1/10, загружали в трех экземплярах с помощью SYBR Green Supermix (Bio Rad) в 384-луночный планшет для ПЦР и запускали в термоциклере CFX 384 (Bio Rad). Результаты были нормализованы к эталонному гену никотинамидадениндинуклеотиддегидрогеназы (НАДН). Последовательности праймеров приведены в. Специфичность праймера подтверждали анализом кривой плавления. Данные представлены как процентное изменение от контролей (группы MF).

Таблица 1

Последовательности праймеров (5 ‘- 3’)

MF MO p
Мужской Женский Мужской Женский Группа Пол
OXTR 146.3 ± 35,9 53,7 ± 13,9 68,6 ± 17,6 109,4 ± 21,6 0,80 0,35 0,01
V1aR 101,7 ± 9,3 98,3 ± 7,3 98,3 115,3 111,8 ± 10,4 0,38 0,03 0,39
GRα 106,4 ± 34,2 92,3 ± 22,7 96,5 ± 35,7 208,6 ± 53,0 0.19 0,23 0,13
GRβ 116,4 ± 16,2 83,6 ± 11,7 79,1 ± 9,9 135,3 ± 20,4 0,64 0,45 0,01
91 900CTAG 900CTAG 9CTG 99091 ACGCGGACTTGTAC
Мишень Последовательность праймеров
GRα вперед GGTTGGTGCTTCTACCCTGA
обратная 900GTC90 900GTC 900GTC 900
GR β вперед ACAGACTTTCGGCTTCTGGA
задний ход AAAGGTGCTTTTGGTCTGTGG
CRHR190
CRHR2 вперед CAGCTTCCACAGCATCAAGC
назад CACCCAAGGGTCAGTGTAGC
BDNF CCATA вперед
обратный TTGGAGATGTGGTGGAGAGG
TrkBFL вперед TATGCTGTGGTGGTGATTGC
обратный TTGGAGATGTGGTGGAGAGG
TrkBt вперед GGCTGCTCCTAACCTCACTG
обратный TTCACGGAATCCTGGTCTTC
NADH прямой CTATTAATCCCCGCCTGACC
обратный GGAGCTCGATTGT908 IBM) и p <0.05 был признан статистически значимым. Все данные были проверены на однородность дисперсии и либо нормализованы, если необходимо, преобразованием квадратного корня, если не указано иное, либо проанализированы с помощью непараметрических тестов. Независимые выборочные T-тесты были проведены для сравнения поведения выборочной проверки между группами MF и MO, матерями и отцами в группе MF и матерями из групп MO и MF, соответственно. Для анализа данных использовались итоговые отметки по сумме утренних и вечерних выборочных проверок по каждому поведению.Все остальные данные были проанализированы с помощью двустороннего дисперсионного анализа (пол группы X), за исключением данных социального признания, которые были проанализированы с помощью двустороннего дисперсионного анализа с повторными измерениями (испытания). Значимые взаимодействия отслеживали с помощью апостериорных тестов по методу наименьшего значимого различия (LSD) Фишера. Данные представлены как среднее + SEM.

Результаты

Выборочные проверки

При условии MF () были обнаружены половые различия — матери вылизывали / ухаживали за своими щенками (t (14) = 4,426, p <0.001) и принял нависшую позу над детенышами (медсестра / группа) (t (14) = 8,216, p <0,001) больше, чем отцы. Не было обнаружено различий в другом поведении, включая ношение щенков, строительство гнезда и уход за собой. Матери в условиях MF и MO не различались ни по одному измеренному поведению (). Интересно, что щенков в состоянии MF вылизывали / ухаживали (t (13) = 2,365, p <0,05) и переносили (H (2) = 4,801, p <0.05) больше родителями и реже оставались в гнезде одних (t (13) = 3,429, p <0,01) по сравнению с детенышами в состоянии MO (). При отъеме (PND 21) самцы MF весили меньше по сравнению с самками MF, а также самцами и самками MO (F (1, 49) = 6,884, p <0,05) (). Однако в зрелом возрасте самцы весили больше, чем самки, независимо от условий выращивания (F (1, 49) = 6,596, p <0,05).

Лишение отца влияет на уход за потомством.(A) Когда присутствуют и мать, и отец (MF), матери демонстрируют больше вылизывания / ухода за щенком и занимают общую позицию (медсестра / тусовка) над щенками по сравнению с отцами, но они не различаются по уровням вынашивания щенков, гнезд построение или уход за собой. (B) Не было различий в облизывании щенков и уходе за ними, уходе за ними, ношении щенков, строительстве гнезд и самообслуживании между матерями MF и только матерями (MO) без отца. (C) Были более низкие уровни направленного облизывания и ухода за щенком, а также ношения щенка в гнездах MO по сравнению с гнездами MF.Кроме того, было больше случаев, когда потомство оставалось одного в гнезде в состоянии MO. (D) Наконец, самцы MF весили меньше при отъеме (PND21), в то время как самцы MO весили так же, как и самки. В зрелом возрасте субъекты мужского пола весят больше, чем субъекты женского пола, независимо от условий выращивания. Данные показаны как среднее + SEM. * р <0,05, ** р <0,01. Буквы алфавита указывают на результаты апостериорного теста после ANOVA. Полосы, помеченные разными буквами, значительно отличаются друг от друга.

Поведенческие тесты

Число субъектов в каждой экспериментальной группе, которые прошли следующие поведенческие тесты, включало 6 M / MF, 6 M / MO, 11 F / MF и 7 F / MO. Все испытуемые в когорте 1 прошли все поведенческие тесты, и все их данные представлены в отчете, если не указано иное.

Родительское поведение

Во время родительского поведенческого теста 33,7% (4/11) женщин и 50% (3/6) мужчин в группе MF, а также 28,6% (2/7) женщин и 33,4% (2/6) мужчин в группе МО проявили спонтанное родительское поведение.Не было обнаружено никаких групповых и половых различий в процентном отношении субъектов, проявляющих родительское поведение. Из-за ограниченного числа субъектов, демонстрирующих родительское поведение, мы не смогли провести статистический анализ конкретного поведения.

Социальная принадлежность и признание

В тесте SOA два субъекта из группы M / MO были исключены из анализа из-за низкого качества видеозаписи. Выявлены достоверные групповые и половые различия в продолжительности параллельного контакта с животным-стимулом ().Субъекты МО проводили больше времени в параллельном контакте с животным-стимулом, чем субъекты МФ (F (1, 24) = 4,511, p <0,05). Кроме того, самцы чаще контактировали со стимулирующим животным по сравнению с самками (F (1, 24) = 5,756, p <0,05). По продолжительности контакта не было обнаружено значимой группы по половому взаимодействию. Различий в частоте социальных контактов не обнаружено (). В тесте SOR не было обнаружено никаких групповых и половых различий в продолжительности и частоте социального обнюхивания ().Все субъекты продемонстрировали уменьшение продолжительности обонятельного исследования стимула животного, неоднократно предъявляемого в испытаниях 1-3, а затем увеличенного обонятельного исследования после предъявления нового стимульного животного во время испытания 4 (F 1, 75 = 19,985, p <0,001 ,). Подобная картина также была обнаружена в частоте обонятельных исследований ().

Лишение отца влияет на принадлежность взрослого, но не на признание. (A) Субъекты, лишенные отцовства, воспитываемые только матерью (МО), проводили больше времени в параллельном контакте с сородичами во время теста на социальную принадлежность (СА), чем субъекты, воспитанные отцом и матерью (МФ).Не было обнаружено различий в частоте бокового контакта (B). Не было различий между группами в тесте социального признания (SR), в том числе по продолжительности (C) и частоте (D) обнюхивания. Данные показаны как среднее + SEM. * р <0,05; #: половая разница (p <0,05).

Тревожное поведение

В тесте EPM один субъект из группы F / MF и один субъект из группы F / MO были исключены из анализа из-за плохого качества видео, и один субъект выпал из EPM более чем на половину теста.Во время теста EPM не было никаких групповых или половых различий по каким-либо показателям тревожно-подобного поведения, включая латентность открытия руки, процент входов в открытую руку или продолжительность (). Эффект лечения был обнаружен в общем количестве записей в руки (F (1, 24) = 7,367, p <0,01) с субъектами MF, которые отображали больше записей в руки, чем субъекты MO. Затем был проведен двусторонний анализ ANCOVA для определения наличия групповых или половых различий в поведенческих измерениях при контроле локомоции (общей частоты рук).При контроле общего количества скрещиваний рук был обнаружен значительный групповой эффект для латентности открытого плеча (F (1, 23) = 0,028, p <0,05): у субъектов MO (14 ± 8 секунд) были уменьшены латентности открытого плеча по сравнению с субъектам MF (40 ± 7 секунд).

Таблица 2

Группа MF MO p
Пол Мужской Женский Мужской Женский Группа Пол G × S
Задержка открытого плеча (сек) 35.6 ± 14,4 28,9 ± 8,0 16,1 ± 6,9 28,4 ± 14,7 0,23 0,92 0,53
Продолжительность открытого плеча (%) 34,8 ± 9,1 29,7 ± 6,8 36,7 ± 7,9 22,8 ± 8,2 0,76 0,26 0,60
Частота открытого плеча (%) 28,2 ± 5,9 28,5 4,9 ± 27,7 8,8 ± 24.7 ± 7,0 0,76 0,85 0,82
Кресты всего руки (#) 27,7 ± 4,0 21,7 ± 3,0 17,0 ± 2,3 15,7 ± 1,4 0,01 0,26 0,46

Нейрохимическая экспрессия белка в гиппокампе

Рецепторы окситоцина, вазопрессина и глюкокортикоидов

Значительная группа по половому взаимодействию была обнаружена для экспрессии белка OXTR в гиппокампе (F 1, 20 =.795, p <0,05; ). Самцы MF имели более высокий уровень экспрессии OXTR, чем самки MF и самцы MO. Группа по половому взаимодействию была также обнаружена для экспрессии белка GR β в гиппокампе (F 1, 20 = 8,641, p <0,05). Самки MO имели более высокий уровень экспрессии GR β , чем самцы MO и самки MF. Существенных различий в экспрессии белков V1aR и GRα в гиппокампе не обнаружено.

Таблица 3

Уровни белка в гиппокампе

× Sic гормон и его рецепторы

Не было обнаружено различий в уровнях CRH и CRHR1 в гиппокампе (). Значительная группа по половому различию была обнаружена для экспрессии CRHR2 в гиппокампе (F 1, 20 = 8.635, р <0,05). Самцы MO имели более высокий уровень экспрессии белка CRHR2, чем самки MO, а также самцы и самки MF (). Интересно, что уровни белка CRHR2 коррелировали с CRHR1 (r (24) = 0,704, p <0,05), CRH (r (24) = 0,553, p <0,05), TrkBt (r (23 ) = 0,803, p <0,05), TrkBFL (r (22) = 0,495, p <0,05) и BDNF (r (24) = 0,502, p <0.05) уровень белка.

Отцовская депривация изменяет экспрессию белка гиппокампа взрослых и ацетилирование гистонов. (A) Самцы, которые росли только с матерью (M / MO), имели повышенную экспрессию белка рецептора рилизинг-гормона кортикотропина типа 2 (CRHR2) в гиппокампе по сравнению с самцами, которые росли как с матерью, так и с отцом (M / MF). (B) По сравнению с самцами и самками, выращенными отцом и матерью (M / MF, F / MF), самцы и самки, выращенные без отца (M / MO, F / MO), имели более высокие уровни белка нейротрофического фактора головного мозга ( BDNF), а также его рецептор, киназа рецептора тропомиозина B в усеченной форме (TrkBt) и имеющая тенденцию в полноразмерной форме (TrkBFL) в гиппокампе.(C) У субъектов с МО также были более высокие уровни белка общего гистона 3 (h4total) в гиппокампе, а также более высокие уровни ацетилирования гистонов (h4ace). Наконец, по сравнению с самками MF, самки MO имели более высокое соотношение ацетилирования гистона 3 по лизину 9 (h4K9ace) к h4total. Данные показаны как среднее + SEM. * р <0,05. Буквы алфавита указывают на результаты апостериорного теста после ANOVA. Полосы, помеченные разными буквами, значительно отличаются друг от друга.

Нейротрофический фактор головного мозга и киназа рецептора тропомиозина B

Значительные групповые эффекты были обнаружены на уровнях BDNF (F 1, 20 = 4.598, p <0,05) и TrkBt (95kd) (F 1, 14,043 = 5,078, p <0,05) в гиппокампе (). Субъекты MO имели более высокие уровни BDNF и TrkBt в гиппокампе, чем субъекты MF. Аналогичная тенденция была также обнаружена в уровне экспрессии белка TrkBFL (145 кДа) в гиппокампе (F 1, 17 = 4,055, p = 0,060). Интересно, что уровни белка BDNF в гиппокампе коррелировали с TrkBt (r (21) = 0,545, p <0.05), CRH (r (22) = 0,423, p <0,05), CRHR1 (r (22) = 0,555, p <0,05) и CRHR2 (r (22) = 0,502 , p <0,05) уровней белка и тенденции с TrkBFL (r (22) = 0,411, p = 0,057). Кроме того, уровни BDNF отрицательно коррелировали с частотой облизывания и ухода за гнездом (r (22) = -0,503, p <0,05).

Гистон 3

Значительные эффекты лечения были обнаружены на уровнях h4total (F 1, 19 = 7.680, p <0,05) и отношение h4ace к h4total (F 1, 18 = 5,885, p <0,05). У субъектов с МО были более высокие уровни h4total и h4ace / h4total по сравнению с субъектами MF (). Для h4K9ace / h4total в гиппокампе было обнаружено лечение по половому взаимодействию (F 1, 18 = 10,270, p <0,05). Самки MF имели более низкий уровень h4K9ace / h4total по сравнению с самцами MF и самками MO ().

Нейрохимическая экспрессия мРНК в гиппокампе

Это было сосредоточено только на нейрохимических маркерах, где уровни белка указывали на потенциальные групповые различия в экспрессии генов.Значительные эффекты лечения были обнаружены на уровнях CRHR2 (F 1, 19 = 10,078, p <0,01), BDNF (F 1, 17 = 4,553, p <0,05) и TrkBFL (F 1, 20 = 7,620, p <0,05) экспрессия мРНК в гиппокампе (). Субъекты MO имели более низкий уровень CRHR2, но более высокие уровни BDNF и TrkBFL, по сравнению с субъектами MF. Интересно и аналогично данным по белкам, мРНК BDNF отрицательно коррелировала с общими уровнями облизывания и ухода (r (19) = -0.533, p <0,05). Уровни BDNF также сильно коррелировали как с уровнями полной длины (r (19) = 0,616, p <0,01), так и с усеченными уровнями TrkB (r (21) = 0,627, p <0,01). Никаких половых или групповых по половому признаку взаимодействий обнаружено не было. Кроме того, не было обнаружено различий в экспрессии мРНК GRα и GRβ в гиппокампе.

Отцовская депривация изменяет мРНК гиппокампа во взрослом возрасте. Количественная полимеразная цепная реакция в реальном времени показала, что у субъектов, которые росли только с матерью (МО), были снижены уровни мРНК рецептора 2 рилизинг-гормона кортикотропина (CRHR2) в гиппокампе по сравнению с субъектами, которые воспитывались как с матерью, так и с отцом (MF ).Кроме того, у субъектов с МО были более высокие уровни мРНК для нейротрофического фактора головного мозга (BDNF) и его полноразмерного рецептора, киназы B рецептора тропомиозина (TrkBFL). Данные показаны как среднее + SEM. * р <0,05.

Обсуждение

Хорошо задокументировано, что опыт ранней жизни, включая опыт общения с родителями, может формировать когнитивные и поведенческие функции взрослых (Felitti et al., 1998; Repetti et al., 2002; Nishi et al., 2014; Sripada et al., 2014; Jensen et al., 2015; Samek et al., 2015; Ям и др., 2015). У людей присутствие отца на раннем этапе развития связано со снижением риска различных психопатологий и повышением благополучия детей (Sarkadi et al., 2008; McLanahan et al., 2013; Tikotzky et al., 2015), тогда как отсутствие отца может привести к негативным результатам, включая развитие депрессивных симптомов и экстернализирующее поведение (Phares and Compas, 1992; Culpin et al., 2013; McLanahan et al., 2013). В настоящем исследовании с использованием социально моногамных степных полевок, которые естественным образом проявляют как материнское, так и отцовское поведение, мы обнаружили, что отцовская депривация (PD) во время раннего развития оказывает долгосрочное влияние на социальную принадлежность потомства, когда они становятся взрослыми, и этот эффект зависит от поведения.Кроме того, наши данные показывают, что такой опыт БП также изменяет экспрессию нескольких нейрохимических веществ и эпигенетических маркеров в гиппокампе, указывая на их потенциальную роль в опосредовании измененного социального поведения.

PD влияет на родительскую среду

Как и ожидалось, отцы степных полевок вносили свой вклад в заботу о потомстве и демонстрировали вылизывание / уход за щенками, собирались в кучу и вынашивали, а также строили гнезда, как это делали матери, за исключением кормления грудью (Wang and Novak, 1992; Ахерн и Янг, 2009 г .; Ахерн и др., 2011). Материнское поведение не различается между группами MF и MO, что позволяет предположить, что матери не компенсируют отсутствие отца, что согласуется с предыдущими исследованиями на степных полевках (Wang, Novak, 1992; Ahern and Young, 2009; Ahern et al. al., 2011) и у других би-родительских видов, таких как octodon degus (Helmeke et al., 2009). Однако PD привел к уменьшению родительской заботы, получаемой потомством, на что указывало снижение уровней вылизывания / ухода за щенками и вынашивания, а также увеличение числа детенышей, оставленных одних в гнезде.Это изменение родительской заботы было связано с увеличением массы тела мужчин при отлучении от груди, но в нашем исследовании не привело к значительному влиянию на массу тела во взрослом возрасте. Следует отметить, что в предыдущем исследовании опыт PD был связан с более низкой массой тела щенка при отъеме у степных полевок, хотя это могло быть затруднено еженедельным обращением и внутриутробными эффектами при удалении отца примерно за 6–10 дней до помета. рождения (Ахерн и Янг, 2009).

Опыт PD способствовал социальной принадлежности

Интересным открытием настоящего исследования является то, что степные полевки PD продемонстрировали значительное увеличение контактов с сородичами во время теста на социальную принадлежность во взрослом возрасте, что указывает на то, что опыт PD на раннем этапе развития имеет длительный характер. влияние на социальную принадлежность.Важно отметить, что этот эффект не был связан с изменением социального признания, и, следовательно, эффект был специфическим для поведения. Интересно отметить, что аналогичный эффект был обнаружен у взрослых самок степных полевок, которые пережили 6 недель социальной изоляции (Lieberwirth et al., 2012), и у самцов степных полевок, потерявших партнера (Sun et al., 2014). Присутствие сородича может быть анксиолитическим, уменьшая биоповеденческие реакции тревоги у животных (Smith and Wang, 2014). Поскольку у наших полевок PD не наблюдалось увеличения своего тревожного поведения, усиление социальной принадлежности, вероятно, могло быть вызвано повышенным социальным поиском, а не преодолением стресса.Было также показано, что легкие стрессоры, например, вызванные поведенческим тестом, усиливают аффилиативное поведение у крыс и степных полевок в зависимости от пола (DeVries et al., 1996; Beery and Kaufer, 2015; Muroy et al., 2016). Стоит отметить, что в нашем исследовании самцы полевок с PD, по-видимому, демонстрировали более высокий уровень социальной принадлежности, чем самки, и это, вероятно, было движущей силой различий в лечении. У самцов мандаринских полевок опыт БП также привел к усилению контакта тела с сородичами, вероятно, из-за снижения агрессивности взрослых особей (Frazier et al., 2006; Wang et al., 2012). Действительно, у самцов степных полевок повышенная социальная принадлежность, вызванная потерей партнера, была связана со снижением агрессии (Sun et al., 2014).

Стресс на раннем этапе развития может усиливать тревожное поведение (Brunton, 2013; Maccari et al., 2014) или устойчивость к стрессовым раздражителям (Faure et al., 2007; Zhang et al., 2014; Beery and Kaufer, 2015). ; Rana et al., 2015) в зрелом возрасте. Исследования, в которых материнская депривация использовалась как фактор стресса в раннем возрасте, показали, что оба фактора увеличиваются (Ishikawa et al., 2015) и снижение тревожности во взрослом возрасте у крыс (Zhang et al., 2014). Было показано, что у моногамных грызунов БП снижает тревожное поведение у степных полевок (Ahern, Young, 2009), но усиливает такое же поведение у мандаринных полевок (Jia et al., 2009). Наши данные показывают, что опыт БП не оказал значительного влияния на тревожное поведение во время тестирования наших животных. Наша парадигма PD либо оказалась неэффективной для длительного воздействия на тревожное поведение, либо эффективно повысила устойчивость к стрессовым стимулам, связанным с тестом EPM.Следует отметить снижение двигательной активности у полевок с БП, поскольку неясно, может ли это иметь вторичное влияние на тревожное поведение. В самом деле, когда локомоция контролировалась, субъекты, воспитанные без отца, попадали в объятия EPM раньше, чем субъекты, воспитанные с обоими родителями. Было показано, что родительская депривация на раннем этапе развития влияет на двигательную активность у других би-родительских видов, таких как мартышки (Dettling et al., 2002) и мандаринки (Jia et al., 2009; Cao et al., 2014). У мандаринских полевок опыт БП также снижает двигательную активность (Jia et al., 2009).

Опыт БП изменил нейрохимическую экспрессию в гиппокампе

Были исследованы несколько нейрохимических веществ и их рецепторы в гиппокампе из-за их продемонстрированной роли в обучении и памяти, стрессовых реакциях и социальном поведении (Carter et al., 1995; Kim et al. , 2015; Lieberwirth et al., 2016). Наши данные показывают, что опыт БП повлиял на некоторые из этих маркеров нейрохимическим образом.Наиболее яркое и последовательное различие между группами было обнаружено в системе BDNF в гиппокампе. MO-полевки показали повышенную экспрессию РНК и белка BDNF и его рецепторов TrkB в гиппокампе по сравнению с контрольными полевками, выращенными обоими родителями (MF). Этот эффект, по-видимому, был одинаков как у мужчин, так и у женщин. Обширные данные показали, что стрессовые стимулы на раннем этапе развития могут вызывать изменения в системе BDNF в зависимости от области мозга и стресса. Например, отделение от матери может увеличить BDNF в гиппокампе крыс после отъема, и это связано с изменениями тревожно-подобного поведения и активности оси HPA (Faure et al., 2007; Дэниэлс и др., 2009; Сури и др., 2013). Интересно, что уровни BDNF и TrkB в гиппокампе чаще всего повышаются после отъема и снижаются в более зрелом возрасте в ответ на раннее отделение от матери у грызунов (Lee et al., 2012; Suri et al., 2013; Daskalakis et al., 2015). У взрослых крыс раннее отделение от матери снижает BDNF в гиппокампе, что приводит к нарушению памяти распознавания у самок и ухудшению рабочей памяти у самцов (Marco et al., 2013; Suri et al., 2013; Hill et al., 2014). Было обнаружено, что влияние разлучения с матерью на реакцию на стресс дополнительно опосредовано возрастом опыта разлучения с матерью и продолжительностью разлучения с матерью (Levine et al., 1991; Levine, 2005). Было высказано предположение, что повышенная активность BDNF в мозге в ответ на стресс в раннем возрасте может действовать как механизм защиты от воздействия стресса в будущем (Daniels et al., 2009; Suri et al., 2013; Daskalakis et al., 2015) . Например, раннее разделение с матерью, связанное с повышенной экспрессией BDNF в гиппокампе у крыс после отлучения от груди, связано со снижением тревожного поведения и повышением производительности в когнитивно-поведенческих задачах (Daniels et al., 2009; Сури и др., 2013). Интересно, что наши данные показывают, что опыт БП увеличивал не только BDNF, но также и усеченные, и полноразмерные изоформы рецептора TrkB у степных полевок. Это было дополнительно продемонстрировано положительной корреляцией между уровнями мРНК рецептора BDNF и TrkB, а также между уровнями белков BDNF и TrkBt (тренд с белком TrkBFL). Усеченные и полноразмерные рецепторы TrkB различными путями участвуют в регуляции роста дендритов (Yacoubian and Lo, 2000; Hartmann et al., 2004). Таким образом, опыт БП может вызывать изменения адаптивной пластичности системы BDNF в ответ на эмоциональные проблемы, связанные с отцовской депривацией, и прививать полевок против будущих стрессорных факторов, во многом подобно эффектам обогащения окружающей среды и раннего обращения с ними у других видов грызунов (Meaney et al., 1993).

Также стоит упомянуть, что наши данные указывают на положительную корреляцию уровней белка между системами BDNF и CRH в гиппокампе. Взаимодействия между системами BDNF и CRH участвуют в регуляции нейральной пластичности.Например, было показано, что CRH увеличивает или снижает уровни BDNF в зависимости от области мозга и соответственно изменяет плотность позвоночника (Bayatti et al., 2005; de la Tremblaye et al., 2016). Поскольку BDNF действует на рецепторы TrkB, регулируя рост дендритных шипов (McAllister et al., 1995; An et al., 2008), система CRH может регулировать этот процесс (Bayatti et al., 2005; de la Tremblaye et al., 2016). ), эти корреляции между маркерами BDNF и CRH могут дополнительно поддерживать идею о том, что повышенная активность BDNF, связанная с БП, может изменять плотность гиппокампа.

Опыт БП изменил экспрессию эпигенетических маркеров гиппокампа

Недавние данные показали, что опыт ранней жизни может влиять на поведение взрослых через эпигенетические механизмы (Babenko et al., 2015). Например, в крысиной модели ранней жизни изменчивости полученной материнской заботы, потомство маток с высоким уровнем облизывания / ухода за телом, по сравнению с потомками из маток с низким уровнем облизывания / ухода, более устойчиво к стрессу из-за повышенной экспрессии GR в гиппокампе, который является регулируется повышенным ацетилированием h4, в частности лизином 9, и снижением метилирования в промоторной области гена GR (Fish et al., 2004; Zhang et al., 2013). У мышей отделение от матери во время развития привело к усилению ацетилирования h4 в гиппокампе, что сопровождалось увеличением плотности и сложности шипов в области CA3 (Xie et al., 2013). Кроме того, социальный стресс, скученность и новая среда во время перипубертатно-ювенильного периода увеличивают ацетилирование h4 гиппокампа и замшелые волокна при одновременном снижении депрессивно-подобного поведения и вызванного стрессом CORT в плазме (Oztan et al., 2011). Интересным открытием нашего исследования является то, что опыт БП был связан с увеличением h4total и h4ace в гиппокампе полевок.Кроме того, БП испытывает значительное повышение уровня h4K9ace в гиппокампе у самок, но не самцов полевок. Эти данные указывают на то, что ранний опыт БП может влиять на ацетилирование гистонов в гиппокампе, возможно, в зависимости от пола, хотя мы до сих пор не знаем конкретный ген (ы), на которых происходит ацетилирование гистонов, и функциональное значение таких эпигенетических событий для мозга. и поведение. Стоит отметить, что эпигенетические события участвуют в регуляции поведения социальных связей как у самцов, так и у самок степных полевок (Wang et al., 2013; Duclot et al., 2016).

Следует упомянуть несколько проблем. Во-первых, наши данные показывают, что опыт БП также влияет на другие нейрохимические маркеры в гиппокампе полевок. Например, при PD повышается GR β у женщин, но снижается OXTR и повышается уровень белка CRHR2 у мужчин, что указывает на потенциальное полоспецифическое влияние PD на экспрессию нейрохимических рецепторов. Интересно, что уровни РНК GR α и GR β положительно коррелировали с уровнями РНК TrkB, указывая на взаимодействие между обеими системами, взаимодействие, ранее участвовавшее в регуляции синаптической пластичности (Jeanneteau and Chao, 2013).Хотя основные механизмы и функциональное значение таких эффектов до сих пор неизвестны, эти интересные данные не следует игнорировать, особенно учитывая роль GR и CRHR в стрессовых реакциях и преодолении стресса (McEwen, 2007; Bosch et al., 2009, 2016; Farrell и О’Кин, 2016; Вяс и др., 2016). Во-вторых, в нашем настоящем исследовании только определенный процент сексуально наивных самцов и самок степных полевок проявлял спонтанное родительское поведение по отношению к детенышам особого вида, что согласуется с предыдущими исследованиями (Lonstein and De Vries, 2001; Ahern and Young, 2009).К сожалению, ограниченное количество субъектов не позволило нам изучить влияние PD на конкретные модели родительского поведения. Мы полагаем, что этот интересный вопрос все же следует продолжить в дальнейших исследованиях, поскольку было показано, что индивидуальные характеристики родительского поведения могут передаваться из поколения в поколение (Francis et al., 1999; Champagne and Meaney, 2007) и регулироваться эпигенетическими механизмами (Champagne et al. др., 2006). В-третьих, убедительный лечебный эффект, наблюдаемый на систему BDNF и ацетилирование h4 в гиппокампе полевок, указывает на потенциальную эпигенетическую регуляцию BNDF и TrkB и его последующее поведение — интересный вопрос, которому следует следовать.В предыдущем исследовании эпигенетическая регуляция BDNF в гиппокампе участвовала в опосредовании депрессивноподобного поведения у мышей (Tsankova et al., 2006). Наконец, следует упомянуть одну оговорку в настоящем исследовании. Наши эксперименты изначально были предназначены для оценки влияния БП на тревожное и социальное поведение, включая социальное признание, которое отражает процессы социальной памяти. В будущих исследованиях будет интересно изучить влияние PD на задачи обучения и запоминания с помощью поведенческих тестов, таких как водный лабиринт Морриса, лабиринт Барнса и лабиринт с радиальной рукой (Lieberwirth et al., 2016).

Заключение

Данные нашего настоящего исследования показывают, что опыт БП на раннем этапе развития повлиял на социальную принадлежность потомства, когда они стали взрослыми, в зависимости от поведения. Кроме того, такой опыт PD был связан с повышенной экспрессией гена и белка BDNF и его киназы B рецептора тропомиозина, а также с уровнями общего ацетилирования гистона 3 и гистона 3 в гиппокампе. Вместе эти данные указывают на то, что отцовский опыт во время развития может изменять транскрипцию генов и синаптическую пластичность во взрослом гиппокампе потомства посредством эпигенетических механизмов.Это, в свою очередь, может служить для изменения социального аффилированного поведения во взрослом возрасте. В самом деле, было обнаружено, что PD влияет на синаптическую пластичность в зависимости от типа нейронов и областей мозга у др. Видов двупародительских грызунов, Octodon degus (Pinkernelle et al., 2009). У наших степных полевок уровни облизывания и ухода, получаемые потомством, отрицательно коррелировали с мРНК BDNF и экспрессией белка в гиппокампе. Изменения в системе BDNF гиппокампа (и ее опосредованные изменения в синаптической пластичности) у полевок с PD могут отражать компенсаторные механизмы дефицита нейрохимической и синаптической пластичности из-за снижения родительского контакта во время раннего развития.Кроме того, это может отражать адаптацию развития, служащую прививкой субъектов против будущих жизненных стрессоров (Helmeke et al., 2001).

Наконец, учитывая негативную связь между отсутствием отца в раннем возрасте и благополучием взрослых, о которой в основном сообщается в человеческой литературе (McLanahan et al., 2013), удивительно, что мы не смогли найти явных недостатков в социальном поведении прерий PD. полевки в настоящем исследовании. Это может быть связано с множеством факторов, включая неоптимальное время экспериментальных манипуляций (например,g., удаление отца) и / или поведенческое тестирование (например, подростковый возраст по сравнению с взрослой жизнью), как намекают исследования на людях (McLanahan et al., 2013). Кроме того, отсутствие отца во время развития у людей может быть связано с социальной стигмой, которая может усугублять влияние отсутствия отца на исход для взрослых, и этот фактор не будет применяться в контексте нашего исследования. Тем не менее, необходимы дальнейшие исследования для лучшего понимания последствий, а также основных нейронных и нейрохимических механизмов лишения отца на раннем этапе развития.

Повышенная тревожность и снижение коммуникабельности, вызванные отцовской депривацией, включают PVN-PrL OTergic путь

[Примечание редакции: ответы автора на первый раунд рецензирования приводятся ниже.]

Рецензенты отметили, что это исследование затрагивает интересную тему, и согласились с тем, что мандаринские полевки представляют собой хорошую модель для исследования отцовской депривации. Тем не менее, они определили необходимость проведения дополнительных экспериментов для подтверждения сделанных выводов, а также областей, в которых представление и анализ результатов можно было бы улучшить.Что наиболее важно, они подчеркнули ограниченную новизну исследования и отсутствие механистического понимания. На основании этих опасений мы пришли к выводу, что это исследование не является прорывом в этой области, который оправдал бы публикацию в журнале с широким кругом интересов, таком как eLife.

Рукопись доработана по предложению рецензентов. В частности, для дальнейшего выявления лежащих в основе механизмов были добавлены оптогенетические эксперименты для исследования участия проекции нейронов PVN OT в PrL в эффектах отцовской депривации.Кроме того, влияние PD перед отъемом на нейрональную активность PrL, NAc (количество клеток Fos-IR) и PVN (процент нейронов с двойной меткой c-fos / OT) при воздействии на молодых полевок также было исследованы. Мы считаем, что рукопись была значительно улучшена по сравнению с предыдущей версией.

Рецензент № 1:

Результаты этого исследования показывают, что отцовская депривация мандаринских полевок в период до отъема (PD14-21) приводит к усилению тревожного поведения и снижению социальных предпочтений, а также к нарушению системы ОТ мПФК в этих эффектах.В целом заданный вопрос интересен, и результаты очевидны, хотя у меня есть несколько замечаний / опасений:

1) Авторы предполагают, что пагубные последствия БП обусловлены нарушенной «эмоциональной привязанностью», но они не дают этому практически никакого оправдания. Увеличение тревожного поведения и снижение социальных предпочтений не свидетельствует о том, что нарушение привязанности является случайным фактором.

Одно из наших предыдущих исследований показало, что детеныши мандаринки демонстрируют более сильную эмоциональную привязанность к отцам по тесту социальных предпочтений в возрасте от 14 до 21 дня (He et al., 2017). В настоящем исследовании отцовская депривация перед отъемом усиливала тревожное поведение и ослабляла социальные предпочтения. Таким образом, мы предполагаем, что эти эффекты вызывает нарушение эмоциональной привязанности между отцом и потомством.

2) Использование антител к рецепторам OTR было поставлено под сомнение. Следовательно, необходимо предоставить более подробную информацию о специфичности этого антитела и любых проведенных контрольных экспериментах. В идеале авторы подтвердили бы текущие данные другим методом.

По предложению автора обзора, был проведен положительный контрольный эксперимент (лизат ткани селезенки мыши). Результат дополнительно подтверждает специфичность этого антитела.

Дорожка 2 и Дорожка 3: антитело против рецептора окситоцина [EPR12789] (ab181077, Abcam) при разведении 1/2000.

Дорожка 1: Белковый маркер.Дорожка 2: лизат ткани mPFC полевок. Дорожка 3: лизат ткани селезенки мыши.

3) В разных местах рукописи авторы обсуждают эффекты ОТ на рецептор V1a и даже предполагают в Обсуждении, что ОТ может регулировать тревожное поведение и социальные предпочтения у мужчин через OTR и V1aR в коре головного мозга. Таким образом, кажется удивительным, что в фармакологический эксперимент (эксперимент 3) они не включали дополнительную группу, которой вводили ОТ совместно с антагонистом рецептора AVP.

Как предложил рецензент, была включена дополнительная группа, в которую вводили ОТ совместно с антагонистом рецептора AVP (10 нг ОТ / 10 нг V1aRA).

4) Неточное описание статистических результатов первого эксперимента. В частности, данные% исследования для мужчин и женщин описываются одинаково, за исключением того, что для мужчин было взаимодействие, а для женщин — только основной эффект стимула.

На основании предложений рецензента мы изменили описание статистических результатов.

«Не было обнаружено значимого воздействия x стимул на процент времени исследования у самок (F (1,24) = 1,553, p = 0,225), но был обнаружен основной эффект отсутствия / присутствия стимула у мандариновой полевки (F ( 1,24) = 11,785, p <0,01) ».

5) Для эксперимента 3 возможность диффузии ОТ за пределы PL mPFC не рассматривалась. Также было упомянуто, что данные были исключены, если кончики канюли были расположены в других областях мозга. Интересно, достаточно ли количества субъектов, которые пропустили установку канюли, чтобы сформировать «группу пропущенных» для контроля специфичности места.

Хорошее предложение. Но в «группе промахов» есть только одна полевка в группе самцов (самец: 10 нг ОТ / 100 нг ОТА: n = 5) и две полевки в группе самок (самка: 1 нг ОТ / 10 нг ОТА: n = 5, 1 нг ОТ / 100 ng OTA: n = 5). Размер выборки слишком мал для «группы промахов». Кроме того, ОТ только в PL mPFC снижал тревожное поведение, но не в Cg и IL (Sabihi et al., 2017).

Sabihi S, Dong SM, Maurer SD, Post C, Leuner B. 2017. Окситоцин в медиальной префронтальной коре головного мозга ослабляет тревогу: анатомическая и рецепторная специфичность и механизм действия.Нейрофармакология 125: 1–12.

Рецензент № 2:

[…] Слабость отчета — отсутствие новизны. Окситоцин, возможно, является наиболее изученным пептидом на планете из-за его роли в социальных связях и тревоге. Действительно, авторы приводят столь убедительный аргумент, что тревога, вызванная потерей родителя, должна быть опосредована окситоцином, что любое открытие об обратном было бы поистине удивительным и интересным. Но в нынешнем виде текущий отчет лишь незначительно дополняет существующую обширную литературу.

Стресс в раннем возрасте, такой как разрыв отношений между родителями и потомками, тесно связан с патологией психоневрологических расстройств у взрослых. Большинство исследований на грызунах было сосредоточено на влиянии стресса в раннем периоде жизни с использованием материнского разлучения с постнатального дня (PND) от 0 до 14. В отличие от этого, влияние отцовской депривации (PD) на поведение взрослых и мозг все еще плохо изучено. Нейронные механизмы, лежащие в основе воздействия разрыва привязанности отца к потомству перед отъемом, на поведение потомства остаются неуловимыми, а круговые механизмы плохо изучены.Наш результат показал, что PD до отъема увеличивает тревожность и снижает социальные предпочтения. В этом процессе может быть задействована предлимбическая система ОТ коры головного мозга. Мы впервые обнаружили, что вызванное БП тревожное поведение и нарушение социальных предпочтений могут быть спасены оптогенетической активацией PVN-PrL OTergic волокон. В целом, эти результаты обеспечивают новый путь, с помощью которого БП может влиять на эмоции и социальное поведение, и предлагают критическую цель для лечения психических расстройств, связанных с БП.

Продвижением было бы некое механистическое понимание того, как на иннервацию окситоцином влияет лишение родителей в раннем возрасте. Умирают ли нейроны окситоцина? Или экспрессия гена подавлена? Существуют ли устойчивые эпигенетические модификации? И т. Д. Однако перед тем, как продолжить это исследование, важно также предоставить гораздо более убедительные доказательства того, что иннервация на самом деле изменилась. Представленные здесь изображения не обнадеживают с количественной точки зрения.

Мы обнаружили, что PD снижает количество ОТ-положительных нейронов в PVN. Некоторые исследования показали, что префронтальная кора головного мозга после разлучения с матерью поражена гораздо сильнее, чем другие области мозга (Gapp et al., 2016). Мы предполагаем, что на окситоцинергические нейроны в рамках проекта PVN в PrL влияет PD. Более того, некоторые гены и эпигенетические модификации нуждаются в дальнейшем изучении. Поскольку в PrL есть несколько ОТ-иммунореактивных волокон, и мы не предоставляем более убедительных доказательств, мы удалили результат ОТ волокон.

Гапп К., Коркоба А., Ван Стинвик Г., Мансуй И. М. и Дуарте Дж. М. (2016). Метаболические изменения мозга у мышей, подвергшихся постнатальному травматическому стрессу, и у их потомков. Журнал церебрального кровотока и метаболизма, 37, 2423–2432.

Рецензент № 3:

[…] Таким образом, новизна данной рукописи ограничивается конкретной парадигмой БП мандаринских полевок на ПНД 14-21. Более того, в рукописи недостаточно данных о механизме поведенческих и нейроанатомических нарушений.Поведенческое спасение с помощью инъекции ОТ (рис. 7) является в некоторой степени новым, но очень ограниченным и предварительным с точки зрения определения точной нейронной цепи, на которую влияет введение ОТ. У меня также есть некоторые серьезные технические проблемы, которые перечислены ниже.

Для дальнейшего изучения механизмов, лежащих в основе эффектов отцовской депривации до отъема, в новую версию рукописи мы добавили новый эксперимент для изучения влияния PD до отъема на нейронную активность PrL, NAc (количество Fos- IR-клетки) и PVN (процент нейронов с двойной меткой c-fos / OT) при воздействии на молодую полевку.Кроме того, мы исследовали участие проекции нейронов PVN OT на mPFC в эффектах отцовской депривации с использованием оптогенетических методов. Мы впервые обнаружили, что активация окситоцинергических окончаний в mPFC оптогенетическим методом спасает социальные предпочтения и снижает тревожное поведение, вызванное отцовской депривацией.

Особые серьезные проблемы:

Рисунок 1: Дополнительные поведенческие анализы, связанные с тревогой (например, приподнятый крестообразный лабиринт, анализ переноса темного света) могут помочь в дальнейшей характеристике тревожности у полевок с БП и могут способствовать установлению дифференциальной реакции на БП у самок и самок.самцы.

Мы добавили тест «Светлый-Темный бокс» для оценки тревожного поведения взрослых полевок. Не было обнаружено значимого взаимодействия пола и лечения в процентном соотношении времени в центральной области (F (1,24) = 0,019, p = 0,893) и в процентном соотношении времени в светлой области (F (1,24) = 0,039, p = 0,884). Процедуры также оказали значительное влияние на процент времени в центральной области (F (1,24) = 25,628, p <0,01) и процент времени в светлой области (F (1,24) = 19,812, p <0.01), тогда как секс не оказал значительного основного эффекта в процентном соотношении времени в центральной области (F (1,24) = 0,029, p = 0,867) и в процентном соотношении времени в светлой области (F (1,24) = 0,227, p = 0,638). Таким образом, данные по разным полам анализировались отдельно.

Рис. 3. Изображения, показывающие влияние частичных разрядов на волокна PLC OT-IR, очень низкого качества и неубедительны. Читателю будет трудно поверить, что сотни волокон OT-IR были надежно определены количественно.

Мы удалили этот раздел и добавили экспериментальный результат, касающийся влияния PD перед отъемом на PrL, NAc (количество клеток Fos-IR) и PVN (процент нейронов с двойной меткой c-fos / OT) активность нейронов после контакта с молодой полевкой по сравнению с воздействием игрушки.

Рис. 4: Эта цифра говорит об отрицательном результате (нет разницы в ядрах прилежащих волокон ОТ), и ее нет необходимости приводить в качестве основной цифры. Это будет более уместно как дополнительный рисунок или как часть рисунка 3.

Мы обнаружили, что PD снижает количество ОТ-положительных нейронов в PVN. Некоторые исследования показали, что префронтальная кора головного мозга после разлучения с матерью поражена гораздо сильнее, чем другие области мозга (Gapp et al., 2016). Мы предполагаем, что на окситоцинергические нейроны в рамках проекта PVN в PrL влияет PD.Поскольку в PrL есть несколько ОТ-иммунореактивных волокон, и мы не предоставляем более убедительных доказательств, мы удалили результат ОТ-волокон в PrL и NAc.

Гапп К., Коркоба А., Ван Стинвик Г., Мансуй И. М. и Дуарте Дж. М. (2016). Метаболические изменения мозга у мышей, подвергшихся постнатальному травматическому стрессу, и у их потомков. Журнал церебрального кровотока и метаболизма , 37, 2423–2432.

Рис. 5. Качество вестерн-блотов, показывающих уровни OTR и V1aR, является неприемлемым.Во-первых, гели обрезаются, чтобы нельзя было оценить специфичность антител (которые, как известно, являются проблематичными). Во-вторых, некоторые белковые полосы настолько слабы и близки к фоновому уровню, что на некоторых панелях и контрольные нагрузки антитубулина не равны, и, следовательно, экспериментальные данные о влиянии PD на OTR (рис. 5A и B) и V1aR (рис. 5C) не поддерживаются в достаточной степени.

Как предложил рецензент, было проведено больше дополнительных экспериментов с Вестерн-блоттингом, чтобы получить более точный результат.

Рисунок 6: Этот рисунок демонстрирует влияние ПД на уровни ОТ в сыворотке крови у женщин. Измерение уровней ОТ в сыворотке с использованием наборов для ELISA критикуется в этой области [см .: Ленг и Сабатье Дж. Нейроэндокринол. 2016 Октябрь; 28 (10). DOI: 10.1111 / jne.12413]. В частности, метод извлечения имеет решающее значение и может вызвать артефакты. Авторы заявляют, что это было выполнено с использованием «полевок-специфичного иммуноферментного анализа» (Shanghai Xitang Biotechnology, Шанхай, Китай) в соответствии с инструкциями производителей.»однако они не предоставляют подробностей или ссылок относительно действительности этого анализа.

Спасибо за ваши предложения. Измерение уровней ОТ в сыворотке может быть недостаточно надежным при использовании наборов для ИФА. Эти высокие значения могут быть связаны с их недостаточной надежностью при определении уровней ОТ в не извлеченных образцах жидкостей организма, имея в виду, что будет больше меченых молекул с высоким содержанием, чем только ОТ (Ленг и Сабатье, 2016). Когда эти мешающие факторы были удалены путем экстракции образцов плазмы, иммуноанализы дали измерения, согласующиеся с биопробами.Однако во многих недавних публикациях используется иммуноферментный анализ для измерения уровней в плазме без извлечения образцов. Подобно первым радиоиммунным тестам неэкстрагированной плазмы, этот метод дает невероятно высокие и полностью ошибочные измерения (Ленг и Сабатье, 2016). Таким образом, мы удалили результат уровней ОТ и КОРТ в сыворотке.

Ленг Г., Сабатье Н. 2016. Измерение окситоцина и вазопрессина: биоанализы, иммуноанализы и случайные числа. Журнал нейроэндокринологии 28. Doi: 10.1111 / jne.12413.

Рис. 7. Влияние применения PLC OT на тревожность и поведение в отношении социальных предпочтений у PD-полевок. Представление данных на этом рисунке очень сбивает с толку. В частности, неясно, сравнивали ли авторы поведенческие эффекты ОТ на БП по сравнению с наивными (не БП) полевками. Это следует уточнить.

Потому что в эксперименте было шесть групп, разделенных на, и между многими группами были обнаружены значительные различия. Таким образом, мы использовали «Полосы без одинаковых букв значительно отличаются» на Рисунке 7.Мы пояснили, что в подписи к рисунку «Влияние введения PLC OT на тревожное поведение и социальные предпочтения мандариновых полевок с PD».

[Примечание редакции: ответы автора на повторную рецензию приводятся ниже.]

Резюме:

Рецензенты согласились с тем, что проведенные дополнительные эксперименты укрепили эту статью, преодолев несколько проблем, которые были подняты ранее, а также обеспечили более прямую связь между эффектами родительской депривации и активностью в проекции окситоцинергических нейронов PVN на mPFC.Однако они разошлись во взглядах на важность этих результатов.

Комментарии рецензентов включены ниже. Кроме того, рецензирующий редактор отметил следующие моменты, которые необходимо учесть при любой редакции:

1) Оптогенетические эксперименты требуют дополнительной информации, а важные элементы управления отсутствуют. К ним относятся инъекции, исключающие ChR2 из вирусной конструкции, чтобы продемонстрировать специфичность эффекта; количественное определение совместной локализации ChR2-mCherry и экспрессии окситоцина в PVN;

Как предложил рецензент, более подробная информация об оптогенетических экспериментах была добавлена ​​в Материалы и методы и Результаты.Была введена вирусная конструкция, в которой отсутствует ChR2, и была продемонстрирована специфичность эффектов.

Было количественно определено

нейронов экспрессии ChR2-mCherry, коэкспрессирующих ОТ, и обнаружено, что большинство нейронов коэкспрессируются ChR2 и ОТ. У самцов процент коэкспрессируемых нейронов ChR2 и ОТ в ChR2 составляет 60,6% (132/218, от 2 полевок), а у самок — 70,9% (190/268, от 2 полевок).

Мы добавили данные о совместной локализации OT / mCherry у полевок PD (рисунок 7 — приложение к рисунку 3) и наивных полевок (рисунок 8 — приложение к рисунку 1).

Предоставляет более подробную информацию об общей продолжительности оптогенетической стимуляции.

Подробная информация добавлена ​​в Материалы и методы. Во время оптогенетических экспериментов продолжительность оптогенетической стимуляции как в тесте социальных предпочтений, так и в социальной памяти составляла 10 минут на основе одного предыдущего исследования (Hung et al., 2017). Таким образом, испытуемые получали около 25 минут синих лазерных импульсов в течение всей фазы тестирования.

Как долго длится поведенческие изменения после оптогенетической активации?

Фотостимуляция синим светом вызвала очевидные изменения в поведении, и это изменение исчезло через 8 часов после фотостимуляции у PD-полевок (рис. 7 — приложение к рисунку 4).У наивных полевок по-прежнему наблюдались изменения тревожного поведения и снижение социальных предпочтений (за исключением самцов) через 8 часов после освещения желтым светом, эффект стимуляции желтым светом исчезал в течение 8-24 часов (рисунок 8 — приложение к рисунку 2).

Это особенно важно, если вы хотите доказать, что аномальное социальное поведение может быть спасено таким образом, и связано с беспокойством, поднятым рецензентом 1 по поводу постоянства (или иного) последствий родительской депривации.

Мы добавили дальнейшее обсуждение по предложениям рецензента.

«Изменения в путях ОТ, вызванные тяжелым стрессом в раннем возрасте, могут передаваться следующему поколению (Toepfer et al., 2017). […] Таким образом, родительская депривация влияет на окситоциновую систему потомства на постоянной основе ».

Можно ли спасти поведенческие изменения, предоставив полевкам с PD более широкое социальное взаимодействие в более позднем возрасте?

Потому что дружеское социальное взаимодействие может увеличить выброс окситоцина и изменить систему ОТ, и, возможно, спасти поведенческие изменения, вызванные БП, с участием системы ОТ.Хорошее предложение. Мы можем проверить это в будущем исследовании.

Оптогенетические эксперименты также были бы усилены, если бы были измерены поведенческие последствия экспрессии ингибирующего опсина в аксонах PVN-mPFC.

Как предположил рецензент, наивным полевкам вводили вирус с промоторным геном ингибирующего опсина (rAAV-Ef1α-DIO-eNpHR3.0-mCherry + rAAV-окситоцин-Cre) или контрольный вирус (rAAV-Ef1α-DIO-mCherry + rAAV-окситоцин. -Cre) в двусторонний PVN.Мы также обнаружили, что оптогенетическое ингибирование пути PVN (OTergic) -PrL нарушает социальные предпочтения и повышает уровень тревожного поведения у наивных полевок, демонстрирующих эффекты PD перед отъемом (рис. 8).

2) Качество написания оставляет желать лучшего и местами не имеет смысла. Бессмысленное выражение «социально мандариновая полевка» до сих пор встречается в аннотации. Список литературы также неполный.

Как предположил рецензент, рукопись была отредактирована редактором-носителем английского языка.Мы удалили из аннотации «социально-мандариновые полевки» и одну за другой проверяли ссылки.

3) Есть много графиков, в которых используются гистограммы с планками ошибок; должны отображаться отдельные точки данных, а не планки погрешностей.

По предложению рецензента мы добавили отдельные точки данных в гистограммы.

Рецензент № 1:

Авторы проделали некоторую дополнительную работу и исправили некоторые слабые места, но я изначально беспокоился о том, что открытие было предсказуемым и поэтому новизна невысока.Понимание того, как родительская депривация влияет на систему окситоцина на постоянной основе, было бы шагом вперед. Этот аванс здесь не делается.

Мы добавили дальнейшее обсуждение согласно предложениям рецензента.

«Изменения в путях ОТ, вызванные тяжелым стрессом в раннем возрасте, могут передаваться следующему поколению (Toepfer et al., 2017). […] Таким образом, родительская депривация влияет на окситоциновую систему потомства на постоянной основе ».

https://doi.org/10.7554 / eLife.44026.029

Родительская депривация — обзор

Тяжелая утрата у детей и подростков

Ранние исследования влияния тяжелой утраты смотрели на взаимосвязь психических расстройств у взрослых с тяжелой утратой в детстве. Исследователи обнаружили, что частота ранней родительской смерти выше среди психиатрических стационарных пациентов по сравнению с контрольной группой и что потеря родителей в детстве связана с повышенным риском депрессии и тревожных расстройств.У пациентов, переживших потерю и разлуку в детстве, было зарегистрировано больше попыток самоубийства, чем у пациентов без переживаний потери. Однако в этих исследованиях изучалась частота потери родителей у пациентов и контрольной группы, а не рассматривались последствия потери родителей в результате наблюдения за детьми, потерявшими одного из родителей. Еще одним ограничением является ретроспективный дизайн и опора на воспоминания о событиях, произошедших в раннем детстве. Воспоминания психиатрических пациентов о событиях могут быть искажены их текущей психопатологией, что приводит к переоценке связи между утратой в детстве и психопатологией взрослых.Наконец, задержка между моментом смерти и началом психических расстройств снижает вероятность того, что эти психические расстройства являются только результатом самой смерти. Джордж Браун и его коллеги обнаружили, что связь между ранней потерей и депрессией у женщин среднего возраста опосредована опытом «плохого ухода». Другими словами, это был каскад событий, последовавших за тяжелой утратой, который привел к дисфункциональному исходу. а не тяжелая утрата как таковая.

Исследования, в которых изучаются дети и подростки после смерти родителя, брата, сестры или сверстника, свидетельствуют о том, что дети и подростки действительно скорбят.Сообщалось о различных симптомах горя, таких как шок, гнев, страх, замешательство, онемение, чувство вины и чувство ответственности за смерть, безнадежность и чувство тщетности. Как и у взрослых, тяжелая утрата у детей и подростков также связана с неблагоприятными последствиями, такими как депрессия, поведенческие проблемы, тревога, посттравматическое стрессовое расстройство, галлюцинации, суицидальные мысли и попытки, а также снижение психосоциального функционирования.

В литературе о тяжелой утрате детей и подростков уделяется большое внимание проблеме самоубийства.Предполагается, что тяжелая утрата в результате самоубийства является особенно тяжелой формой тяжелой утраты по сравнению с другими способами смерти. В 1976 году Шеферд и Барраклаф первыми оценили неотобранную выборку из 36 детей в возрасте от 2 до 17 лет, потерявших одного из родителей в результате самоубийства. Около 17% детей в этой выборке после смерти получали психиатрическое лечение, а у 11% были проблемы с поведением, которые привели к проблемам с властями. Другие исследования выявили усиление симптомов депрессии, посттравматического стрессового расстройства, фантазий о воспоминаниях и воссоединении, а также суицидальных мыслей.Эти первоначальные исследования страдали несколькими ограничениями (например, очень маленькие размеры выборки, серьезные ошибки отбора при рассмотрении удобных выборок, которые могут не быть репрезентативными для детей, потерявших родителей в результате самоубийства, и отсутствие контрольной группы детей, потерявших близких, или детей, потерявших близких по причинам. кроме самоубийства), чтобы иметь возможность изучить последствия тяжелой утраты, характерные для самоубийства.

В 1999 году Серель и его коллеги сравнили 26 детей, погибших в результате самоубийства, с 332 детьми, потерявшими близких в результате родительской смерти, не вызванной самоубийством.Эти две группы были схожи по суицидальности, посттравматическому стрессу и депрессии после смерти. Однако дети, покончившие с собой тяжелую утрату, чаще испытывали тревогу сразу после смерти по сравнению с детьми, потерявшими ребенка без суицида (74% против 38%), проблемы с поведением в 6 месяцев (13,6% против 2,5%) и вызывающее оппозиционное расстройство в 13 лет. месяцев (27,8% против 8,5%).

Брент и его коллеги изучали влияние суицида сверстников на 146 друзей из 26 самоубийств среди подростков по сравнению с демографически подобранной контрольной группой на базе сообщества.Друзья и братья и сестры, подвергшиеся суициду со стороны сверстников, чаще, чем контрольная группа, имели впервые возникшую большую депрессию (29,5% против 4,8%) и посттравматическое стрессовое расстройство (5,5% против 0,0%). Повышенная частота депрессии была обнаружена в течение одного месяца после смерти, но не в последующий период времени. В 2000 году Синтия Пфеффер и ее коллеги сравнили 16 детей, родители которых покончили жизнь самоубийством за 1,5 года до интервью, с 64 детьми, родители которых умерли от рака. Дети, потерявшие близких в результате самоубийства родителей, сообщали о более высоких общих показателях депрессии.Тем не менее, эти две группы были схожи по общей компетентности и поведенческим проблемам, и обе группы имели уровни, сопоставимые с уровнями нормативной выборки. То же верно и в отношении суицидальных мыслей. Ирвин Сэндлер и его коллеги не обнаружили различий в проблемах психического здоровья детей, горе, факторах риска и защитных факторах в зависимости от причины смерти родителей.

Результаты вышеуказанных исследований не положили конец спорам о том, подвергаются ли дети и подростки, потерявшие близких в результате самоубийства, более высокому риску психологических последствий тяжелой утраты, чем те, кто потерял близких по другим причинам.В 2008 году Брент и Мелхем провели крупнейшее лонгитюдное популяционное исследование утраты родителей и сравнили детей, родители которых умерли в результате самоубийства, несчастного случая или внезапной естественной смерти, с контрольной группой, в которой оба родителя были живы. Было обнаружено, что тяжелая утрата свидетельствует о повышенном риске депрессии и посттравматического стрессового расстройства у потомства даже после учета воздействия предшествующих факторов риска, таких как биполярное расстройство, злоупотребление алкоголем и психоактивными веществами, а также расстройство личности, наблюдаемое у умершего родителя.Важно отметить, что этот повышенный риск депрессии и посттравматического стрессового расстройства не зависел от типа смерти родителей. Через два года после потери у потомства наблюдались стойкие последствия утраты родителей, включая более высокие показатели депрессии, алкогольной и наркотической зависимости, более выраженные функциональные нарушения и самооценку беспокойства. Тем не менее, дети, потерявшие одного из родителей в результате самоубийства, демонстрировали даже более высокие показатели депрессии по сравнению с группой естественной смерти и контрольной группой, а также более высокими показателями злоупотребления алкоголем и психоактивными веществами по сравнению только с контрольной группой.Эти данные показывают, что ранняя родительская смерть, независимо от причины смерти, связана с психиатрическими проблемами. Кроме того, молодые люди, потерявшие родителей в результате самоубийства, по-видимому, особенно уязвимы для длительной депрессии и злоупотребления алкоголем или психоактивными веществами.

Сложное горе, как синдром, было впервые описано у детей и подростков Мелхемом и его коллегами в 2004 году. Как и у взрослых, подростки также испытывали сложные реакции горя после совершения самоубийства сверстников, которое не зависело от депрессии и посттравматического стрессового расстройства.Осложненное горе связано с пятикратным повышением риска суицидальных мыслей у молодых людей, потерявших близких, после борьбы с депрессией. Позднее было обнаружено, что осложненное горе связано с функциональными нарушениями у детей и подростков, потерявших близких родителей, даже после контроля над депрессией, тревогой и посттравматическим стрессовым расстройством. В 2009 году Лет Диллен и его коллеги повторили эти результаты и сообщили, что сложное горе отличается от депрессии и тревоги у молодых людей.

(PDF) Отцовская депривация и ее пагубное влияние на развитие ребенка

Отцовская депривация и ее пагубные последствия для развития ребенка 13

Wygant, S.А. (март, 2014 г.)

8. Эллис, Б. Дж., Бейтс, Дж. Э., Додж, К. А., Фергюссон, Д. М., Хорвуд, Дж. Дж., Петтит, Г. С., &

, Вудворд, Л. (2003). Подвергает ли дочерей отсутствие отца особому риску ранней половой жизни и подростковой беременности? Развитие ребенка, 74 (3), 801-821.

9. Гроссманн, К., Гроссманн, К. Э., Фреммер-Бомбик, Э., Киндлер, Х., Шойрер-Инглиш, Дж.,

,

и Циммерманн, П. (2002). Уникальность отношений привязанности между ребенком и отцом:

Чуткая и сложная игра отца как основная переменная в 16-летнем лонгитюдном исследовании.

Социальное развитие, 11 (3), 301-337.

10. Хайм К., Шугарт М., Крейгхед В. Э. и Немерофф К. Б. (2010). Нейробиологические и

психиатрические последствия жестокого обращения с детьми и безнадзорности. Психобиология развития,

52 (7), 671-690.

11. Хельмеке, К., Зайдель, К., Поеггель, Г., Бреди, Т.В., Абрахам, А., и Браун, К. (2009).

Отцовская депривация в младенчестве приводит к дендритам и временным изменениям в развитии дендритов

и формировании шипов в орбитофронтальной коре двупародительского грызуна

octodon degus.Неврология, 163, 790-798.

12. Цзя, Р., Тай, Ф., Ан, С., Чжан, X., и Бродерс, Х. (2009). Влияние неонатальной депривации по отцовской линии

или ранней депривации на тревожность и социальное поведение взрослых у мандаринов

полевок. Поведенческие процессы, 82 (3), 271-278.

13. Колб Б., Мычасюк Р., Мухаммад А., Ли Ю., Фрост Д. О. и Гибб Р. (2012).

Опыт и развивающаяся префронтальная кора. PNAS, 109 (Дополнение 2), 17186-17193.

14. Лэмб, М. Э., и Келли, Дж. Б. (2009). Улучшение качества контакта между родителями и детьми в

семьях с младенцами и маленькими детьми: основы эмпирических исследований. In

Р. М. Галацтер-Леви, Дж. Краус и Дж. Галацер-Леви. (2009). Научное обоснование

решений об опеке над ребенком (2-е изд.) (Стр. 187-214). Хобокен, Нью-Джерси: Wiley & Sons.

Project MUSE — Влияние отцовской депривации на способность модулировать агрессию

Наша общепринятая концепция переживания человеческой потери предполагает, что скорбящий имел значимый физический и психологический контакт с человеком, который был потерян.Но есть много ситуаций, когда отсутствие или потеря человека в семье, с которым ребенок мог иметь лишь минимальный контакт или никогда даже не видел, признается и упоминается взрослыми. Многие дети матерей-одиночек, зачатых путем искусственного оплодотворения, никогда не узнают своего отца; дети, зачатые, но еще не родившиеся до того, как их отцы ушли из дома для службы в вооруженных силах, и дети отцов, которые время от времени навещают их, но не формируют психологической связи, все сталкиваются с аналогичной психологической дилеммой отсутствия реальной памяти о человеке, который другие называют «отцом».”

Как дети справляются с такой пустотой? Процесс проективной идентификации, который играет решающую роль в развивающихся ранних отношениях между родителями и детьми, как первоначально описал Кляйн и недавно разработал Апри, а также Апри и Стейн, требует фактического присутствия родителя. 1 Может ли психологическая структура ребенка, не испытавшего отцовской интерсубъективности в течение первых нескольких лет жизни, быть относительно стабильной? В то время как важность материнских отношений для оптимального развития была признана и широко задокументирована многими исследователями и клиницистами, занимающимися младенчеством, 2 только недавно глубоко изучили роль отца в раннем развитии. 3 Это упущение тем более удивительно, что Фрейд делал упор на влияние своего отца на его психологическое развитие.

Меняющиеся социальные нравы общества влияют на структуру семьи и семейные отношения. В связи с увеличением числа работающих женщин внимание стало уделяться влиянию материнской депривации на маленьких детей. Текущая потребность в более тесном сотрудничестве отцов в уходе за младенцами теперь сместила больше внимания на отношения детей с отцом, и особое влияние психологического и физического присутствия отца на развитие даже очень маленьких детей является важная область психологического исследования.

Клинические данные, представленные ниже, касаются вопроса влияния отца в течение первых двух лет жизни. Один массив данных, полученных из двух разных источников, состоит из аналитического материала: два пациента мужского пола, которые были похожи друг на друга тем, что оба родились во время Второй мировой войны и жили одни со своими матерями в течение первых двух лет их жизни. живет до тех пор, пока их отцы не присоединились к семье в конце войны. Сходство психологических конфликтов у этих двух мужчин убедительно свидетельствует о том, что раннее отцовское отсутствие, которое они оба пережили, сыграло решающую роль в формировании структуры их личности.

Вторая часть данных поступила от очень маленьких детей, для которых отсутствие отца имело серьезные последствия. Эти совсем маленькие дети лечились вместе со своими матерями в трех терапевтических яслях, за которые я отвечал. Ясли были расположены в учреждениях, где они предоставляли диагностические и терапевтические услуги детям с психическими расстройствами, которым на момент направления к нам было меньше трех лет. Большинство из них жили в семьях, поддерживаемых программой Medicaid, где биологический отец мог появиться ненадолго и неожиданно, но никогда не оказывался психологически связанным со своим ребенком.В то время как в эти семьи обычно входили одна из бабушек ребенка, а также часто тетя и двоюродные братья и сестры, взрослый родственник мужского пола почти никогда не присутствовал постоянно.

No related posts.

Написать ответ

Ваш адрес email не будет опубликован. Обязательные поля помечены *

MF MO p
Мужской Женский Мужской Женский Группа Пол
OXTR 146.3 ± 35,9 53,7 ± 13,9 68,6 ± 17,6 109,4 ± 21,6 0,80 0,35 0,01
V1aR 101,7 ± 9,3 98,3 ± 7,3 98,3 115,3 111,8 ± 10,4 0,38 0,03 0,39
GRα 106,4 ± 34,2 92,3 ± 22,7 96,5 ± 35,7 208,6 ± 53,0 0.19 0,23 0,13
GRβ 116,4 ± 16,2 83,6 ± 11,7 79,1 ± 9,9 135,3 ± 20,4 0,64 0,45 0,01